SSTNIV，一种靶向多配体聚糖-1的肽嵌合体，逆转免疫抑制并抑制骨髓瘤进展

《Signal Transduction and Targeted Therapy》：SSTNIV, a syndecan-1-targeting peptide chimera, reverses immune suppression and inhibits myeloma progression

　　

尽管治疗取得了进展，多发性骨髓瘤（MM）仍然无法治愈，这主要是由于复发以及由克隆进化和支持肿瘤生存的骨髓（BM）微环境的改变所驱动的药物耐药性的出现。这凸显了对同时靶向肿瘤细胞和支持性BM生态位的新疗法的需求，特别是对于复发/难治性MM患者。多配体聚糖-1（Sdc1/CD138）是一种硫酸乙酰肝素蛋白聚糖，在骨髓瘤细胞表面和MM微环境中均高表达。它通过促进细胞存活、血管生成和免疫逃逸在MM发病机制中发挥关键作用。本研究调查了一种新型嵌合肽SSTNIV，它破坏Sdc1介导的机制以抑制MM进展。利用晚期MM的小鼠VQ模型，研究人员评估了SSTNIV对肿瘤生长、转移和肿瘤微环境的影响。结果表明，SSTNIV在体外有效抑制MM细胞侵袭、诱导凋亡并逆转免疫抑制。重要的是，在VQ小鼠中，SSTNIV显著延长生存期、减少肿瘤负荷并改善BM细胞数量。当与一线MM化疗药物硼替佐米（BTZ）联合使用时，SSTNIV带来了最大的生存获益，大幅减少了BM中的MM细胞，减轻了髓外疾病，并恢复了造血功能。此外，利用邻近连接试验（PLA）的人BM微阵列分析证实，SSTNIV靶向的人MM肿瘤中Sdc1与受体酪氨酸激酶和整合素形成复合物，但在正常BM中未发现。这些发现突出了SSTNIV强大的抗骨髓瘤活性，并支持其作为一种针对晚期和复发/难治性MM的有前景的治疗策略。

该研究针对多发性骨髓瘤（MM）治疗中因肿瘤微环境（TME）介导的耐药性和复发难题，聚焦于多配体聚糖-1（Sdc1/CD138）这一关键分子靶点展开探索。研究人员首先通过序列优化鉴定了SSTN_IGF1R和SSTN_VEGFR2的最小活性基序，随后构建了嵌合肽SSTN_IV，并在体内外实验中综合评估了其抗肿瘤及免疫调节功能。研究表明，SSTN_IV不仅能有效诱导骨髓瘤细胞凋亡、抑制迁移，还能重塑免疫抑制性微环境，其与硼替佐米（BTZ）的联合用药在VQ小鼠模型中显示出显著的协同增效作用，为复发/难治性MM提供了新的治疗策略。该研究成果发表于《Signal Transduction and Targeted Therapy》。

在关键技术方法方面，研究人员主要采用了以下手段：首先，利用截短突变和定点突变技术确定了SSTN_IGF1R（氨基酸93-120）和SSTN_VEGFR2（氨基酸220-236）的最小活性序列，并通过质谱法测定了嵌合肽SSTN_IV在小鼠血清中的半衰期。其次，建立了高恶性VQ转基因小鼠模型模拟人类晚期MM，通过植入Alzet渗透泵进行长期药物输注，并结合血清蛋白电泳（SPEP）监测肿瘤负荷（M峰）。第三，运用流式细胞术分析骨髓细胞中CD138⁺/B220^-骨髓瘤细胞比例及免疫细胞亚群变化，采用邻近连接试验（PLA）在组织原位检测Sdc1与整合素及受体酪氨酸激酶的相互作用。第四，通过Transwell迁移实验、Caspase 3/7活性检测及CellTiter-Glo细胞活力检测评估细胞的迁移与凋亡情况。最后，利用组织微阵列（TMA）结合免疫组化和PLA技术验证了相关分子复合物在人类MM活检组织中的临床相关性。

研究结果部分详细阐述了以下发现：

Identification of active motifs in SSTN_IGF1Rand SSTN_VEGFR2

研究人员通过对SSTN_IGF1R和SSTN_VEGFR2进行序列删减和突变分析，确定了维持其抑制功能的最小活性序列分别为氨基酸93-120和220-236。将两者融合构建的嵌合肽SSTN_IV在小鼠血清中表现出约46.5小时的半衰期，显著优于SSTN_VEGFR2。功能验证显示，SSTN_IV同时保留了诱导凋亡（类似SSTN_IGF1R）和抑制迁移（类似SSTN_VEGFR2）的双重活性。

SSTN_IVeffectively inhibits migration and survival in myeloma and immune cells

在原发性细胞水平，SSTN_IV能有效抑制VQ骨髓瘤细胞和肿瘤相关巨噬细胞（TAMs）的迁移，同时增强细胞毒性T细胞的运动能力。在生存方面，SSTN_IV和SSTN_IGF1R均能显著减少VQ细胞和TAMs的数量并诱导其凋亡，且对M2型巨噬细胞和TAMs具有选择性杀伤作用，而对正常的M1型巨噬细胞无明显影响。

SSTN_IVand SSTN_IGF1Rattenuate MM tumorigenesis and prolong the survival of VQ mice by reducing MM population

在VQ小鼠模型中，SSTN_IV单药治疗即可显著降低血清M峰水平，减少骨髓中CD138⁺骨髓瘤细胞的比例，其疗效与SSTN_IGF1R联合BTZ相当。生存分析显示，SSTN_IV单药组的中位生存期显著长于BTZ单药组，且与SSTN_IGF1R/BTZ联合组相当。SSTN_IV/BTZ联合治疗组则表现出最优的抗肿瘤效果，几乎完全消除了骨髓瘤细胞。

SSTN_IVenhances hematopoietic recovery and BM architecture in VQ mice

组织学分析表明，SSTN_IV治疗能显著恢复VQ小鼠受损的骨髓造血结构，减少异常浆细胞的浸润。外周血常规（CBC）分析进一步证实，SSTN_IV治疗组的小鼠血红蛋白、白细胞、红细胞和血小板计数均得到显著改善，接近正常对照水平。

SSTN_IVdisrupts the αv integrin-IGF1R and α4 integrin-VEGFR2 complexes in VQ mice BM

PLA结果显示，SSTN_IV治疗能有效破坏骨髓微环境中Sdc1介导的αv整合素-IGF1R复合物以及α4整合素-VEGFR2复合物的形成。这种破坏导致了ASK-1（一种促凋亡信号分子）的激活和caspase-3的切割，从而证实了SSTN_IV通过干扰关键的促生存信号通路发挥抗肿瘤作用。

SSTN_IVattenuates MM cell dissemination to extramedullary sites

针对髓外病变的研究发现，SSTN_IV能显著抑制骨髓瘤细胞向脾脏和肝脏的转移，减轻脾脏肿大和脏器损伤。机制上，这与其诱导肿瘤细胞凋亡及抑制VLA-4（由α4β1整合素组成）依赖性迁移有关。

SSTN_IVreverses myeloma immune surveillance

在免疫调节方面，SSTN_IV治疗能显著增加骨髓中CD8⁺T细胞的浸润，同时降低调节性T细胞（Tregs）和肿瘤相关巨噬细胞（TAMs）的比例。这种从免疫抑制表型向免疫激活表型的转变，是SSTN_IV重塑肿瘤微环境、增强抗肿瘤免疫应答的重要体现。

Sdc1-mediated receptor complexes exist in human MM tissues

通过对人类MM患者骨髓样本的单细胞RNA测序及组织微阵列分析，研究人员证实Sdc1、相关整合素及受体酪氨酸激酶在MM患者中高表达，且Sdc1与αv整合素-IGF1R以及α4整合素-VEGFR2的复合物特异性存在于MM组织中，而在正常骨髓组织中几乎检测不到，这为SSTN_IV的临床转化提供了坚实的理论依据。

讨论部分总结指出，该研究成功开发了一种新型嵌合肽SSTN_IV，它通过同时靶向Sdc1介导的IGF1R和VEGFR2两条关键信号通路，实现了对骨髓瘤细胞和肿瘤微环境的双重调控。研究结论强调，SSTN_IV不仅能有效克服VQ小鼠模型中对硼替佐米的耐药性，还能通过诱导TAMs凋亡、抑制Tregs积累以及促进细胞毒性T细胞浸润来逆转免疫抑制。鉴于Sdc1及其相关复合物在人类MM组织中的广泛存在，SSTN_IV作为一种具有双重功能的靶向治疗药物，在复发/难治性多发性骨髓瘤的临床治疗中具有巨大的应用潜力。