匿名尿布采集胎粪用于乙基葡萄糖醛酸苷分析：一项可行性试点研究

《Toxics》：Anonymous Diaper-Based Meconium Collection for Ethyl Glucuronide Analysis: A Pilot Feasibility Study Mirjami Jolma, Mikko Koivu-Jolma, Nunzia La Maida, Simona Pichini, Adele Minutillo, Ilona Autti-R?m? and Hanna Kahila

　　

产前酒精暴露（Prenatal Alcohol Exposure, PAE）是一个主要的公共卫生问题，然而母体自我报告仍然不可靠。胎粪在妊娠后半期积累酒精代谢物，乙基葡萄糖醛酸苷（Ethyl Glucuronide, EtG）被认为是妊娠晚期酒精暴露的一种稳定且特异的生物标志物。含有胎粪的尿布可作为收集匿名生物样本的非侵入性方法，有助于减少这一敏感主题研究中的参与偏倚。本试点研究评估了在长时间冷冻储存和国际运输后，匿名收集含胎粪尿布以进行后续定量EtG分析的可行性，并检查了来自同一新生儿样本的配对内一致性。母亲收集其新生儿的尿布，由研究助理将其分为两份（A和B）并在分析前于?80 °C储存。在从105名婴儿收集的178份样本中，137份可进行分析。11份样本超过了定量限（Limit of Quantification, LOQ）（10 ng/g），而2份样本（一对）超过了30 ng/g的临界值，表明存在显著的PAE。EtG浓度显示出较高的配对内一致性，支持了生物标志物和分析方法的稳健性。基于尿布的匿名胎粪收集是可行的，但在操作上具有挑战性。尽管低参与率和方法学因素（包括样本丢失）阻碍了真实患病率的估计，使其具有探索性，但在8%的可分析样本中检测到可定量的EtG，表明PAE仍然是一个问题。

研究人员针对芬兰赫尔辛基大学医院妇女医院的新生儿及其母亲开展了一项单中心试点研究。该研究纳入了能够理解芬兰语书面信息的母亲及其足月健康新生儿，排除了入住新生儿重症监护病房的婴儿。研究采用匿名自愿参与模式，由护士分发材料，母亲自行收集首次排出的含胎粪尿布，并将其置于密封不透明袋中返还。样本随后被分为两份（A和B）并在?80 °C下储存，后因物流原因经许可运输至意大利的认证实验室进行分析。实验室采用经过验证的气相色谱-串联质谱法（Gas Chromatography-Tandem Mass Spectrometry, GC–MS/MS）对乙基葡萄糖醛酸苷（EtG）进行定量检测，定量限（LOQ）设定为10 ng/g，并采用30 ng/g的国际公认临界值区分显著暴露与非暴露。

研究结果显示，在2021年约1170名符合纳入标准的母婴对中，仅105对参与了研究，估计参与率约为9%。在总共收集的178份尿布来源样本中，因数量不足或过度干燥排除了41份，最终137份样本适合分析。对137份样本的分析表明，绝大多数（92%）样本EtG浓度低于10 ng/g，仅有1.5%的样本超过30 ng/g的临界值，表明存在显著产前酒精暴露。在46对可分析的配对样本中，EtG水平显示出97.8%的一致性，证明了即使在尿布来源的胎粪中，该生物标志物的测量也具有可靠性。在自我报告方面，90.5%的参与者否认在妊娠后半期使用酒精等物质，但生物标志物检测发现的比例高于自我报告，其中一名未回答物质使用问题的参与者其新生儿胎粪中EtG浓度超过了30 ng/g。关于延迟冷冻的影响，周一收集的样本（可能延迟冷冻长达三天）与其他日样本在非可分析性和EtG定量结果上未显示出统计学显著差异。

讨论部分指出，低参与率可能导致选择偏倚，使得研究人群可能偏向于更健康意识强的母亲，从而低估了真实的PAE流行率。尽管存在样本丢失（23%不可分析）和因长时间储存及运输导致的潜在降解风险，但该研究证实了基于尿布的匿名胎粪采样在概念上的可行性。EtG作为一种生物标志物在本研究条件下表现出了良好的稳定性与可重复性。研究人员强调，未来的研究应优化样本处理流程以减少样本损失，重新评估EtG的临界值，并考虑结合多种生物标志物以扩大检测窗口，特别是在芬兰这类临床识别率较低但可能存在漏诊的地区。

论文结论部分总结道：匿名收集含胎粪尿布是可行的，但在操作上具有挑战性。确保样本质量和提高参与率对未来研究至关重要。EtG仍然是妊娠晚期酒精暴露的可靠生物标志物，在本研究的分析前条件下表现出较强的配对内一致性。新生儿胎粪中可定量EtG的低检出率仅为参与母婴对的暴露情况提供了初步指示，应作为探索性结果谨慎解读。本研究发表于《Toxics》期刊。