流式细胞术与下一代测序技术在急性髓系白血病微小残留病监测中的比较与联合应用

《Annals of Hematology》：Comparative and integrated application of flow cytometry and next-generation sequencing for minimal residual disease monitoring in acute myeloid leukemia

摘要

微小残留病（MRD）检测已成为急性髓系白血病（AML）中重要的预后生物标志物。虽然流式细胞术（FCM）和下一代测序（NGS）都是成熟的MRD检测方法，但它们在临床实践中的相对性能、一致性以及最佳整合策略仍尚未完全明确。为了评估FCM与NGS在AML患者达到形态学完全缓解后进行MRD监测时的一致性、诊断性能和预后价值，我们开展了一项回顾性队列研究，研究对象为2014年1月至2023年12月期间接受治疗的210名AML患者，这些患者在缓解期间同时接受了FCM和NGS的MRD评估。MRD阳性定义为FCM检测到≥0.1%的白血病相关免疫表型细胞或NGS检测到≥0.01%的变异等位基因频率。主要结局指标包括无复发生存期（RFS）和总生存期（OS）。次要结局指标包括一致性分析和亚组特异性表现。在210名患者中（中位年龄54岁，56.2%为女性），FCM检测出MRD的有119名（56.7%），而NGS检测出MRD的有128名（61.0%），总体一致性为93.81%（197/210；κ=0.872，95% CI：0.812–0.932）。以NGS作为参考标准，FCM的敏感性为91.41%（117/128），特异性为97.56%（80/82），阳性预测值为98.32%（117/119），阴性预测值为87.91%（80/91）。在13例不一致的病例中（6.2%），11例为FCM阴性/NGS阳性，主要携带NPM1突变（8/11，72.7%），中位变异等位基因频率为0.35%（范围0.12%-0.98%）。在中位随访时间为18个月的情况下，FCM阴性/NGS阳性的患者中有54.5%（6/11）复发，而FCM阳性/NGS阴性的患者中有50%（1/2）复发。综合评估将患者分为三个不同的风险组：双阴性（n=80，复发率为2.5%，死亡率为11.2%）、单阳性（n=13，复发率为53.8%，死亡率为23.1%）和双阳性（n=117，复发率为95.7%，死亡率为57.3%）（所有比较的P<0.001）。在复发预测方面，联合方法的曲线下面积为0.965（95% CI：0.935–0.989），敏感性为98.4%，阴性预测值为97.5%，优于单独使用任一方法。FCM和NGS在AML MRD检测方面表现出高一致性，并提供了互补信息，有助于风险分层。两种方法的综合应用改善了预后评估，双阴性状态可识别适合减少治疗强度的患者，任何MRD阳性情况都需要加强监测。这些发现支持在关键治疗决策点结合这两种技术的个性化MRD监测策略。