综述：山羊奶中的生物活性化合物作为ACE抑制剂：一项系统评价

《Applied Food Research》：Bioactive compounds in goat milk as ACE-inhibitory agents: a systematic review

　　扎卡里亚·侯赛因·阿卜杜勒拉赫曼 | 艾哈迈德·普拉莫诺 | 法鲁克·海达尔·巴里多 | 拉蒂·德维·尤德哈尼 | 埃迪·普拉莫诺 | 穆罕默德·卡希亚迪
印度尼西亚苏拉卡arta市杰布雷斯肯廷根伊尔·苏塔米36A路，塞布拉马斯马特大学农业学院农业科学研究生院

**摘要**
高血压仍然是全球发病率的主要原因之一，需要长期的预防策略，包括营养干预。牛奶是动物蛋白的来源，其中含有生物活性化合物，特别是能够抑制血管紧张素转换酶（ACE）的肽类，这可能有助于降低血压。本综述系统地探讨了山羊奶生物活性肽的ACE抑制潜力，综合了体外、体内和计算机模拟研究中的证据。研究结果表明，山羊奶中的蛋白质，尤其是α1-酪蛋白、α2-酪蛋白、β-酪蛋白和κ-酪蛋白，是ACE抑制肽的主要前体。虽然大多数现有研究集中在温带地区的奶山羊品种上，但本综述强调了山羊奶肽的重要潜力，并指出了关于热带地区（如印度尼西亚）本地奶山羊品种中生物活性化合物的关键研究空白。通过系统地梳理全球范围内的相关证据，本研究为未来开发基于热带山羊奶的功能性食品提供了理论框架。

**1. 引言**
高血压仍然是主要的健康挑战之一，其特征是血压升高，定义为收缩压超过140毫米汞柱和舒张压超过90毫米汞柱。如果持续存在且未经治疗，高血压可能导致各种严重并发症，包括心血管疾病、中风和早逝。世界卫生组织的第一份《全球高血压报告》强调了早期发现和有效治疗这种“无声杀手”的重要性，呼吁全球和国家采取行动加强高血压控制（Kario等人，2024年，《2021年药理指南》）。除了降低与健康相关的生活质量（HRQoL）外，高血压，尤其是高压，是全球主要的死亡原因之一，每年导致约1040万人死亡（Yao等人，2019年；Stanaway等人，2018年）。根据印度尼西亚卫生部的数据，高血压的患病率从2013年的25.8%上升到2018年的34.1%（印度尼西亚卫生部2013年，印度尼西亚卫生部2018年）。根据最新的全国健康调查，18岁及以上成年人的高血压粗患病率从2013年的27.9%上升到2023年的31.6%（Mashuri等人，2022年）。尽管过去十年的治疗率显著提高（Muharram等人，2025年），但仍有26.9%的高血压患者不知道自己的病情（Mashuri等人，2022年）。随着印度尼西亚人口预计在2035年超过3亿，这一公共卫生负担预计将进一步加剧（Setiawan和Sukamdi，2021年）。高血压的发展与血管紧张素转换酶（ACE）将血管紧张素I转化为血管紧张素II的过程密切相关（Cutrell等人，2023年）。当肾素催化血管紧张素原转化为血管紧张素I（一种无活性的十肽）时，高血压开始形成。随后，血管紧张素I被ACE水解为血管紧张素II，这是一种强效的血管收缩激素，会导致动脉收缩和血容量及血管阻力增加，最终导致血压升高。因此，抑制ACE是防止血管紧张素I转化为血管紧张素II的关键治疗策略（Zhao和Xu，2008年）。治疗高血压对于维持正常的血压水平至关重要（Parati等人，2021年）。高血压的药物治疗通常涉及ACE抑制剂，这些抑制剂通过阻断ACE的肽基二肽酶活性来防止血管紧张素II的形成（Ashfield和Ojha，2025年）。这种机制有助于血管扩张并有效降低血压。
既有药物治疗也有非药物治疗方法。药物治疗包括ACE抑制剂（ACEi）、血管紧张素受体阻滞剂（ARBs）、钙通道阻滞剂、利尿剂、α-阻滞剂和β-阻滞剂，这些药物可以单独使用或联合使用（Ojha等人，2022年）。然而，由于合成药物的相对较高成本及其长期使用可能带来的潜在不良反应，非药物治疗方法往往更受青睐。长期使用合成药物常伴随潜在的不良反应，如低钾血症、疲劳、胃肠道紊乱、反射性心动过速、踝关节水肿、牙龈增生、味觉障碍、血管性水肿和血清钾水平升高（Hong和Shan，2021年）。牛奶是婴儿和儿童的主要营养来源，在成人健康中也起着重要作用（Toscano等人，2023年）。牛奶的全面营养成分包括蛋白质、脂肪、维生素、矿物质和乳糖（Toscano等人，2023年）。除了满足基本营养需求外，牛奶还具有作为功能性食品的潜力，提供必需的营养素和特定的健康益处（Ponte等人，2025年；Wang等人，2022年；Vargas-Ramella等人，2021年）。大量研究表明，牛奶具有多种健康促进作用，包括抗菌（He等人，2025年；Hou等人，2018年；Ciccaglione等人，2019年；Biasibetti等人，2021年）、抗氧化（Zhang等人，2025年；Stobiecka等人，2022年）和降压（Borges等人，2025年）功效。这种功能性潜力主要归因于牛奶中含有的生物活性化合物。因此，最近的研究越来越多地将牛奶视为有助于疾病预防的生物活性物质来源。

牛奶中的生物活性化合物包括生物活性肽和多不饱和脂肪酸（Flis等人，2025年）。从牛奶蛋白水解中获得的生物活性肽具有抑制ACE的作用。研究表明，牛奶中的生物活性肽可以调节血压、免疫功能和氧化状态（Guha等人，2021年）。这些特性使牛奶成为具有ACE抑制效果的功能性食品的有希望的候选者。全球广泛消费的牛奶来自牛、山羊、水牛和绵羊，每种奶都具有独特的化学成分和生物活性特征。牛奶可能对某些人产生不良影响，如过敏和乳糖不耐受（Heine等人，2017年；Dhiaurridho等人，2022年）。具体来说，A1牛奶含有A1和A2 β-酪蛋白的混合物，而A2牛奶仅含有A2 β-酪蛋白。与A1牛奶相比，A2牛奶更易消化，胃肠道问题较少（Zhang等人，2025年；Karimah等人，2026年）。品种（Brodziak等人，2020年）、泌乳阶段（Tadesse等人，2024年；Voronina等人，2023年）和饮食（Hadrová等人，2021年；Salzano等人，2022年）等多种因素会影响牛奶中生物活性化合物的含量。许多实验和观察性研究探讨了牛奶中的生物活性化合物，采用了不同的方法并得出了不同的结果（Zhu等人，2025年；Xing等人，2024年）。大量研究关注这些生物活性化合物的ACE抑制潜力，但迄今为止尚缺乏系统性的科学证据总结。因此，需要一份全面的基于证据的文献汇编，以支持功能性食品领域的研究、产品开发和政策建议。本系统综述旨在提供综合证据，以支持将山羊奶开发为用于高血压管理的功能性食品。

**2. 材料与方法**
2.1. 搜索策略和纳入标准
本工作分析了已发表研究的次要数据。由于研究不涉及动物实验或动物材料，因此无需伦理批准。本系统综述综合了有关山羊奶ACE抑制特性的现有科学证据，遵循叙述性综述的既定指南，以提供现有知识的全面概述，同时指出当前的研究空白并提出未来研究方向。系统文献综述遵循了《系统综述和荟萃分析的优先报告项目》（PRISMA）指南（Page等人，2021年）。使用预定义的关键词进行文献搜索，包括“山羊”、“牛奶”、“肽”、“生物活性”、“化合物”、“ACE抑制剂”和“降压”，并使用“AND/OR”组合。搜索范围涵盖Scopus、PubMed和Garuda数据库。选择Scopus是因为其在跨学科领域的广泛覆盖范围；PubMed侧重于生物医学和健康相关研究，特别是与降压研究相关的内容；Garuda则用于捕捉印度尼西亚本地奶山羊奶的相关文献。每个数据库中使用的具体搜索字符串见表1。所有检索到的记录都被编译并导入Covidence进行初步筛选，仅限2015至2025年间的同行评审文章。搜索策略使用了以下组合术语：（“山羊奶” OR “牛奶”）和（“降压” OR “ACE抑制剂” OR “生物活性化合物” OR “功能性肽” OR “健康益处” OR “治疗潜力”），以及额外的术语“血管紧张素转换酶”、“肾素”、“血压”和“影响山羊奶成分的因素”（表1）。

**表1. 作为ACE抑制剂的山羊奶的搜索策略**
| 数据库 | 查询字符串 | 结果 |
| ---- | ---- | ---- |
| Scopus | TITLE-ABS-KEY ("山羊奶") AND ("降压" OR "ACE inhibit*" OR "肾素" OR "血管紧张素受体" OR "血压" OR "高血压") AND (peptid* OR "生物活性化合物" OR "功能性肽*" OR "乳铁蛋白") AND (LIMIT-TO (DOCTYPE,"ar)) | 241 |
| PubMed | TITLE-ABS-KEY ("山羊奶") AND ("降压" OR "ACE inhibit*" OR "肾素" OR "血管紧张素受体" OR "血压" OR "高血压") AND (peptid* OR "生物活性化合物" OR "功能性肽*" OR "乳铁蛋白") | 26 |
| Garuda | susu kambing antihipertensi DAN senyawa bioaktif susu kambing DAN susu kambing peptida ACE inhibitor | 24 |

根据研究内容与新鲜山羊奶及其蛋白成分的降压特性的直接相关性，选择了相关研究，排除了发酵和成熟乳制品。这一限制旨在减少微生物蛋白水解、起始菌株变异和加工过程中的肽生成带来的混淆因素，从而更清晰地评估牛奶蛋白的ACE抑制潜力。研究重点特别关注生物活性化合物的潜在健康益处。排除了多种出版类型，包括预印本文章、书籍章节和会议论文。此外，还排除了针对非动物奶或仅关注加工和技术方面的研究，以保留高质量的同行评审科学证据。来自数据库的搜索结果被合并，并去除了重复项。随后独立筛选了文章标题和摘要，丢弃了不相关的研究。

2.2. 合格标准
根据预定义的纳入标准对潜在符合条件的研究的全文进行了最终审查。这些标准包括：（1）文献以英语或印尼语发表；（2）研究样本为山羊奶；（3）研究将山羊奶作为降压候选物进行评估；（4）研究评估了肽谱、计算机模拟（体内）、体内（实验动物）或体外分析。

2.3. 数据提取
使用标准化的数据提取表从纳入的研究中提取相关信息。该表格记录了以下信息：第一作者姓名和发表年份、国家、研究目的、牛奶/蛋白类型、方法学、主要生物活性化合物/肽、结果和关键发现。

2.4. 质量评估
使用基于JBI（Joanna Briggs Institute）准实验研究质量评估工具的结构化检查表对纳入研究的 quality 进行了评估。选择该工具是因为大多数研究涉及实验干预（例如酶解或肽给药）和结果测量（例如ACE抑制或血压变化）。每项研究均根据九个具体标准进行评估：（1）明确的因果关系；（2）参与者/材料的相似性；（3）治疗的一致性；（4）对照组的使用；（5）多个结果测量；（6）随访的完整性；（7）结果测量的可靠性；（8）统计分析的适当性。根据总得分将研究分为高质量（>80%）、中等质量（60–80%）和低质量（<60%）（Tran等人，2021年；Tufanaru等人，2019年）。在全文审查过程中，有80项研究因研究设置错误（n=1）、结果错误（n=2）、综述文章（n=2）、语言错误（n=1）、治疗方式错误（n=39）、干预措施错误（n=1）或研究设计错误（n=34）而被排除（图1）。最终，有16篇文章符合本系统评价的纳入标准，包括5项计算机模拟研究和11项体外实验研究，其中一些研究结合了计算机模拟和体外实验的方法。对于同时采用这两种方法的研究，仅在合成分析中考虑了体外实验的结果。所纳入研究的特征在表2中呈现。

表2. 关于山羊奶对ACE抑制作用的研究

**作者** **主要作者所属机构** **期刊名称** **研究地点** **证据来源** **研究目的**
1. Al-Shammary和Doosh 2020 巴格达大学 植物档案 研究表明 通过计算机模拟和体外实验研究酪蛋白水解物抑制血管紧张素转换酶（ACE1）的效力
2. Du和Jia 2023 陕西科技大学 食品化学 中国 通过计算机模拟和体外实验研究山羊奶中短链降压肽的生物可利用性
3. Hermanto 2016 Syarif Hidayatullah伊斯兰国立大学 Alchemy化学杂志 印度尼西亚 通过计算机模拟方法从Etawa山羊奶酪蛋白水解物中鉴定和筛选降压活性肽候选物
4. Widodo等人 2018 Soedirman将军大学 Jurnal Aplikasi Teknologi Pangan 印度尼西亚 通过计算机模拟筛选具有ACE抑制活性的β-酪蛋白肽
5. Ibrahim等人 2017 鹿儿岛大学 开罗大学高级研究杂志 日本 通过体外实验研究山羊奶分离的乳清蛋白和酪蛋白的水解物及肽的ACE抑制活性
6. Parastouei等人 2022 Baqiyatallah医科大学 氨基酸 伊朗 通过计算机模拟研究不同物种牛奶中的活性肽含量
7. Qiao等人 2022 南华农业大学 Journal Frontiers in Nutrition 中国 通过体外实验从山羊奶酪蛋白水解物中分离和鉴定ACE抑制肽
8. Rani等人 2017 ICAR-国家乳品研究所 Biocatalysis and Agricultural Biotechnology 印度 通过计算机模拟研究山羊奶蛋白作为活性肽前体的可能性
9. Rubio-Reyes等人 2025 国立理工学院 分子 墨西哥 通过计算机模拟和酶消化模拟预测山羊酪蛋白等位基因变异体的基因型特异性生物活性
10. Sansi等人 2023 国家乳品研究所 Journal of Food Safety 印度 通过体外实验评估山羊奶蛋白水解物的生物安全性和活性
11. Xing等人 2024 烟台大学 食品 中国 通过体外实验研究山羊奶蛋白衍生肽SLPQ和PYVRYL对内皮细胞的影响及调控机制
12. Shu等人 2018 陕西科技大学 Biomolecules 中国 通过体外实验比较不同蛋白酶对牛奶蛋白水解程度和ACE抑制活性的影响
13. Tagliazucchi等人 2017 莫德纳-雷焦艾米利亚大学 International Dairy Journal 意大利 通过体外实验鉴定脱脂山羊奶消化后释放的ACE抑制肽
14. Tagliazucchi等人 2018 莫德纳-雷焦艾米利亚大学 International Dairy Journal 意大利 通过体外实验比较脱脂牛奶蛋白的消化、生物活性和肽组学特征
15. Zhang等人 2025 陕西师范大学 International Journal of Biological Macromolecules 中国 通过计算机模拟和体外实验鉴定山羊奶蛋白酶解产生的肽的氨基酸序列并分析其功能活性
16. Zhu等人 2025 杭州师范大学 International Dairy Journal 中国 通过计算机模拟、体外实验和体内实验探索和鉴定山羊奶蛋白衍生的新型血管紧张素I转换酶（ACEI）抑制肽

使用JBI准实验研究批判性评估量表（表3）对纳入的16项研究的方法学质量进行了评估。评估结果显示，16项研究中有11项（68.75%）获得了满分100%，表明这些研究具有较高的方法学严谨性，尤其是在涉及体内和全面体外实验的研究中。这些研究表现出明确的原因-结果关系、一致的处理方案以及适当的对照组。相比之下，有5项研究被归类为质量中等。评分较低的研究主要集中在计算机模拟方面。这些研究中潜在的偏倚主要来源于缺乏基于实验室的对照组（Q4）和多重结果测量不清晰或不适用（Q5）。然而，所有研究在测量一致性（Q7）、可靠性（Q8）和适当的统计分析（Q9）方面都达到了高标准。总体而言，纳入文献的高平均质量为山羊奶肽的ACE抑制潜力提供了可靠的证据基础。

表3. JBI准实验研究批判性评估量表的结果

| 作者 | Q1 | Q2 | Q3 | Q4 | Q5 | Q6 | Q7 | Q8 | Q9 | 得分(%) |
|------|------|------|------|------|------|------|------|------|
| Al-Shammary和Doosh 2020 | Y | Y | Y | Y | Y | Y | Y | Y | 100% |
| Du和Jia 2023 | Y | Y | U | Y | Y | Y | Y | 63% |
| Hermanto 2016 | Y | Y | Y | Y | Y | Y | 63% |
| Widodo等人 2018 | Y | Y | Y | Y | Y | Y | 63% |
| Ibrahim等人 2017 | Y | Y | Y | Y | Y | Y | 100% |
| Parastouei等人 2022 | Y | Y | Y | Y | Y | 75% |
| Qiao等人 2022 | Y | Y | Y | Y | Y | Y | 100% |
| Rani等人 2017 | Y | Y | Y | Y | Y | 75% |
| Rubio-Reyes等人 2025 | Y | Y | Y | Y | Y | 100% |
| Sansi等人 2023 | Y | Y | Y | Y | Y | 100% |
| Xing等人 2024 | Y | Y | Y | Y | Y | 100% |
| Shu等人 2018 | Y | Y | Y | Y | Y | 100% |
| Tagliazucchi等人 2017 | Y | Y | Y | Y | Y | 100% |
| Tagliazucchi等人 2018 | Y | Y | Y | Y | Y | 100% |
| Zhang等人 2025 | Y | Y | Y | Y | Y | 100% |
| Zhu等人 2025 | Y | Y | Y | Y | Y | 100% |

从山羊奶蛋白中筛选出的活性肽已经确定了几个具有显著降压潜力的序列。根据分子对接分析，这些肽对ACE活性位点表现出较高的结合亲和力（见表4）。

表4. 来自山羊奶蛋白的潜在ACE抑制肽的序列特征、结合亲和力和分子抑制机制

| 肽序列/组分 | 来源蛋白 | 结合亲和力 | 分子机制 | 参考文献 |
|---------|--------|---------|--------------|---------|
| 1.LDK | 常见山羊奶蛋白 | IC50 9.55 μM | 通过8个氢键实现高稳定性，涉及静电和疏水相互作用 | Du和Jia, 2023 |
| 2.LKT | α-s2-酪蛋白、白蛋白和乳过氧化物酶 | IC50 7.43 μM | 最强抑制剂，具有7个氢键和与Zn2+催化离子的直接配位 | Du和Jia, 2023 |
| 3.LEI | β-酪蛋白和α-s1-酪蛋白 | IC50 12.88 μM | 通过3个氢键和疏水接触实现中等结合亲和力 | Du和Jia, 2023 |
| 4.LEP | 常见山羊奶蛋白 | IC50 19.49 μM | 通过5个氢键稳定；涉及与ACE活性位点的静电相互作用 | Du和Jia, 2023 |
| 5.ARPK | α-s1-酪蛋白 | ΔG结合 -17.2273 kkal/mol | 最高稳定性；与Thr302形成氢键，并与Asp300和Asp453发生酸碱性相互作用，有效阻断ACE活性位点 | Hermanto, 2016 |
| 6.QMK | α-s1-酪蛋白 | ΔG结合 -14.7893 kkal/mol | 通过模拟赖诺普利的作用机制竞争性抑制ACE，与活性位点口袋中的催化残基相互作用 | Hermanto, 2016 |
| 7.HK | α-s2-酪蛋白 | ΔG结合 -16.4404 kkal/mol | 通过静电和氢键阻断ACE活性位点，由S1和S2结合位点内的相互作用稳定 | Hermanto, 2016 |
| 8.QK | α-s1-酪蛋白 | ΔG结合 -16.4380 kkal/mol | 通过与Zn(II)辅因子周围残基的自发相互作用实现高结合亲和力，防止底物水解 | Hermanto, 2016 |
| 9.LNP | α-s2-酪蛋白 | ΔG结合 -14.7052 kkal/mol | 利用疏水相互作用屏蔽ACE的催化中心 | Hermanto, 2016 |
| 10.PYP | κ-酪蛋白 | ΔG结合 -15.4747 kkal/mol | 通过与活性位点残基的相互作用抑制ACE，特别是靶向S1′和S2′亚位点 | Hermanto, 2016 |
| 11.ETM | β-酪蛋白 | 结合能 -8.0 kkal/mol | 通过与催化位点的相互作用阻断ACE，尽管亲和力略低于三肽 | Widodo等人, 2018 |
| 12.GVPK | β-酪蛋白 | 结合能 -7.8 kkal/mol | 通过氢键和静电相互作用稳定ACE复合物 | Widodo等人, 2018 |
| 13.INK | β-酪蛋白 | 结合能 -8.2 kkal/mol | 通过与Glu162、Cys352和Cys370的氢键结合，并与Zn(II)金属离子相互作用 | Widodo等人, 2018 |
| 14.PVEP | β-酪蛋白 | 结合能 -8.0 kkal/mol | 最高的蛋白酶抑制活性（0.75），具有稳定的结合能，模仿商业药物的抑制作用 | Widodo等人, 2018 |
| 15.QDK | β-酪蛋白 | 结合能 -6.8 kkal/mol | 与ACE活性位点相互作用，但由于违反Lipinski规则多次，其潜在的ADME特性较低 | Widodo等人, 2018 |
| 16.QPK | β-酪蛋白 | 结合能 -7.8 kkal/mol | 通过与ACE结合口袋的相互作用建立稳定的抑制效果，与GVPK的亲和力和结构稳定性相当 | Widodo等人, 2018 |
| 17.PEQSLA | CQCL | β-乳球蛋白 | IC50 4.45 μM | 通过其C端疏水残基抑制ACE活性 | Ibrahim等人, 2017 |
| 18.QSLV | YPFTGPI | β-酪蛋白 | IC50 4.27 μM | 通过模仿底物的结合模式表现出强抑制作用；C端的Proline和芳香残基防止酶切同时阻断活性位点 | Ibrahim等人, 2017 |
| 19.ARHP | HH Phelps | κ-酪蛋白 | IC50 4.27 μM | 通过与Histidine和Proline残基的高密度相互作用，形成稳定复合物并抵抗进一步的胃肠道蛋白水解，确保持续抑制效果 | Ibrahim等人, 2017 |
| 20.FPQY | LQYP | α-s1-酪蛋白 | ACE抑制作用 45.76%-57.95% | 作为非竞争性抑制剂，结合到ACE的非催化位点 |该物质通过下调促进增生和迁移的基因，并调节血管平滑肌细胞中的MAPK信号通路，有效抑制Ang II诱导的血管重塑。（Qiao等人，2022年）21.RFαs1-酪蛋白PeptideRanker得分为0.99??????，预测其具有很强的ACE抑制活性，由于其二肽结构，显示出很高的抗高血压和抗糖尿病活性。（Rani等人，2017年）22.AWαs1-酪蛋白，αs2-酪蛋白PeptideRanker得分为0.97，主要通过从αs1-酪蛋白和αs2-酪蛋白释放出来发挥ACE抑制作用，并且对胃肠道消化具有高度抗性。（Rani等人，2017年；Rubio-Reyes等人，2025年）23.IFαs2-酪蛋白，β-酪蛋白PeptideRanker得分为0.95，作为一种特定的ACE抑制剂；这种二肽既从αs2-酪蛋白也从β-酪蛋白中释放出来，并且具有非常高的生物活性概率得分（0.95）。（Rani等人，2017年；Rubio-Reyes等人，2025年）24.NFαs2-酪蛋白PeptideRanker得分为0.94，被鉴定为潜在的ACE抑制剂和DPP-IV抑制剂；它在蛋白水解过程中特异性地从αs2-酪蛋白序列中释放出来。（Rani等人，2017年）25.KFαs2-酪蛋白，β-酪蛋白PeptideRanker得分为0.91，既作为ACE抑制剂又作为DPP-IV抑制剂；从αs2-酪蛋白和β-酪蛋白中释放出来，这增加了 goat milk 肽组的多功能性。（Rani等人，2017年）26.VFαs1-酪蛋白，αs2-酪蛋白PeptideRanker得分为0.82；在反刍动物物种中，其浓度为9.2 μmol L-1时能够有效阻断ACE催化的十肽血管紧张素I的转化。（Rani等人，2017年；Tagliazucchi等人，2018年）27.PLαs1-酪蛋白，β-酪蛋白PeptideRanker得分为0.81，预测为ACE抑制肽；具有多功能生物活性，包括酶抑制作用。（Rani等人，2017年；Rubio-Reyes等人，2025年）28.GLαs1-酪蛋白，κ-酪蛋白PeptideRanker得分为0.81，预测为短ACE抑制肽；可能与其ACE催化位点相互作用。（Rani等人，2017年；Rubio-Reyes等人，2025年）29.PFβ-酪蛋白PeptideRanker得分为0.9934，在β-酪蛋白肽中具有最高的生物活性概率（0.9934），作为ACE2抑制剂发挥作用。（Rubio-Reyes等人，2025年）30.QGLαs1-酪蛋白PeptideRanker得分为0.533495，预测为ACE抑制肽；可能减少血管紧张素II的生成。（Rubio-Reyes等人，2025年）31.VIWα-S1-酪蛋白PeptideRanker得分为0.610494，预测为具有潜在抗高血压作用的ACE抑制肽。（Rubio-Reyes等人，2025年）32.GYα-S1-酪蛋白PeptideRanker得分为0.741592，预测为ACE抑制肽，与肾素-血管紧张素系统的调节有关。（Rubio-Reyes等人，2025年）33.PQLα-S1-酪蛋白PeptideRanker得分为0.527882，预测为有助于血压调节的ACE抑制肽。（Rubio-Reyes等人，2025年）34.DMβ-酪蛋白PeptideRanker得分为0.607466，预测为ACE抑制肽；可能抑制血管紧张素转换酶的活性。（Rubio-Reyes等人，2025年）35.PIQAFβ-酪蛋白PeptideRanker得分为0.749093，预测为具有多功能代谢调节潜力的ACE抑制肽。（Rubio-Reyes等人，2025年）36.PILβ-酪蛋白PeptideRanker得分为0.641797，预测为有助于心血管调节的ACE抑制肽。（Rubio-Reyes等人，2025年）37.PRβ-酪蛋白PeptideRanker得分为0.787626，预测为与酶抑制途径相关的ACE抑制肽。（Rubio-Reyes等人，2025年）38.PHκ-酪蛋白，α-S2-酪蛋白PeptideRanker得分为0.541688，预测为具有额外抗氧化活性的ACE抑制肽。（Rubio-Reyes等人，2025年）39.AIPYκ-酪蛋白PeptideRanker得分为0.613395，预测为具有抗炎和抗高血压作用的ACE抑制肽。（Rubio-Reyes等人，2025年）40.AIPPKκ-酪蛋白PeptideRanker得分为0.575607，预测为具有广泛生物活性的ACE抑制肽，包括代谢调节。（Rubio-Reyes等人，2025年）41.PWκ-酪蛋白PeptideRanker得分为0.9929，预测为ACE抑制肽；可能减少血管紧张素II的生成，有助于抗高血压作用。（Rubio-Reyes等人，2025年）42.GPFβ-酪蛋白PeptideRanker得分为0.9893，具有预测的ACE抑制活性；与肾素-血管紧张素系统的调节有关。（Rubio-Reyes等人，2025年）43.AGPFαs2-酪蛋白（F等位基因）PeptideRanker得分为0.9692，为等位基因特异性肽，具有预测的ACE抑制活性和增强的生物活性潜力。（Rubio-Reyes等人，2025年）44.SFαs1，αs2-酪蛋白PeptideRanker得分为0.9488，预测为ACE抑制肽；有助于血压调节。（Rubio-Reyes等人，2025年）45.CPLαs1-酪蛋白PeptideRanker得分为0.9165，预测为具有潜在抗高血压作用的ACE抑制肽。（Rubio-Reyes等人，2025年）46.AGAFαs2-酪蛋白（A，B，C）PeptideRanker得分为0.8736，预测为具有心血管保护潜力的ACE抑制 peptide。（Rubio-Reyes等人，2025年）47.PSGAWαs1-酪蛋白PeptideRanker得分为0.8705，具有ACE抑制活性的多功能肽，有助于抗高血压效果。（Rubio-Reyes等人，2025年）48.QPPQPLβ-酪蛋白PeptideRanker得分为0.8238，富含脯氨酸的肽，具有预测的ACE抑制活性，可能表现出强烈的酶抑制作用。（Rubio-Reyes等人，2025年）49.QPMαs1-酪蛋白PeptideRanker得分为0.8101，预测为ACE抑制肽；与血管紧张素II的生成抑制有关。（Rubio-Reyes等人，2025年）50.GPV??????*β-酪蛋白IC50为4.7 μmol L-1，通过与酶的催化位点相互作用抑制ACE，有效防止血管紧张素II的生成。（Tagliazucchi等人，2017年；Tagliazucchi等人，2018年）51.VYβ-酪蛋白IC50为7.1 μmol L-1，通过活性位点结合（S1/S2）竞争性抑制ACE，并通过C端酪氨酸增强效果。（Tagliazucchi等人，2017年；Tagliazucchi等人，2018年）52.IAE，IP，PL，AFβ-，αS1-，αS2-，κ-酪蛋白，β-乳球蛋白和α-乳白蛋白IC50为35-330 μmol L-1，通过与ACE催化位点相互作用进行竞争性抑制；C端疏水残基提高了结合亲和力。（Tagliazucchi等人，2017年）53.VPP，LxVL，LxYαS2-酪蛋白β-乳球蛋白IC50为2.1-18 μmol L-1，富含脯氨酸和疏水C端残基的强烈竞争性抑制增强了稳定性和ACE结合能力。（Tagliazucchi等人，2017年）54.PLWαS1-酪蛋白IC50为36 μmol L-1，通过C端色氨酸的活性位点结合进行竞争性抑制，增强了疏水相互作用。（Tagliazucchi等人，2017年）55.IY各种蛋白质IC50为2.1 μmol L-1，通过与ACE活性位点结合的強力竞争性抑制剂。（Tagliazucchi等人，2018年）56.IPPβ-酪蛋白IC50为5 μmol L-1，一种得到良好记录的乳三肽，能够阻断ACE活性，并以其在胃肠道传输过程中的高稳定性而闻名。（Tagliazucchi等人，2018年）57.LHLPLPβ-酪蛋白IC50为5.8 μmol L-1，通过强力的ACE抑制作用降低血压；在高血压模型（SHR）中表现出高体内疗效。（Tagliazucchi等人，2018年）58.VPPβ-酪蛋白IC50为9 μmol L-1，与IPP协同作用调节血管张力。（Tagliazucchi等人，2018年）59.LPPβ-酪蛋白IC50为9.6 μmol L-1，与ACE活性位点的底物竞争，显著降低酶的催化效率。（Tagliazucchi等人，2018年）60.LWαs1-酪蛋白IC50为15 μmol L-1，作为特定的ACE抑制剂；C端色氨酸的存在增强了其对酶的结合亲和力。（Tagliazucchi等人，2018年）61.HLPLPβ-酪蛋白IC50为21 μmol L-1，即使在部分蛋白水解后仍保持显著的ACE结合能力。（Tagliazucchi等人，2018年）62.IAVαs1-酪蛋白IC50为27 μmol L-1，在INFOGEST模型中被鉴定为羊特有的ACE抑制剂；干扰肾素-血管紧张素系统。（Tagliazucchi等人，2018年）63.LY各种蛋白质IC50为44 μmol L-1，一种常见的反刍动物二肽，作为中等强度的ACE抑制剂，具有高生物利用度。（Tagliazucchi等人，2018年）64.PYVRYL羊乳IC50为7 μg/mL（高浓度），增加一氧化氮的产生。（Xing等人，2024年）65.SLPQβ-酪蛋白IC50为347 μg/mL（中等浓度），促进内皮中的一氧化氮（eNOS）产生。（Xing等人，2024年）66.LSMTDTR新鲜羊乳IC50为2.087 mg/mL；结合能-6.3 kcal/mol，通过与ACE活性位点形成6个氢键，确保稳定的空间定位。（Zhang等人，2025年）67.NIPVGILR羊乳（粉末）IC50为2.845 mg/mL；结合能-6.0 kcal/mol，通过6个氢键锚定有效阻断ACE催化口袋。（Zhang等人，2025年）68.QAQNVQHY羊乳（粉末）IC50为4.884 mg/mL；结合能-5.4 kcal/mol，由于最高的氢键密度（8个键），提供在酶复合体内的优越结构刚性。（Zhang等人，2025年）69.QEALELIR新鲜羊乳IC50为7.584 mg/mL；结合能-7.7 kcal/mol，与ACE受体高度自发放生结合，具有高氢键密度（7个键）。（Zhang等人，2025年）70.FKF酪蛋白和乳清蛋白IC50为106.59 kcal/mol；IC50为474.62 ± 12.36 μM，通过与S1和S2活性位点内的核心残基相互作用并协调催化Zn（II）离子，有效抑制ACE。（Zhu等人，2025年）71.FRY酪蛋白IC50为110.31 kcal/mol；IC50为393.13 ± 9.18 μM，通过与ACE的S1、S2和Zn（II）口袋的强氢键和静电相互作用，具有强抗高血压效果。（Zhu等人，2025年）72.RWL酪蛋白和乳清蛋白IC50为98.71 kcal/mol；IC50为580.12 ± 5.44 μM，通过与S1和S2结合区域的疏水相互作用和氢键稳定肽-ACE复合体。（Zhu等人，2025年）73.WKPCasei IC50为103.50 kcal/mol；IC50为562.67 ± 6.28 μM，通过靶向S1和S2口袋中的关键残基阻断ACE活性位点。（Zhu等人，2025年）??所鉴定肽的抑制效力使用IC50值进行评估，IC50值表示达到50%靶标活性所需的浓度。较低的IC50值（以μM表示）表示更高的抑制效力。为了更好的线性相关性和比较分析，这些值通过负对数（pIC50 = -log[IC50]）转换为pIC50。因此，较高的值表示更优秀的抑制质量和效力。???SCPs通过与ACE的氢键、静电相互作用和疏水接触相互作用。氢键在稳定结合构象中起着关键作用；特别是LDKQ和LKT分别与ACE形成了8个和7个氢键，而LEPY和LEI分别形成了5个和3个键。值得注意的是，LEKT通过与ACE催化位点中的Zn2+离子的直接协调进一步增强了其抑制潜力。????结合亲和力基于Gibbs自由能（ΔGbinding）进行评估，更负的值表示更自发和稳定的相互作用。这些负值表明肽与ACE之间的复合体在热力学上更有优势。因此，较低的值通常与酶活性位点内更强的分子间吸引力相关，表明结合亲和力更高。?????PeptideRanker工具用于预测从羊乳蛋白中理论上释放的ACE抑制肽的生物活性概率。每个肽序列被赋予0到1的得分，其中最高得分代表最具活性的肽，最低得分表示活性最低的肽。这种计算方法为进一步体外和体内验证提供了理论依据。4.讨论4.1. ACE抑制肽的胃肠道稳定性和生物可利用性ACE抑制肽在胃肠道传输过程中的稳定性对其生物活性至关重要。正如(Parastouei等人，2023年)所展示的，尽管在胰腺阶段由于进一步水解总抑制活性可能会降低，但特定的小分子部分（<3 kda）仍保持高效力。值得注意的是，像vpp ipp这样的强效乳三肽从羊乳β-酪蛋白和κ-酪蛋白中的存活和释放，在浓度超过牛或骆驼的情况下显示出优越的生理潜力。另一项研究(Du和Jia，2023年)表明，羊乳中短链肽(SCPs)的代谢命运因消化酶的复杂性而异；然而，在肠道消化阶段，所有四种SCP的浓度在120分钟时达到峰值。这些结果为未来研究羊乳衍生肽的生物利用度和治疗多样性提供了坚实的方法论框架。4.2. 潜在ACE抑制肽的鉴定从各种羊乳蛋白组分中鉴定出具有ACE抑制潜力的生物活性肽，总结在表4中。这些肽表现出多样的结合亲和力和IC50值，反映了它们通过氢键和疏水相互作用稳定酶-配体复合物的不同能力。值得注意的是，数据突出了热力学稳定性和特定分子机制，如催化Zn2+的协调，这些机制是它们抗高血压效果的基础。一项研究表明，特别是αS2-酪蛋白(αS2-CN)的局部羊乳蛋白水解物在体外能有效抑制ACE1，尤其是当使用胃蛋白酶、胰凝乳蛋白酶或这两种酶的1:1混合物进行水解时（AL-Shammary和Dosh，2020年）。这种强效抑制活性归因于能够抑制ACE1的低分子量肽的存在。从水解物中分离这些肽可能进一步提高其效力。此外，来自其他羊乳酪蛋白组分的肽，如β-CN和κ-CN，也可能具有ACE1抑制潜力。另一项研究还从羊乳中鉴定出186种SCP，其中22种的IC50值低于10 μM。此外，采用定制的工作流程，结合QSAR模型（基于TTPN和GA-SVM算法），在体外消化过程中高效筛选出抗高血压短链肽(SCPs)（Du和Jia，2023年）。在超过183种预测IC50值低于100 μM的疑似SCP中，成功鉴定出四种特定序列：LDKQ、LKT、LEI和LEPY。LKT序列可能来源于αS2-酪蛋白、白蛋白和乳过氧化物酶，而LEI来源于αS1-酪蛋白和β-乳球蛋白。值得注意的是，尽管LEPY和LDKQ的匹配频率很高（分别为269和438个结果），但它们实际上来源于羊乳蛋白质组中不太常见的蛋白质。使用计算机模拟方法从Et从山羊奶中的酪蛋白和乳清蛋白中提取的水解物表现出显著的ACE抑制活性，这种活性比未消化的蛋白质要强得多。研究鉴定出三种强效的ACE抑制肽：来自β-乳球蛋白的PEQSLACQCL、来自β-酪蛋白的QSLVYPFTGPI以及来自κ-酪蛋白的ARHPHPHLSFM。这些肽的抑制活性与传统抗高血压药物卡托普利相当，其IC50值分别为4.45 μM（来自乳清）和4.27 μM（来自酪蛋白）。在所有研究中，羊奶中的耐消化肽总含量最高，而人奶中的含量最低（Parastouei等人，2023年）。该研究表明，驴奶酪蛋白中的ACE抑制肽含量高于其他种类。尽管山羊奶酪蛋白被认为是寻找免疫调节肽的合适来源，而非ACE抑制剂，但研究指出每100克牛奶蛋白中的ACE抑制肽含量最高。此外，一种名为FPQYLQYPY的新肽被发现可以从山羊酪蛋白水解物中提取，并能显著抑制血管平滑肌细胞在血管紧张素II刺激下的增殖和迁移（Qiao等人，2022年）。进一步的转录组分析表明，这种肽能够调节与心血管疾病相关的通路，并具有调节血管重塑的潜力。山羊奶蛋白，尤其是β-酪蛋白和αS1-酪蛋白，显示出释放ACE抑制肽的高潜力（Rani等人，2017年）。胃蛋白酶释放的ACE抑制肽比胰凝乳蛋白酶A更多。二肽和三肽（例如RF、AW、IF、NF、KF）的PeptideRanker评分最高（0.91–0.99）。大多数肽具有苦味，但无毒。理论上，这些肽可以被人体吸收并可能发挥ACE抑制作用。山羊奶蛋白是ACE抑制肽的有希望的来源。计算工具为营养素开发提供了理论基础，但仍然需要在体外和体内进行验证。在不同的酪蛋白等位基因变体之间以及同一等位基因内，肽的组成和预测的生物活性存在显著差异（Rubio-Reyes等人，2025年）。β-酪蛋白A和C等位基因、αs1-酪蛋白E等位基因以及αs2-酪蛋白F等位基因表现出最高的生物活性潜力。一些特定等位基因的肽也被释放出来，这突显了基因型对预测生物活性的影响。最常见的生物活性包括抑制血管紧张素转化酶I（ACE-I）。研究表明，通过对山羊进行酪蛋白基因分型，可以提高山羊奶的功能质量，前提是这些发现通过实验证实。

山羊奶蛋白水解物中的肽的生物安全性和生物活性首先使用预备型RP-C18柱子分离成六个主要组分（Y1–Y6）（Sansi等人，2023年）。随后将Y3组分进一步分离成五个亚组分（Y3-1至Y3-5），其中Y3-3组分的活性最高（63.58 ± 1.91%）。Y3-3组分再使用ECOSIL C18柱子分离成六个亚组分（M1–M6），其中M4组分显示出最强的ACE抑制活性。M4组分再次使用C18柱子的RP-HPLC方法纯化，得到七个峰（F1–F7），其中F3组分表现出最高的ACE抑制效力（71.19% ± 0.71%）。直接比较时，乳清蛋白水解物的ACE抑制活性（73.34%）高于酪蛋白水解物（67.95%），而完整的酪蛋白和乳清蛋白的活性则较弱。另一项研究发现SLPQ肽在高血压大鼠中具有显著的降血压效果（Xing等人，2024年）。这种肽通过抑制促炎分子的产生和调节与Ang II诱导的内皮细胞炎症应激相关的信号通路来发挥作用。此外，水解程度随水解时间的延长而增加（Shu等人，2018年）。使用碱性蛋白酶水解得到的产物具有最高的DH值和最强的ACE抑制活性。山羊奶水解物显示出比牛奶水解物更强的ACE抑制效果。因此，选择合适的酶对于生成这类肽至关重要，有助于功能性乳制品的开发，并为工业应用提供理论基础。另一项研究成功鉴定了18种已知能够抑制ACE的肽（Tagliazucchi等人，2017年）。其中一些肽还表现出二肽基肽酶IV（DPP-IV）抑制活性和抗氧化潜力。例如FPQ、AVPQ和NVPQ等肽可作为非竞争性ACE抑制剂，可能对整体的ACE抑制活性有所贡献。总之，研究结果表明山羊奶的体外消化可以释放大量的ACE抑制肽。还有一项研究发现山羊奶的消化率最高（Tagliazucchi等人，2018年），但在这项研究中，羊奶被认定为ACE抑制肽的最有效来源。肽组学分析进一步显示，消化后山羊奶和羊奶的肽序列具有高度相似性。

体外实验表明，四种肽（LSMTDTR、QEALELIR、NIPVGILR和QAQNVQHY）的ACE抑制IC50值分别为2.087、7.584、2.845和4.884 mg/mL（Zhang等人，2025年）。另一项研究通过虚拟方法鉴定了六种新肽候选物，其中四种（FKF、FRY、RWL和WKP）在体外测试中表现出ACE-I抑制活性（Zhu等人，2025年）。其中最有前景的两种肽FRY和FKF在高血压大鼠中进一步进行了研究，结果发现FRY能显著降低血压。山羊奶肽的ACE抑制作用主要是通过与酶的催化位点通过氢键、电静力和疏水力相互作用而实现的。许多肽具有较高的结合稳定性，形成多个氢键并与关键残基及Zn2?催化离子相互作用，从而共同阻止底物水解（Zhang等人，2025年；Zhu等人，2025年；Du和Jia，2023年）。特别是S1和S2位点内的相互作用在稳定肽结合和阻止血管紧张素I进入活性位点方面起着关键作用（Hermanto，2016年；Tagliazucchi等人，2017年；Tagliazucchi等人，2018年）。大多数肽作为竞争性抑制剂起作用，其效力受C末端疏水性和芳香性残基以及富含脯氨酸的基序的影响，这些基序增强了结合亲和力和耐胃肠道降解的能力（Ibrahim等人，2017年；Tagliazucchi等人，2017年）。某些肽的结合方式类似于合成抑制剂，增强了它们占据催化口袋并降低酶活性的能力（Hermanto，2016年）。除了竞争性抑制外，还可能发生非竞争性结合等机制（Qiao等人，2022年）。短肽，尤其是二肽和三肽，因其结构与ACE活性位点的适应性以及良好的生物利用度而成为最活跃的形式（Rani等人，2017年；Rubio-Reyes等人，2025年）。此外，某些肽可能在ACE抑制之外还参与血管调节，包括调节一氧化氮的产生，从而在抗高血压活性中发挥更广泛的作用（Xing等人，2024年）。总体而言，山羊奶的抑制效果反映了肽的特定相互作用和结构特征的综合作用。

使用JBI批判性评估工具评估该方法的质量提高了本系统评价结果的可靠性。评估结果显示，大多数纳入的研究（n=11）具有较高的方法学质量，尤其是在对照组使用和结果测量的客观性方面。一些研究报告了可测量的生理效应（例如Xing等人2024年鉴定的SLPQ肽，在体内模型中使收缩压显著降低了16.48毫米汞柱），这表明所提出的临床前证据不仅具有统计学意义，而且采用的 方法学偏差风险较低。尽管一些基于计算的研究（如Widodo等人，2019年；Hermanto等人，2022年）因缺乏直接实验验证而被归类为中等质量，但它们仍被纳入以丰富潜在肽序列的数据库。因此，计算数据和高质量体内验证的结合有助于弥合理论预测与山羊奶肽作为强效抗高血压剂的功能现实之间的差距。由于实验设计和结果测量的多样性，因此进行了定性综合分析而非荟萃分析。

过去十年中，关于牛奶与ACE活性关系的研究取得了显著进展（图2）。许多研究表明，牛奶（包括牛奶和山羊奶）是抑制ACE的生物活性肽的潜在来源，而ACE是调节血压的关键酶。这些肽主要通过牛奶蛋白（尤其是酪蛋白和乳清）的水解产生，并已被证明具有ACE抑制作用。这些肽的效力受牛奶类型、酶水解方法及肽的特定特性影响。然而，也需认识到一些局限性。文献搜索仅限于三个电子数据库，可能会遗漏其他地方索引的相关研究。尽管鉴定的肽在计算机模拟和体外实验中表现出强烈的ACE抑制活性，但其生理效应仍有待验证，因为它们可能在体内面临降解、吸收障碍和有限的系统生物利用度。根据欧洲食品安全局（EFSA膳食产品、营养与过敏小组（NDA）2012年的研究，两种三肽——异亮氨酸-脯氨酸-脯氨酸（IPP）和缬氨酸-脯氨酸-脯氨酸（VPP）具有维持正常血压的潜力，但目前科学证据尚不足以证明直接食用这些肽会导致血压降低或稳定。尽管其生理效应被认为可能有益，但根据欧洲食品健康声明的科学标准，尚未得到最终证实。未来的研究应通过验证预测的生物活性、阐明潜在机制并确认山羊奶肽的生理相关性来扩展现有发现。

本系统评价的另一个局限性是现有文献的地理和生物学偏向。在16项纳入的研究中，绝大多数集中在温带奶牛品种（如萨能山羊或阿尔卑斯山羊）上，这些山羊通常在地中海或温带气候条件下进行集约化养殖。因此，目前的全球数据库可能无法完全反映热带地区（特别是印度尼西亚）山羊群的生物活性潜力。证据综合表明，ACE抑制肽的释放高度依赖于牛奶蛋白的初级结构。例如，印尼本地山羊（如Peranakan Etawa和Kacang品种）的遗传特征表明，山羊奶蛋白基因（特别是α-酪蛋白（CSN1S1）和β-酪蛋白（CSN2）位点存在遗传多态性。这些遗传变异会导致氨基酸替换或缺失，从而影响胃肠道消化过程中的蛋白水解位点。例如，当地热带山羊的β-酪蛋白基因中的特定多态性可能会生成或消除胃蛋白酶或胰凝乳蛋白酶的作用位点，从而影响肽的释放或浓度。因此，需要进行局部蛋白质组学研究，以验证印尼山羊奶是否可用于开发东南亚的目标功能性食品。

山羊奶作为一种功能性食品具有显著潜力，其生物活性肽和功能性蛋白质有助于发挥ACE抑制作用。然而，目前大多数证据来自温带奶牛品种的研究，因此需要进一步研究热带和本地遗传资源（如印尼奶山羊）。本系统评价表明，大多数ACE抑制生物活性肽来源于αs1-酪蛋白、αs2-酪蛋白、β-酪蛋白和κ-酪蛋白组分，强调了酪蛋白蛋白作为山羊奶中ACE抑制肽主要前体的关键作用。未来的研究需要整合计算机模拟筛选（in silico screening）、体外验证（in vitro validation）和体内药代动力学建模（in vivo pharmacokinetic modeling），以确认山羊奶生物活性肽的抗高血压疗效和生物利用度。

**CRediT 作者贡献说明：**
- Zakaria Husein Abdurrahman：概念化、方法学设计、初稿撰写、数据可视化、数据分析。
- Ahmad Pramono：验证工作、研究监督。
- Farouq Heidar Barido：文本撰写与审核编辑。
- Ratih Dewi Yudhani：文本撰写与审核编辑、验证工作、研究监督。
- Edi Pramono：验证工作。
- Muhammad Cahyadi：概念化设计、文本撰写与审核编辑、验证工作、研究监督以及资金筹措。

**伦理审批：**
无需进行伦理审批，因为本研究使用的是来自先前发表研究的数据，未直接涉及人类或动物实验。

**资金来源：**
本项目得到了塞布莱斯马雷特大学（Universitas Sebelas Maret）2026财年的博士研究计划（PPS Doktor-UNS）的支持，研究协议编号为460/UN27.22/PT.01.03/2026。

**利益冲突声明：**
作者声明不存在任何可能影响本文研究的财务利益冲突或个人关系。

**关于手稿制作过程中生成式人工智能（generative AI）和人工智能辅助技术的说明：**
在撰写过程中，作者使用了 Gemini 和 Grammarly 工具来优化文本的表述，确保语法、拼写、标点和语气方面的准确性。使用这些工具后，作者对内容进行了必要的审查和修改，并对最终发表的文章内容负全责。

**伦理声明：**
由于本研究分析的是已发表研究的数据，因此无需伦理审批。