膳食生物补充剂能够调节受艾美球虫（Eimeria tenella）感染的肉鸡的生长性能、抗球虫效果、氧化状态以及肠道组织形态

《Poultry Science》：Dietary biotic supplementation modulates growth performance, anticoccidial efficacy, oxidative status, and intestinal histomorphology in Eimeria tenella–challenged broilers

　　哈尼·H·阿尔-巴达尼（Hani H. Al-Baadani）| 穆罕默德·M·凯德（Mohammed M. Qaid）| 阿卜杜勒拉赫曼·S·阿尔哈尔西（Abdulrahman S. Alharthi）| 易卜拉欣·A·阿尔希达里（Ibrahim A Alhidary）
沙特阿拉伯国王沙特大学食品与农业科学学院动物生产系，邮政信箱2460，利雅得11451

**摘要**
本研究探讨了膳食益生元、益生菌和合生元补充剂对感染艾美耳球虫（Eimeria tenella）的肉鸡生长性能、抗球虫效果、氧化状态、肠道组织形态、胴体性状和肉质的影响。本研究的新颖之处在于在同一控制感染模型下同时比较了这三种生物策略，并整合了生产性能、生理指标、肠道功能和肉质的变化。肉鸡雏鸡被随机分配到六个处理组：无感染对照组（CONN）、感染对照组（CONP）、添加罗本定（robenidine，0.5克/千克饲料）的抗球虫药物组，以及分别添加益生元（Thepax?，一种富含甘露聚糖寡糖和β-葡聚糖的失活酿酒酵母产品，0.75克/千克饲料）、益生菌（B-ACT?，Bacillus licheniformis DSM 28710，3.2 × 10^9 CFU/克，0.50克/千克饲料）或合生元（Thepax? 0.75克/千克 + B-ACT? 0.50克/千克饲料）的处理组。在15日龄时，感染组鸡只通过口腔接种孢子化的艾美耳球虫卵囊。研究评估了生长性能指标、抗球虫效果、胴体性状、胸肉理化特性和抗氧化状态。结果表明，与CONP组相比，添加生物添加剂的组别生长性能指标有所改善（P < 0.05）。此外，添加生物添加剂的组别病变评分、卵囊排泄量和抗球虫指数均较低。同时，抗氧化能力增强，肠道形态也得到改善，表现在绒毛长度和绒毛与隐窝深度比增加。胴体和肉质指标的变化具有选择性，但总体而言是积极的。因此，膳食生物添加剂，特别是益生菌和合生元，是一种有前景的营养策略，可以有效缓解艾美耳球虫感染的负面影响，提高肉鸡的健康和生产力。

**引言**
球虫病是全球家禽业中最具经济影响的内脏疾病之一（Aziz-Aliabadi等人，2026；Mathis等人，2025）。该病由艾美耳球虫属的细胞内寄生虫引起，它们侵入并破坏肠道上皮细胞，导致营养吸收受阻、生长性能下降以及继发感染的风险增加（Chen等人，2025；Sharma和Kim，2024）。在致病菌种中，艾美耳球虫被认为是毒性最强的种类之一，主要感染空肠，引起严重的出血性病变和肠道炎症（Mohammed等人，2025；Qaid等人，2021a）。因此，艾美耳球虫感染会显著降低饲料利用率、体重增长和整体生产效率（Choi等人，2021；Qaid等人，2021b；Qasem等人，2020）。传统上，通过预防性抗球虫药物和离子载体抗生素来控制球虫病（El-Saadony等人，2026；Mathis等人，2025；Qasem等人，2020）。尽管这些方法有效减轻了感染严重程度，但其长期使用导致了抗球虫菌株的出现，并增加了对抗微生物药物耐药性和家禽产品中药物残留的担忧（Chapman和Blake，2022；Flores等人，2022）。此外，日益严格的法规限制和消费者对无抗生素家禽生产系统的需求加剧了寻找传统抗球虫剂替代品的探索（Soromou，2026；Tsiouris等人，2023）。近年来，功能性饲料添加剂（如益生元、益生菌和合生元）作为传统抗菌剂的替代品，在家禽营养领域受到了越来越多的关注（Abdulazeez等人，2025；Assaf等人，2025；Khomayezi和Adewole，2022；Yadav等人，2022）。益生元是不可消化的膳食成分，能选择性刺激有益肠道微生物的生长和代谢活动，从而改善肠道微生物平衡和健康（Al-Baadani等人，2022；Mousa等人，2025；Rastall等人，2022）。益生菌是活的有益微生物，可对宿主体产生多种积极效应，包括竞争性排除病原菌、增强黏膜免疫、调节炎症反应和改善肠道屏障完整性（Al-Abdullatif等人，2025b；Mercado-Monroy等人，2025；Murshed等人，2024）。合生元结合了益生元和益生菌的作用，可通过促进胃肠道中有益微生物的生长和活性带来协同效益（Al-Habsi等人，2024；Murshed等人，2024；Reddy和Muraleedharan，2026）。先前的研究表明，这些生物添加剂可以改善肉鸡的生长性能、提高营养利用效率、增强免疫反应和支持肠道形态（Assaf等人，2025；Khomayezi和Adewole，2022；Salehimanesh等人，2016；Sulaiman等人，2025）。此外，多项研究表明，膳食益生元、益生菌或合生元可通过改善肠道健康、减轻氧化应激和增强宿主对肠道病原体的抵抗力来缓解球虫感染的负面影响（Mohsin等人，2022；Ogwiji等人，2024）。然而，在受控艾美耳球虫感染条件下评估这三种营养策略效果的比较研究仍有限，特别是在抗氧化状态、胴体特性和肉质参数方面的综合效应方面。氧化应激是球虫感染的关键病理后果，因为肠道炎症和组织损伤会刺激活性氧的过量产生，导致脂质过氧化和细胞抗氧化防御系统的受损（Al-Quraishy等人，2020；Mishra和Jha，2019；Ogwiji等人，2024；Razavi等人，2024）。因此，评估抗氧化标志物可以为研究病原压力条件下肉鸡对膳食干预的生理反应提供有价值的见解。尽管先前的研究报道了单独使用益生元、益生菌或合生元的益处，但在相同受控艾美耳球虫感染条件下直接比较这三种生物策略的研究仍然有限。此外，很少有研究在同一实验模型中同时评估它们对生产性能、抗球虫效果、氧化状态、肠道组织形态、胴体性状和肉质特征的综合作用。本研究假设这些膳食生物添加剂可通过改善肠道健康和抗氧化防御机制来减轻球虫感染的负面影响。因此，本研究旨在比较评估膳食益生元、益生菌和合生元补充剂对感染艾美耳球虫的肉鸡生长性能、抗球虫反应、抗氧化状态、肠道形态、胴体性状和胸肉理化品质的影响。

**材料与方法**
本研究得到了沙特国王大学科学研究伦理委员会（KSU-SE-21–47）的批准，并遵循了机构动物护理指南。

**实验设计与实验对象**
共获得672只1日龄的罗斯肉鸡雏鸡，到达后进行个体称重，然后随机分配到六个膳食处理组，每组8只重复鸡，共计6 × 8 × 14只。所有鸡只在沙特国王大学动物生产系的动物设施中饲养至28日龄，采用标准的管理和环境条件。实验期有意控制在28天，因为艾美耳球虫感染的急性期（包括病变发展、卵囊峰值排出、氧化应激和肠道损伤）主要发生在感染后的起始-生长阶段；因此，28天模型常用于在标准化条件下评估早期生物学和营养反应。

**饲养与管理**
雏鸡在整个实验期间饲养在气候控制的家禽设施中的地面笼子里，每笼面积为1平方米。每笼14只鸡，饲养密度为0.0714平方米/只，符合受控条件下的肉鸡研究标准。温度、通风和光照均按照育种者建议进行管理。第一天环境温度保持在35°C，之后每三天降低约2°C，到第24天降至22-24°C，并保持该水平直至第28天。第一周提供全天照明（24小时/天），之后实验剩余时间为每天23小时光照和1小时黑暗。整个研究期间饲料和水自由供应。雏鸡在孵化场接种了传染性支气管炎（IB）、新城疫（ND）和传染性法氏囊炎（IBD）疫苗，遵循标准商业接种规程。

**实验日粮与处理**
日粮基于玉米-豆粕配方，旨在满足肉鸡起始（0-14天）和生长（15-28天）阶段的营养需求，符合美国国家研究委员会（NRC，1994）的建议。基础日粮的成分组成见表1。所有饲料添加剂均彻底混入基础日粮中以确保均匀分布。六个膳食处理组分别为：
1. 无感染对照组（Control negative: CONN）：不含添加剂的基礎日粮，未感染艾美耳球虫。
2. 感染对照组（Control positive: CONP）：不含添加剂的基礎日粮，感染艾美耳球虫。
3. 标准抗球虫药物组：基础日粮添加0.5克/千克的罗本定（Robenz），并在起始和生长阶段感染艾美耳球虫。
4. 益生元组：基础日粮添加0.75克/千克的Thepax?，感染艾美耳球虫。
5. 益生菌组：基础日粮添加0.50克/千克的B-ACT?，感染艾美耳球虫。
6. 合生元组：基础日粮分别添加0.75克/千克的Thepax?和0.50克/千克的B-ACT?，感染艾美耳球虫。

**表1. 肉鸡基础日粮的成分和所需饲料量（%）**
| 成分 | 起始阶段（1-14天） | 生长阶段（15-28天） |
|--------------|---------------|-----------------|
| 玉米 | 53.84 | 61.43 |
| 豆粕（48% CP） | 38.24 | 30.52 |
| 豆油 | 3.43 | 4.40 |
| 单过磷酸钙 | 1.59 | 1.28 |
| 石灰石 | 1.54 | 1.28 |
| DL-甲硫氨酸 | 0.37 | 0.28 |
| L-赖氨酸 | 0.25 | 0.15 |
| L-苏氨酸 | 0.16 | 0.08 |
| 普通盐 | 0.38 | 0.38 |
| 维生素预混剂1 | 0.10 | 0.10 |
| 矿物质预混剂2 | 0.10 | 0.10 |
| 总计 | 100 | 100 |

| 营养成分 | 计算化学组成 | |
| 干物质（DM） | 88.91 | 88.92 |
| 可代谢能量（kcal/kg） | 3000 | 3100 |
| 粗蛋白 | 22.58 | 19.51 |
| 真蛋白 | 20.73 | 17.71 |
| 粗纤维 | 2.55 | 2.42 |
| 钙 | 0.96 | 0.79 |
| 总磷 | 0.71 | 0.61 |
| 可利用磷 | 0.48 | 0.40 |
| 钠 | 0.16 | 0.16 |
| 氯（Cl） | 0.26 | 0.26 |
| 胆碱 | 0.17 | 0.15 |
| 叶酸（mg/kg） | 2.08 | 2.07 |
| d-赖氨酸 | 1.28 | 1.03 |
| d-甲硫氨酸 | 0.67 | 0.55 |
| 总硫氨基酸（TSAA） | 0.95 | 0.80 |
| d-苏氨酸 | 0.86 | 0.69 |
| d-色氨酸 | 0.24 | 0.20 |
| d-精氨酸 | 1.32 | 1.12 |
| d-缬氨酸 | 0.91 | 0.79 |
| d-亮氨酸 | 1.80 | 1.58 |

**维生素预混剂含量（每千克预混剂）**：
维生素A = 2,400,000 IU；维生素D3 = 1,000,000 IU；维生素E = 16,000 IU；维生素K3 = 800 mg；维生素B1 = 600 mg；维生素B2 = 1,600 mg；维生素B6 = 1,000 mg；维生素B12 = 6 mg；生物素 = 40 mg；叶酸 = 400 mg；烟酸 = 8,000 mg；泛酸 = 3,000 mg；

**矿物质预混剂含量（每千克预混剂）**：
钴 = 80 mg；铜 = 2,000 mg；碘 = 400 mg；铁 = 1,200 mg；锰 = 18,000 mg；硒 = 60 mg；锌 = 14,000 mg。
所有产品均从Biochem（德国Küstermeyerstra?e）购买，附带详细的化学成分和分析规格。B-ACT?是一种粉状益生菌制剂，每克添加剂含有至少3.2 × 10^9个Bacillus licheniformis DSM 28710菌落形成单位（CFU）。该制剂由约3%的孢子浓缩物和97%的碳酸钙作为载体组成（Bampidis等人，2019）。商业益生元Thepax?来源于失活和稳定的酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae var. ellipsoideus），其益生元活性为1 × 10^10个细胞/克。酵母细胞壁富含甘露聚糖寡糖（MOS）和β-1,3-葡聚糖，这些成分具有公认的益生元特性（Al-Baadani等人，2023；Boostani等人，2013）。

**艾美耳球虫卵囊**
艾美耳球虫未孢子化的卵囊来自自然感染的鸡，按照El-Ashram和Suo（2017）的方法处理。卵囊在25°C下用2.5%重铬酸盐处理72小时，通过盐浮选纯化，并在4°C下储存直至使用。物种鉴定基于形态特征、病变模式以及KSU动物学系寄生虫学实验室研究人员对内部转录间隔区1部分区域（ITS-1区域）的分子分析。为了获得纯且具有感染性的接种物，从野外分离的艾美耳球虫卵囊在无球虫的肉鸡雏鸡中连续传代两到三次。通过初步试验评估其毒力，确定能够引起一致的空肠病变而不导致过度死亡的感染剂量。肉鸡在标准条件下饲养至14日龄。第15天，感染组的鸡通过口服给予含20,000个艾美耳球虫孢子化的蒸馏水悬浮液（每只鸡0.5毫升），参考Wang等人（2026）的方法；无感染组仅给予蒸馏水。

**性能指标**
在0日、7日、14日、21日和28日龄时，按重复组别称重鸡只和饲料，以评估生长性能。评估的参数包括平均日增重（ADG；克/只/天）、平均日饲料摄入量（ADFI；克/只/天）和饲料转化率（FCR；计算为ADFI / ADG）。每日记录死亡率，并根据具体情况调整生长性能数据以考虑死亡率的影响。抗球虫指数和病变评分：抗球虫效果通过抗球虫指数（ACI）进行评估，该指数基于出血性腹泻评分、每克粪便中的卵囊数量（OPG）、相对体重增重（RBWG）、病变评分和存活率计算，方法参照Qaid等人（2021b）的研究，并根据Lan等人（2016）的分类标准进行分类。ACI值的解读如下：<120 = 无效；120–140 = 轻微；140–160 = 中等；160–180 = 显著；>180 = 优秀。出血性腹泻是E. tenella感染的特征性症状，从感染后第4天开始每日进行监测。在清除之前的排泄物后，统计粪便中的血点数量，并按0-4的评分标准进行评分（0 = 正常；1-4 = 逐渐加重）。粪便评分百分比是相对于阳性对照组计算的，公式如下：[阳性对照组中的最高粪便评分 - 处理组中的最高粪便评分] / 阳性对照组中的最高粪便评分 × 100。感染后第7天测定卵囊排出情况，采用直接涂片法并进行体积校正。具体操作是将1克新鲜粪便样品与1毫升蒸馏水混合，制成约1:1（w/v）的悬浮液，充分涡旋以确保卵囊均匀分布。然后取10微升悬浮液滴在显微镜载玻片上，在配备数码相机的奥林巴斯复合显微镜（Olympus 6.0，日本东京）下观察并计数卵囊数量。将计数结果转换为每克粪便中的卵囊数（OPG），计算公式为：OPG = (计数的卵囊数 × 总悬浮液体积) / 观察体积。最终结果以每克粪便中的卵囊数（OPG）表示。根据这种方法，所有数据均标准化，以反映原始粪便材料中的卵囊数量。抑制率计算公式为：抑制率 (%) = [(阳性对照组中的OPG - 处理组中的OPG) / 阳性对照组中的OPG] × 100。每日记录临床症状和死亡率，存活率以存活鸟类的百分比表示。在21日龄（感染后7天），每个处理组选取一只鸟类（n = 每组8只）在停止喂食10小时后进行尸检。在人道屠宰后，检查盲肠并依据严重程度给出病变评分（0-4分，0 = 正常；4 = 严重出血且盲肠变暗）。

### 小肠组织形态学
在28日龄屠宰后，从每个处理组选取8只鸟类的约2厘米小肠组织（每个重复组3个样本）。样品用磷酸盐缓冲盐水（PBS）冲洗，固定在10%中性缓冲福尔马林中，制备用于组织学分析。经分级乙醇脱水后，将组织包埋在石蜡中，用Leica RM2255切片机（Leica Microsystems，德国）切成5微米厚的切片，置于50°C水浴中。切片用苏木精和伊红染色，通过奥林巴斯复合显微镜（Olympus 6.0，日本东京）观察并测量绒毛长度、宽度和隐窝深度。绒毛表面积及绒毛长度与隐窝深度比按Al-Baadani等人（2025）的方法计算。

### 血液采样和抗氧化标志物分析
在28日龄，使用无抗凝管从每组8只鸟类的翼静脉采集约3毫升血液。样品在3000 × g条件下离心30分钟得到血清，血清在-80°C下保存待分析。血清总抗氧化能力（TAC）、丙二醛（MDA）和超氧化物歧化酶（SOD）的测定使用Cayman Chemical Company（美国）的商用试剂盒，按照制造商说明进行。吸光度用ELISA微孔板读取器（MR-96A Microplate Reader；Mindray，深圳，中国）测量，方法参照Al-Baadani等人（2025；Humam等人，2020）的研究。

### 屠体特征
在28日龄，随机选取每个笼子中的一只鸟（每组8只），禁食10小时后称重得到屠宰前体重。然后在标准条件下单独屠宰，屠宰后立即记录屠体重量，并按Al-abdullatif等人（2025a）的方法计算覆盖百分比（屠体重量 / 屠前重量）× 100。屠体各部位称重后，以占屠体重量的百分比表示（屠体部位重量 / 屠体重量 × 100）。

### 胸肉理化特性
在尸检后30分钟，评估胸大肌的理化质量参数（pH值和颜色）。每份样品在肌肉内表面不同位置测量两次pH值和颜色值并取平均值。pH值使用Hanna Instruments（Woonsocket，RI，美国）的数字化pH计（型号pH 211）测量，该仪器已校准至pH 4和pH 7缓冲液。胸肉颜色参数——亮度（L*）、红度（a*）和黄度（b*）使用Konica Minolta（东京，日本）的CR-400色度计测量，依据CIELAB色空间系统。此外，还计算总色差（ΔE）、彩度（饱和度指数）、色调角、白度指数（WI）和褐变指数（BI），以全面评估肉色特性，方法参照Al-Abdullatif等人（2023）的研究。

### 统计分析
数据分析使用SAS（2012）软件（SAS Institute Inc.，北卡罗来纳州卡里）的完全随机设计进行。采用一般线性模型（GLM）进行单因素方差分析（ANOVA），饮食处理作为固定效应。统计模型表示为：γij = μ + Ti + eij，其中Yij代表个体观察值，μ表示总体均值，Ti表示第i处理的效应，eij表示随机残差。统计分析前，使用Kolmogorov-Smirnov检验评估数据的正态性，并通过方差同质性检验验证ANOVA假设的适用性。生长性能参数的实验单元为重复组，其他测量指标的实验单元为个体鸟类。当发现显著的处理效应时，使用Tukey多重比较法区分均值。结果以均值 ± 均值标准误差（SE）表示，P < 0.05的差异视为统计学显著。

### 各参数的均值比较
使用正交对比方法评估：（1）基础日粮未添加补充剂情况下E. tenella感染的效应（CONP vs. CONN）；（2）在持续感染条件下添加膳食补充剂的效应（CONP vs. 罗贝宁、益生元、益生菌或合生元，以及组合生物制剂“益生元 + 益生菌 + 合生元”处理）。

### 生长指数
膳食处理对生长指数的影响见表2。起始阶段ADG无显著差异（P > 0.05），但在生长阶段和整个实验期间存在差异（P < 0.05）。所有添加生物制剂的组别及CONN组的ADG均高于CONP组，其中合生元和益生菌组的增重最多。组合对比也显示生物制剂处理组的ADG优于CONP组。

**表2. 饮食处理对E. tenella感染肉鸡生长指数的影响**
| 处理 | ADG（克/天） | ADFI（克/天） | FCR（0-14天） | FCR（0-28天） | FCR（0-28天） | FCR（0-28天） | FCR（0-28天） |
|-------------|-----------|------------|-------------|-------------|-------------|-------------|
| CONP | 31.59 | 76.38 | | 54.24 | 37.87 | | 114.71 | |
| 罗贝宁 | 31.78 | 78.03 | | 54.90 | 35.95 | | 113.72 | |
| 益生元 | 32.41 | 80.69 | | 56.68 | 37.81 | | 114.10 | |
| 益生菌 | 32.69 | 82.44 | | 57.57 | 38.07 | | 116.85 | |
| 合生元 | 32.15 | 82.88 | | 57.86 | 37.33 | | 114.28 | |
| CONN | 32.70 | 81.13 | | 56.91 | 37.22 | | 115.78 | |
| 标准差（SEM） | 0.18 | 0.48 | 0.26 | 0.27 | 0.27 | 0.23 | 0.00 | 0.00 |
| 方差来源 (P值) | 0.48 | 0.00 | <0.00 | 1.02 | 0.27 | 0.46 | 0.23 | 0.30 |
| CONP vs. CONN | 0.59 | 0.00 | <0.00 | 1.05 | 0.74 | 0.34 | 0.36 |
| CONP vs. 罗贝宁 | 0.19 | 0.39 | 0.31 | 0.18 | 0.24 | 0.87 | 0.21 |
| CONP vs. 益生元 | 0.79 | 0.01 | 0.01 | 0.05 | 0.56 | 0.16 | 0.30 |
| CONP vs. 益生菌 | 0.36 | 0.04 | 0.01 | 0.03 | 0.05 | 0.82 | 0.28 |
| CONP vs. 合生元 | 0.19 | 0.00 | 0.02 | 0.00 | 0.02 | 0.07 | 0.04 |

**结论**
膳食处理对生长指数有显著影响。在基础日粮条件下，添加益生元、益生菌或合生元可提高ADG（P < 0.05），尤其是在生长阶段和整个实验期间（P < 0.05）。所有添加生物制剂的组别及CONN组的ADG均高于CONP组，其中合生元和益生菌组的增重最为显著。组合对比也显示生物制剂处理组的ADG优于CONP组。

### 抗球虫效果
膳食处理对E. tenella感染肉鸡抗球虫指数的影响见表3。不同处理组的卵囊排出量存在显著差异（P < 0.0001）。CONP组的卵囊排出量最高（19.25 × 10^3个/克），而CONN组未检测到卵囊。所有添加补充剂的组别及罗贝宁组的卵囊排出量均显著低于CONP组，各处理组间无显著差异。其中，益生元组的抑制率最高（83.12%）。

**表3. 饮食处理对E. tenella感染肉鸡抗球虫指数的影响**
| 处理 | 卵囊数（个/克） | 抑制率（%） | 出血性腹泻（评分） | RBWG（%） | 存活率（%） | 病变评分 | 卵囊值（ACI） |
|-------------|------------|------------|-------------|------------|------------|-------------|------------|
| CONP | 19.25 | 0.00 | 2.54 | 76.32 | 96.4 | 0.00 | 100.00 |
| 罗贝宁 | 4.75 | 75.32 | 1.00 | 83.58 | 99.1 | 0.94 | 24.68 |
| 益生元 | 3.25 | 83.12 | 1.25 | 87.58 | 100.01 | 16.88 | 169.7 |
| 益生菌 | 5.25 | 72.73 | 1.08 | 101.68 | 98.20 | 27.27 |
| 合生元 | 4.75 | 75.32 | 0.75 | 97.45 | 99.1 | 100.01 | 168.8 |
| CONN | 0.00 | 100.00 | 0.00 | 100.00 | 0.00 | 0.00 |
| 标准差（SEM） | 0.94 | 64.92 | 0.12 | 11.49 | 0.38 | 14.91 | 156.1 |
| 方差来源 (P值) | <0.0001 | <0.0001 | <0.0001 | <0.0001 | <0.0001 | <0.0001 | <0.0001 |
| CONP vs. CONN | -0.017 | <0.0001 | -0.049 | -0.029 |
| CONP vs. 罗贝宁 | 0.0003 | <0.0001 | <0.0001 | <0.0001 | 0.48 | 0.001 |
| CONP vs. 益生元 | 0.0003 | <0.0001 | <0.0001 | <0.0001 | 0.060 | <0.0001 |
| CONP vs. 益生菌 | 0.021 | 0.046 | 0.018 | 0.041 | 0.048 | 0.021 |
| CONP vs. 合生元 | 0.047 | 0.047 | 0.044 | <0.0001 | 0.48 | 0.046 |
| CONP vs. 生物制剂 | 0.426 | 0.043 | 0.025 | 0.105 | 0.29 | 0.405 | 0.076 |

**备注**
a-c：同一列中不同上标的均值具有显著差异（P < 0.05）。ADG：平均日增重；ADFI：平均日饲料摄入量；FCR：饲料转化率；SEM：均值标准误差。
ADFI在任何阶段均无显著差异（P > 0.05），表明性能差异不是由饲料消耗引起的。相反，FCR在15-28天和整个实验期间存在差异（P ≤ 0.001）。合生元组的FCR最低，其次是益生元和益生菌组，CONP组的效率最差。总体而言，膳食生物制剂补充剂，尤其是合生元和益生菌，通过提高增重和饲料利用效率，缓解了E. tenella感染引起的生长抑制效应。

### 抗球虫效果
膳食处理对E. tenella感染肉鸡抗球虫指数的影响见表3。不同处理组的卵囊排出量存在显著差异（P < 0.0001）。CONP组的卵囊排出量最高（19.25 × 10^3个/克），而CONN组未检测到卵囊。所有添加补充剂的组别及罗贝宁组的卵囊排出量均显著低于CONP组，各处理组间无显著差异。益生元组的抑制率最高（83.12%）。

### 临床严重程度
补充剂还降低了临床严重程度，表现为肠道出血性腹泻和病变评分降低（P < 0.0001）。尽管合生元组与其他处理组的评分相似，但其出血性腹泻（0.75）和病变评分（0.50）最低，接近CONN组的数值（0.00），表明其肠道保护作用较强。

### 相对体重增重（RBWG）
不同处理组的RBWG存在差异（P < 0.0001）。CONP组的RBWG最低，而益生菌（10SOD活性在CONP组最高（40.60），这可能反映了机体对氧化应激的补偿性反应，但在所有添加了生物活性物质的组中均有所下降，降至与CONN组（21.24）相当的水平，表明氧化应激得到了缓解（P < 0.0001）。总体而言，膳食生物活性物质减轻了由E. tenella引起的肉鸡氧化应激，其中益生菌和合生元处理的效果最为显著——总抗氧化能力（TAC）更高，丙二醛（MDA）水平更低——而不同生物活性物质组间的SOD活性没有显著差异。表5显示了膳食处理对E. tenella感染肉鸡血清抗氧化标志物的影响。

处理组 总抗氧化能力（TAC；μmol/mL） 丙二醛（MDA；nmol/mL） 超氧化物歧化酶（SOD；U/mL）
CONP 14.38c 7.08a 40.60a
Robenidine 18.90a b 4.88b 21.90b
益生元 17.82a b 4.58b 22.29b
益生菌 20.04a 1.92c 22.77b
合生元 19.58a 2.60c 20.78b
CONN 17.14b 4.58b 21.24b

方差来源（P值） 处理组<0.0001 <0.0001 <0.0001
CONP与CONN 0.048 <0.0001 0.049
CONP与Robenidine 0.041 0.041 0.041
CONP与益生元 <0.0001 <0.0001 <0.0001
CONP与益生菌 0.017 0.042 0.051
CONP与合生元 0.021 <0.0001 0.046
CONP与生物活性物质 0.035 0.024 0.001

注：表2.a-c中的相同列内具有不同上标的平均值存在显著差异（P < 0.05）。SEM：平均值的标准误差。

膳食处理对E. tenella感染肉鸡胴体性状的影响见表6。观察到处理组对胴体重量、胴体采收率以及腿、胸腺、肝脏和肠道的相对重量有显著影响（P < 0.05），而胸肉、法氏囊、脾脏和盲肠的相对重量未受影响（P > 0.05）。CONP组的胴体重量最低（1050克），CONN组最高（1236克）。所有添加了生物活性物质的组都提高了胴体重量，其中益生菌处理的提升效果最为明显。胴体采收率也呈现出类似的趋势，CONN组的值最高（68.6%），CONP组最低（64.4%）。感染组的腿肉比例高于CONN组，而胸肉产量则没有变化。与CONP组相比，益生菌（0.85%）和合生元（0.76%）组的胸腺重量有所增加，表明免疫状态有所改善。Robenidine组的肝脏相对重量高于合生元和CONN组，CONP、益生元和益生菌组的值介于两者之间。盲肠的相对重量在CONP组最高，其次是Robenidine组，而益生元、益生菌和CONN组则较低；合生元组的值介于两者之间，表明感染相关的肠道肿胀得到缓解，肠道健康状况有所改善（P < 0.001）。

讨论：
E. tenella引起的球虫病是影响肉鸡生产的最重要的肠道疾病之一，主要表现为肠道损伤、营养吸收受阻、氧化应激以及生长性能下降（Choi等人，2021；Mohammed等人，2025；Qaid等人，2021a；Qasem等人，2020）。实验性感染E. tenella后，生长性能明显受损，表现为体重减轻和饲料转化率（FCR）降低。这一结果与E. tenella的致病性质一致，因为该寄生虫会损害盲肠上皮，干扰营养物质的消化和吸收，并引发肠道炎症（Choi等人，2021；Guo等人，2025；Tomal等人，2023）。由此导致的肠道炎症和组织损伤通常会导致感染肉鸡的生长速率降低和饲料利用效率下降。

在本研究中，接受膳食生物活性物质补充的肉鸡在生长阶段（15-28天）和整个生长周期（0-28天）的表现均优于对照组。这些发现与先前的研究结果一致，表明益生元和益生菌可以改善营养物质的利用并支持受肠道疾病影响的肉鸡的肠道健康（Alqhtani等人，2024；Blokker等人，2022；Obianwuna等人，2023）。例如，多项研究报告指出，在球虫感染期间，补充益生菌或合生元的肉鸡生长速率和饲料转化率得到提升，说明有益微生物可以部分抵消Eimeria引起的肠道损伤的负面影响（Chhetri等人，2026；Javanmiri等人，2024；Ogwiji等人，2024）。本研究观察到的生长性能改善可能归因于多种机制，包括调节肠道微生物平衡、提高消化效率以及通过生物活性物质补充改善的肠道屏障功能（Assaf等人，2025；Chowdhury等人，2025；Sulaiman等人，2025）。此外，益生菌和合生元组在饲料转化率上的显著改善进一步支持了这样的观点：将有益微生物与可发酵底物结合使用有助于建立更加稳定、功能更完善的胃肠道微生物生态系统，并提高营养物质的消化效率（Atuahene等人，2025；Yadav和Jha，2019；Yang等人，2025）。

抗球虫指标的结果证实了实验模型的有效性。感染组表现出高卵囊排泄量、严重的病变评分和较低的相对体重增加，这些都是典型的盲肠球虫病指标。相比之下，接受膳食生物活性物质补充的肉鸡卵囊排泄量显著减少，病变评分更低，抗球虫指数更高。这些结果表明这些添加剂对球虫感染具有保护作用。类似的研究结果在Eimeria感染的肉鸡中也得到证实，其中益生菌或合生元补充剂减少了肠道病变评分和寄生虫排泄（Chalalai等人，2025；Chhetri等人，2026；Ogwiji等人，2024）。这些效果通常归因于肠道微生物群的调节、病原体的竞争排斥、宿主免疫反应的激活以及抗菌代谢产物和短链脂肪酸的产生，这些因素有助于维持肠道完整性并限制病原体的增殖（Calik等人，2019；Javanmiri等人，2024）。

总之，这些结果表明，益生元、益生菌和合生元通过调节肠道微生物群可以减轻肉鸡的寄生虫负担并增强其疾病抵抗力。肠道形态组织学参数提供了有关营养吸收能力和肠道健康的重要信息（Azizi等人，2026；Khan等人，2025；Rus等人，2025）。在本研究中，感染和膳食补充均显著影响了肠道形态。感染组的绒毛较短，绒毛与隐窝的比例发生变化，表明由于球虫感染导致的上皮损伤影响了吸收能力。相比之下，膳食生物活性物质补充显著改善了绒毛长度和绒毛与隐窝的比例，其中益生菌和合生元组的改善最为明显。绒毛结构的改善反映了上皮再生的提高和营养吸收的增强，这可能有助于补充组肉鸡更好的生长表现（Fritzlen，2025）。此外，肠道结构的改善也可能增强了黏膜屏障，减少了病原体的侵袭，从而减轻了球虫感染的严重程度（Calik等人，2019；McKnight等人，2019）。

氧化应激是球虫感染的重要病理后果（Razavi等人，2024；Zhao等人，2025）。在本研究中，感染肉鸡的脂质过氧化增加，表现为丙二醛水平升高，表明氧化应激加剧，这可能损害细胞功能，降低营养物质的利用并加重肠道损伤。相比之下，益生菌和合生元补充剂提高了总抗氧化能力，降低了脂质过氧化水平，表明抗氧化防御得到增强。这些发现与先前的研究一致，即益生菌和合生元可以增强肉鸡在面对病原体或环境压力时的抗氧化状态（Atuahene等人，2025；Mohsin等人，2022；Zhao等人，2025）。氧化应激的降低可能与微生物产生的抗氧化代谢产物和宿主抗氧化酶的激活有关（Li等人，2025；Zhou和Hatzios，2025）。氧化平衡的改善还有助于保护肠道组织，支持免疫反应，并帮助肉鸡从球虫感染中恢复（Wickramasuriya等人，2022）。

正如预期的那样，本研究的结果表明E. tenella感染对肉鸡的胴体性状产生了不利影响，表现为胴体重量和胴体采收率下降，而用药组或未处理组的这些指标则有所改善。我们的发现与Moryani等人（2021）和Qaid等人（2022）的研究结果一致，他们报告称口服Eimeria感染卵囊会对生长性能和胴体产量产生负面影响。肠道肿胀可能反映了与球虫病相关的炎症和组织损伤，这会损害营养物质的利用和生长。这些发现与先前的研究结果一致，即盲肠球虫病会损害营养物质的利用并促进肠道炎症，最终降低胴体产量（Qaid等人，2021b；Qaid等人，2022；Youssef等人，2021）。膳食中添加益生元、益生菌和合生元部分缓解了这些影响，提高了胴体重量和采收率。类似的研究也表明，在球虫感染期间，补充益生菌或合生元的肉鸡肠道健康和营养吸收得到改善，从而提升了胴体性能（Cha等人，2020；Qaid等人，2022）。本研究中益生菌处理组更显著的效果进一步支持了这样的观点：活的有益微生物，单独使用或与可发酵底物结合使用，比单纯使用益生元对生长和胴体产量有更强的影响（Atuahene等人，2025）。

补充组肠道重量的降低进一步证明了肠道完整性的改善和炎症反应的减弱，这一现象在生物活性物质减轻Eimeria感染引起的肠道损伤的研究中也得到了一致验证（Galamatis等人，2025；Madlala等人，2021）。总体而言，这些发现证实了膳食生物活性物质，尤其是益生菌和合生元，可以通过改善肠道健康、减少炎症和增强营养利用来部分恢复受球虫感染的肉鸡的胴体性能（Javanmiri等人，2024）。Javanmiri等人（2024）还指出，饲料添加剂在预防球虫病方面的效果取决于其类型和来源、应用时间和剂量、卵囊感染的程度以及涉及的Eimeria种类。

关于E. tenella感染肉鸡的肌肉pH值和颜色的研究结果也与先前的报告一致，表明膳食生物活性物质对死后30分钟的肌肉初始pH值、颜色成分、颜色差异（ΔE）和白度指数（WI）有轻微影响（P < 0.05），而红色度（a*）、黄色度（b*）、色度、色调角和褐变指数（BI）未受影响（P > 0.05）。肌肉pH值在Robenidine组（5.91）和CONN组（5.83）最高，在合生元组最低（5.37）。颜色差异（ΔE）在CONP组最高，而在益生菌和CONN组最低，表明颜色稳定性有所改善。同样，WI在CONP组最低，在益生菌和CONN组最高。色度、色调角和BI未受到影响（P > 0.05），表明肌肉颜色的饱和度和色调属性在不同处理组间相对稳定。总体而言，膳食生物活性物质的补充适度改善了肉鸡肌肉的颜色质量，特别是通过提高白度和减少颜色偏差。

结论：
E. tenella引起的球虫病是影响肉鸡生产的重要肠道疾病之一，其主要原因是肠道损伤、营养吸收受阻、氧化应激和生长性能下降（Choi等人，2021；Mohammed等人，2025；Qaid等人，2021a；Qasem等人，2020）。实验性感染E. tenella会导致生长性能下降，表现为体重减轻和饲料转化率降低。这一结果与E. tenella的致病性质相符，因为它会损害盲肠上皮，干扰营养物质的消化和吸收，并引发肠道炎症（Choi等人，2021；Guo等人，2025；Tomal等人，2023）。由此引起的肠道炎症和组织损伤通常会导致感染肉鸡的生长速率下降和饲料利用效率降低。

在本研究中，接受膳食生物活性物质补充的肉鸡在生长阶段（15-28天）和整个生长周期（0-28天）的表现均优于感染对照组。这些发现与先前的研究一致，表明益生元和益生菌可以改善营养物质的利用并支持受肠道疾病影响的肉鸡的肠道健康（Alqhtani等人，2024；Blokker等人，2022；Obianwuna等人，2023）。例如，多项研究表明，在球虫感染期间补充益生菌或合生元的肉鸡生长速率和饲料转化率得到提升，表明有益微生物可以部分抵消Eimeria引起的肠道损伤的负面影响（Chhetri等人，2026；Javanmiri等人，2024；Ogwiji等人，2024）。因此，本研究中观察到的生长性能改善可能归因于多种机制，包括调节肠道微生物平衡、提高消化效率和改善肠道屏障功能（Assaf等人，2025；Chowdhury等人，2025；Sulaiman等人，2025）。此外，益生菌和合生元组在饲料转化率上的显著改善进一步支持了这样的观点：将有益微生物与可发酵底物结合使用有助于建立更稳定、功能更完善的胃肠道微生物生态系统，并提高营养物质的消化效率（Atuahene等人，2025；Yadav和Jha，2019；Yang等人，2025）。

抗球虫指标的结果证实了实验模型的有效性。感染对照组表现出高卵囊排泄量、严重的病变评分和较低的相对体重增加，这些都是典型的盲肠球虫病指标。相比之下，接受膳食生物活性物质补充的肉鸡卵囊排泄量显著减少，病变评分降低，抗球虫指数更高。病变严重程度的降低和卵囊排泄量的减少，以及抗球虫指数的提升，都支持了这些添加剂对球虫感染的保护作用。在Eimeria感染的肉鸡中也有类似的研究结果，其中益生菌或合生元补充剂减少了肠道病变评分和寄生虫排泄（Chalalai等人，2025；Chhetri等人，2026；Ogwiji等人，2024）。这些效果通常归因于肠道微生物群的调节、病原体的竞争性排斥、宿主免疫反应的激活以及抗菌代谢产物和短链脂肪酸的产生，这些因素有助于维持肠道完整性并限制病原体的增殖（Calik等人，2019；Javanmiri等人，2024）。总体而言，这些结果表明，益生元、益生菌和合生元通过调节肠道微生物群可以减轻寄生虫负担并增强肉鸡的疾病抵抗力。

肠道形态组织学参数提供了关于营养吸收能力和肠道健康的重要信息（Azizi等人，2026；Khan等人，2025；Rus等人，2025）。在本研究中，感染和膳食补充均显著影响了肠道形态。感染组的绒毛较短，绒毛与隐窝的比例发生变化，表明由于球虫感染导致的上皮损伤影响了吸收能力。相比之下，膳食生物活性物质补充显著改善了绒毛长度和绒毛与隐窝的比例，其中益生菌和合生元组的改善最为明显。绒毛结构的改善反映了上皮再生的提高和营养吸收的增强，这可能有助于补充组肉鸡更好的生长表现（Fritzlen，2025）。此外，肠道结构的改善也可能增强了黏膜屏障，减少了病原体的侵袭，从而减轻了球虫感染的严重程度（Calik等人，2019；McKnight等人，2019）。

氧化应激是球虫感染的重要病理后果（Razavi等人，2024；Zhao等人，2025）。在本研究中，感染肉鸡的脂质过氧化增加，表现为丙二醛水平升高，表明氧化应激加剧，这可能损害细胞功能，降低营养物质的利用并加重肠道损伤。相比之下，益生菌和合生元补充剂提高了总抗氧化能力，降低了脂质过氧化水平，表明抗氧化防御得到增强。这些发现与先前的研究一致，即益生菌和合生元可以增强肉鸡在面对病原体或环境压力时的抗氧化状态（Atuahene等人，2025；Mohsin等人，2022；Zhao等人，2025）。氧化应激的降低可能与微生物产生的抗氧化代谢产物和宿主抗氧化酶的激活有关（Li等人，2025；Zhou和Hatzios，2025）。氧化平衡的改善还有助于保护肠道组织，支持免疫反应，并帮助肉鸡从球虫感染中恢复（Wickramasuriya等人，2022）。

正如预期的那样，本研究的结果表明E. tenella感染对肉鸡的胴体性状产生了不利影响，表现为胴体重量和胴体采收率下降，而用药组或未处理组的这些指标有所改善。我们的发现与Moryani等人（2021）和Qaid等人（2022）的研究结果一致，他们报告称口服Eimeria感染卵囊会对生长性能和胴体产量产生负面影响。肠道肿胀可能反映了与球虫病相关的炎症和组织损伤，这会损害营养物质的利用和生长。这些发现与先前的研究结果一致，即盲肠球虫病会损害营养物质的利用并促进肠道炎症，最终降低胴体产量（Qaid等人，2021b；Qaid等人，2022；Youssef等人，202然而，生物制剂并不能始终使pH值恢复到受挑战对照组的水平，这支持了之前的观察结果，即pH值的响应取决于生理和实验条件（Pandey等人，2026年）。相比之下，肉色特征对饮食补充剂的反应更为明显。益生菌处理提高了肉色的亮度并减少了颜色差异（ΔE），表明颜色稳定性得到增强。这些效果可能与抗氧化状态的改善有关，因为抗氧化状态有助于保护肌肉色素并延缓变色，这与之前的研究结果一致。红色度（a*）和黄色度（b*）并未受到影响，这与早期研究结果一致，即这些参数相对稳定，对饮食干预的敏感性较低（Cha等人，2020年；Qaid等人，2022年；Suryadi等人，2019年）。总体而言，这些结果支持这样一个观点：膳食生物制剂，特别是益生菌和合生菌，对pH值的影响较小，但主要通过抗氧化机制来提高肉色的稳定性。

**结论**

总之，添加生物添加剂的饮食有助于缓解肉鸡受到艾美耳球虫（Eimeria tenella）侵害的不利影响。与受挑战的对照组相比，生物添加剂补充剂改善了生长性能、抗球虫效果、抗氧化状态、肠道形态以及一些 carcass 和肉品质特征。特别是，补充了生物添加剂的鸡只表现出卵囊排出量减少、病变程度降低、绒毛结构改善以及饲料利用率提高，同时氧化应激也有所降低，表明在球虫感染期间肠道完整性和生理抵抗力得到了增强。在所评估的处理方法中，益生菌和合生菌补充剂通常产生了最一致的有益效果，使多个参数恢复到未受挑战对照组的水平。这些发现表明，膳食生物制剂，尤其是益生菌和合生菌配方，可能是一种有效的营养策略，能够在球虫侵害条件下支持肉鸡的肠道健康和生产力，并可以作为传统抗球虫方案的可持续替代品或补充方法。

然而，该研究是在受控的实验条件下进行的，使用的是单一的艾美耳球虫挑战模型，这可能限制了其结果在商业生产系统中的推广。未来的研究应评估膳食生物制剂在商业养殖条件下的效果，并通过肠道微生物群、免疫反应和分子分析进一步探讨其作用机制。

**作者贡献**

- 构思：Hani H. Al-Baadani 和 Mohammed M. Qaid
- 数据管理：Hani H. Al-Baadani
- 正式分析：Mohammed M. Qaid
- 资金获取：Hani H. Al-Baadani 和 Abdulrahman S. Alharthi
- 调查研究：Hani H. Al-Baadani 和 Ibrahim A Alhidary
- 方法学设计：Hani H. Al-Baadani
- 项目管理：Ibrahim A Alhidary 和 Abdulrahman S. Alharthi
- 资源调配：Ibrahim A Alhidary
- 软件使用：Hani H. Al-Baadani
- 监督指导：Ibrahim A Alhidary 和 Abdulrahman S. Alharthi
- 验证：Hani H. Al-Baadani, Mohammed M. Qaid 和 Abdulrahman S. Alharthi
- 数据可视化：Hani H. Al-Baadani, Mohammed M. Qaid 和 Abdulrahman S. Alharthi
- 原稿撰写：Mohammed M. Qaid
- 所有作者都参与了稿件的撰写、审稿和编辑工作，并同意发表的版本。

**数据可用性**

支持本研究结果的数据可应要求从通讯作者处获取。

**资金支持**

该项目得到了沙特阿拉伯利雅得国王沙特大学（King Saud University）的正在进行的研究资助计划（ORF-2026-1500）的支持。

**作者贡献声明**

- Hani H. Al-Baadani：撰写、审稿与编辑、数据可视化、验证、软件使用、方法学设计、调查研究、资金获取、数据管理、概念构思
- Mohammed M. Qaid：撰写、审稿与编辑、原稿撰写、数据可视化、验证、正式分析、概念构思
- Abdulrahman S. Alharthi：撰写、审稿与编辑、数据可视化、验证、监督指导、项目管理、资金获取
- Ibrahim A Alhidary：撰写、审稿与编辑、监督指导、资源调配、项目管理、调查研究