Tie2蛋白的抑制会破坏TMEM通道的功能，并减少胰腺导管腺癌的扩散

《Journal of Experimental & Clinical Cancer Research》：Tie2 inhibition disrupts TMEM doorway function and reduces dissemination in pancreatic ductal adenocarcinoma

　　

摘要

背景

胰腺导管腺癌（PDAC）是一种高度转移性的恶性肿瘤，治疗选择有限。转移是PDAC患者死亡的主要原因，但PDAC肿瘤细胞进入血液的细胞机制尚不清楚。血管内渗出的门户被称为肿瘤转移微环境（TMEM）的通道。TMEM通道由肿瘤细胞、Tie2阳性巨噬细胞和内皮细胞组成，它们直接接触后会引起短暂的、局部的血管开放，从而允许肿瘤细胞进入血液。

方法

我们在PDAC小鼠模型中进行了时间延迟活体显微镜观察，以可视化血清渗出和肿瘤细胞的内渗过程。通过切除的人类PDAC样本的免疫组化检测来量化TMEM通道的密度。利用肿瘤样本的对齐免疫组化/免疫荧光技术来量化TMEM通道的活性。通过体外血管内渗移（iTEM）实验来研究内渗的机制。在体内使用Tie2抑制剂rebastinib（每天约0.44毫克，连续3周）抑制Tie2信号通路。为了评估巨噬细胞Tie2介导的PDAC转移，我们生成了特异性敲除Tie2的巨噬细胞小鼠。在包含远端胰腺切除术以及围手术期FOLFIRINOX联合rebastinib治疗的原位PDAC模型中，评估了Tie2阻断的治疗效果。统计分析方法包括用于临床病理学比较的Mann–Whitney检验和Kruskal–Wallis检验，用于iTEM分析的单因素方差分析（ANOVA）及Tukey事后检验，用于两组比较的学生t检验，以及使用对数秩检验的Kaplan–Meier生存分析。

结果

体内成像显示，这些短暂的、局部的血管开放与TMEM通道在空间上存在关联。在TMEM通道处观察到了PDAC肿瘤细胞的内渗现象。在人类PDAC组织中可以检测到TMEM通道；较高的TMEM通道密度与更具侵袭性的病理因素相关，并且在新辅助治疗后有所降低。Tie2的抑制作用选择性地阻碍了巨噬细胞驱动的血管开放，减少了TMEM通道的活性，降低了肿瘤细胞的跨内皮迁移，并减少了体内的转移肿瘤细胞负荷。在治疗研究中，Tie2抑制联合FOLFIRINOX治疗比单独使用FOLFIRINOX显著提高了生存率。

结论

在PDAC中，血管内渗和转移过程是由TMEM通道介导的。TMEM通道的功能由Tie2信号通路调控。通过药物或基因手段抑制Tie2可以降低TMEM通道的功能和PDAC的转移能力。Tie2抑制可能与化疗或其他新兴疗法联合使用，具有潜在的治疗效果。

背景

胰腺导管腺癌（PDAC）是一种高度转移性的恶性肿瘤，治疗选择有限。转移是PDAC患者死亡的主要原因，但PDAC肿瘤细胞进入血液的细胞机制仍不清楚。血管内渗出的门户被称为肿瘤转移微环境（TMEM）的通道。TMEM通道由肿瘤细胞、Tie2阳性巨噬细胞和内皮细胞组成，它们直接接触后会引起短暂的、局部的血管开放，从而允许肿瘤细胞进入血液。

方法

我们在PDAC小鼠模型中进行了时间延迟活体显微镜观察，以可视化血清渗出和肿瘤细胞的内渗过程。通过切除的人类PDAC样本的免疫组化检测来量化TMEM通道的密度。利用肿瘤样本的对齐免疫组化/免疫荧光技术来量化TMEM通道的活性。通过体外血管内渗移（iTEM）实验来研究内渗的机制。在体内使用Tie2抑制剂rebastinib（每天约0.44毫克，连续3周）抑制Tie2信号通路。为了评估巨噬细胞Tie2介导的PDAC转移，我们生成了特异性敲除Tie2的巨噬细胞小鼠。在包含远端胰腺切除术以及围手术期FOLFIRINOX联合rebastinib治疗的原位PDAC模型中，评估了Tie2阻断的治疗效果。统计分析方法包括用于临床病理学比较的Mann–Whitney检验和Kruskal–Wallis检验，用于iTEM分析的单因素方差分析（ANOVA）及Tukey事后检验，用于两组比较的学生t检验，以及使用对数秩检验的Kaplan–Meier生存分析。

结果

体内成像显示，这些短暂的、局部的血管开放与TMEM通道在空间上存在关联。在TMEM通道处观察到了PDAC肿瘤细胞的内渗现象。在人类PDAC组织中可以检测到TMEM通道；较高的TMEM通道密度与更具侵袭性的病理因素相关，并且在新的辅助治疗后有所降低。Tie2的抑制作用选择性地阻碍了巨噬细胞驱动的血管开放，减少了TMEM通道的活性，降低了肿瘤细胞的跨内皮迁移，并减少了体内的转移肿瘤细胞负荷。在治疗研究中，Tie2抑制联合FOLFIRINOX治疗比单独使用FOLFIRINOX显著提高了生存率。

结论

在PDAC中，血管内渗和转移过程是由TMEM通道介导的。TMEM通道的功能由Tie2信号通路调控。通过药物或基因手段抑制Tie2可以降低TMEM通道的功能和PDAC的转移能力。Tie2抑制可能与化疗或其他新兴疗法联合使用，具有潜在的治疗效果。