口服给予的 Gentiana dahurica 阿拉伯半乳糖醛酸聚糖可通过进入肝脏和肾脏组织来缓解 CCl? 诱导的小鼠急性肝损伤

《Glycoscience & Therapy》：Orally administered Gentiana dahurica arabinogalacturonan alleviates CCl?-induced acute liver injury in mice by reaching liver and kidney tissue

　　穆罕默德·阿米尔·佐海布（Muhammad Aamir Zohaib）| 王佳辉（Jiahui Wang）| 吴文（Wen Ji）| 张淼淼（Miaomiao Zhang）| 周建勤（Jianqin Zhou）| 李杜欣（Duxin Li）
中国江苏省苏州市苏州大学药学院，邮编215123

**摘要**
龙胆草（Gentiana dahurica Fisch.，又称秦艽）是一种用于治疗“湿热”病症的传统中药，其中含有多糖成分，但其体内的代谢过程及作用机制尚不明确。本研究探讨了从龙胆草中分离出的一种结构明确的阿拉伯半乳糖醛酸（GDP）的肝保护作用及其在体内的分布行为。实验表明，口服GDP可显著减轻四氯化碳（CCl?）引起的急性肝损伤，表现为降低血清生化指标（如丙氨酸氨基转移酶和天冬氨酸氨基转移酶等）以及三种促炎细胞因子的水平；同时恢复肝脏抗氧化酶（如超氧化物歧化酶、还原型谷胱甘肽和过氧化氢酶等）的活性，并改善肝组织病理状况。此外，研究人员开发了一种荧光异硫氰酸标记方法（FGDP）来追踪GDP在体内的分布。体内成像显示FGDP主要积聚在肝脏和肾脏中，随后通过粪便排出体外。药代动力学分析显示GDP吸收迅速（峰值时间约1小时），并在体内停留时间较长（平均停留时间约24.7小时）。这些研究结果直接证明了具有生物活性的龙胆草多糖能够作用于关键器官，并与其肝保护机制相关联，同时为复杂植物多糖的药代动力学研究提供了可靠的荧光标记技术。

**1. 引言**
药物性肝损伤（DILI）约占所有急性肝衰竭病例的一半，已成为全球性的健康问题，其发病率呈上升趋势。DILI的进展可能导致严重的肝脏疾病，包括肝衰竭、肝纤维化、肝癌等。由于有效治疗方法有限，因此亟需发现新的治疗手段。
龙胆草根（Gentianae Macrophyllae Radix，简称秦艽）在传统中医中具有祛风、除湿、清热和激活气血的作用。现代药理学研究表明，龙胆草具有肝保护作用，例如缓解酒精性肝病、对抗四氯化碳引起的肝毒性、抑制肝纤维化以及激活肝星形细胞等，这些效果主要归因于其中的小分子成分。然而，占龙胆草成分大部分的多糖的作用机制仍不明确。
来自植物的多糖具有显著的抗氧化和免疫调节能力，同时安全性良好、副作用低，使其成为潜在的肝保护候选物质。这些大分子可通过减轻氧化应激和促进线粒体自噬来发挥肝保护作用。因此，了解多糖在肝脏组织中的分布对于阐明其作用机制至关重要。但由于多糖缺乏紫外线吸收特性且在质谱分析中离子化效率低，其在体内的检测存在较大困难。
为克服这些挑战并研究多糖的体内药代动力学和组织分布，荧光标记技术成为可行的方法。已有研究利用荧光标记技术研究了壳聚糖、淀粉、右旋糖酐和普鲁兰等多糖的药代动力学。

**2. 材料与方法**
2.1 **材料与试剂**
所有化学品和试剂均从商业供应商处购买。具体来说，醋酸铵（CH?COONH?）、磷酸二氢钠（Na?HPO?）和磷酸氢二钠（NaH?PO?）由Aladdin Biochemical Co.（中国上海）提供；酪胺、氰硼氢化钠（NaBH?CN）、荧光异硫氰酸（FITC）和生理盐水由Yuanye Biologicals Ltd.（中国上海）提供；二氧化氘（D?O）由Energy Chemical Ltd.（中国安徽）提供；超氧化物歧化酶（SOD）、还原型谷胱甘肽（GSH）、过氧化氢酶（CAT）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、总胆红素（TBil）和丙二醛（MDA）检测试剂盒由北京Solarbio Science & Technology Co., Ltd.（中国北京）提供；小鼠白细胞介素（IL）-6、IL-1β和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）由北京Xingjianya Biotechnology Co., Ltd.（深圳）提供。所用试剂均为分析级或更高级别。龙胆草多糖（GDP）由本实验室制备。
2.2 **动物**
实验动物经苏州大学实验动物中心批准（批准编号SUDA20251019A02）。实验使用8周龄的雄性BALB/c小鼠（体重20 ± 2克）和SD大鼠（体重25 ± 2克），饲养在标准聚丙烯笼中，环境条件受控，温度维持在22 ± 2°C，相对湿度为50 ± 20%。动物接受12小时光照-黑暗周期，实验前7天自由进食饮水，随后禁食一夜。
2.3 **GDP的体内肝保护作用**
将30只小鼠随机分为五组（每组6只）：1）正常对照组（NC组），2）CCl?处理模型对照组（MC组），3）25 mg/kg比芬达特阳性组（PC组），4）50 mg/kg GDP组（GDP-L组），5）100 mg/kg GDP组（GDP-H组）。NC组和MC组给予生理盐水，PC组、GDP-L组和GDP-H组连续8天接受GDP处理。最后一天，除NC组外，所有小鼠均通过胃管给予10 mL/kg的50%四氯化碳橄榄油溶液。24小时后采集血液、肠道组织（盲肠区域）和肝脏组织。血清通过4°C下4,500 rpm离心15分钟分离。肝脏组织部分固定于4%甲醛中用于组织学分析，剩余组织和血清样本储存在-80°C以待进一步分析。肝脏指数计算公式为：[肝脏重量（克）/体重（克）× 100]。
2.4 **血清和肝脏生化指标检测**
血清中的丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、总胆红素（T.bil）、肿瘤坏死因子（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）和白细胞介素-6（IL-6）浓度使用市售检测试剂盒测定。肝脏匀浆液中的酶促和非酶促抗氧化指标（SOD、CAT、GSH）及脂质过氧化产物丙二醛（MDA）按照制造商说明进行检测。
2.5 **组织病理学检查与Suzuki评分**
肝脏组织切片采用常规的苏木精-伊红（H&E）染色方法。使用奥林巴斯IX73倒置显微镜系统（日本）进行详细观察和成像。组织病理学评估依据Suzuki评分系统，该系统通过三个关键参数（窦状血管充血、肝细胞坏死和气球样变性）量化肝脏损伤程度，每个参数评分范围为0至4分。
2.6 **荧光标记GDP（FGDP）的制备**
FGDP的荧光标记方法参考先前研究并稍作修改：将GDP（200 mg）、酪胺（200 mg）和氰硼氢化钠（NaBH?CN，75 mg）溶解于75 mL磷酸盐缓冲液（0.2 M，pH 6.8）中，37°C下孵育96小时。透析和冻干后获得GDP衍生物（Y-GDP）。Y-GDP（200 mg水溶液）与FITC（20 mg DMSO溶液）在37°C下避光孵育24小时，随后冻干保存。
使用多种光谱技术对FGDP进行表征：紫外-可见光（UV-Vis）吸收光谱使用岛津UV-2600分光光度计（日本）测量；傅里叶变换红外（FT-IR）分析在VERTEX 70光谱仪（德国）上进行；核磁共振（1H NMR）光谱在AVANCE NEO 400 MHz光谱仪（Bruker，瑞士）上获取；荧光发射光谱使用Infinite M1000多功能微孔板读数仪（瑞士）测定。
2.7 **FGDP在模拟体液中的稳定性**
模拟胃液由胃蛋白酶（10 g/L）和稀释的盐酸（16.4 mL/L）在pH 1.3条件下制备；模拟肠液由KH?PO? 13.6 g和胰蛋白酶25 g配制，溶解于1 L水中并用NaOH（0.1 M）调节至pH 6.8。FGDP以25 mg/mL浓度悬浮在模拟液中（多糖与液体的比例为1:40），37°C下孵育。随后取500 μL孵育液在0、2、4、6和12小时进行高效凝胶渗透色谱（HPGPC）分析。反应终止后加入NaOH（0.2 M）和TCA（20%，w/w）。HPGPC分析使用Agilent 1260 Infinity HPLC系统（美国）进行，色谱柱为BioCore SEC 150 ?（内径300 × 4.6 mm，粒径1.8 μm，NanoChrom Technologies，中国苏州）。流动相为50 mM醋酸铵（pH 7.2）和甲醇（80:20，v/v），流速为0.15 mL/min。
2.8 **FGDP的定量分析**
FGDP储备液（浓度1 mg/mL）通过溶解于100 mL磷酸盐缓冲液（PBS，pH 6.8）制备。FGDP校准液由血浆和肝脏匀浆液制备，浓度分别为0.5、5、10、40和80 μg/mL。空白样本使用相同方法制备PBS（pH 6.8）溶液。荧光强度使用多功能微孔板读数仪在495 nm和520 nm激发波长下测定。校准曲线通过线性回归建立，将荧光强度与已知FGDP浓度关联。
方法验证包括：回收率通过比较实际浓度与理论添加值确定；精度通过连续五天重复检测样品评估；稳定性在三种条件下进行评估：室温下24小时、4°C下14天和-20°C下15天。所有测量重复三次。
2.9 **FGDP口服后的药代动力学与分布**
口服给药时，BALB/c小鼠（每个时间点6只）接受单次FGDP剂量（100 mg/kg，体重10 mL）。在预定时间点（给药后10分钟、30分钟、1小时、3小时、8小时、24小时、36小时、48小时和72小时）通过眶窦采血。每个血浆样本在4°C下4,000 rpm离心10分钟后用PBS稀释至最终体积2.5 mL。空白血浆使用相同条件作为对照。
2.10 **FGDP口服后的分布**
21只大鼠分为七组（每组3只），每组分别接受FGDP（100 mg/kg）或FITC（剂量根据标记效率确定）。在不同时间点（10分钟、30分钟、1小时、3小时、8小时、12小时和24小时）采集组织样本并匀浆于生理盐水中，然后4°C下4,000 rpm离心。
2.11 **FGDP静脉注射后的分布**
十一组BALB/c小鼠（每组6只）接受FGDP静脉注射（剂量50 mg/kg）。在给药后30分钟、1小时、3小时、8小时和24小时采集心脏、肝脏、脾脏和肾脏样本进行IVIS成像。肝脏、肺和肾脏样本经石蜡切片处理后用于共聚焦激光扫描显微镜（CLSM）观察。
2.12 **数据分析**
大鼠单次口服给药后的血浆药物浓度数据使用非房室药代动力学模型分析。参数估计使用Phoenix WinNonlin软件（版本8.3，Certara，美国）进行。为了进行统计比较，使用GraphPad Prism（版本9.0）进行了单因素方差分析（ANOVA），随后进行了Tukey的事后检验。与模型组相比的显著性表示如下：*p < 0.05，**p < 0.01，***p < 0.001，****p < 0.0001。

3.1 通过形态学和组织病理学检查评估体内肝脏保护作用
多糖是G. dahurica根部的主要成分之一。通过酒精去除小分子、水提取、酒精沉淀、脱色和去除蛋白质的方法从G. dahurica中提取出的多糖占其根部干重的1.36%。在我们之前的分离工作中，分离并报告了四种多糖，其中阿拉伯半乳糖醛酸聚糖（GDP）占总多糖的近50%。GDP的结构已被完全表征，其分子量为82 kDa，主要含有单糖成分，如阿拉伯糖（33.90%）和半乳糖醛酸（48.48%），这些单糖通过→3,5)-Ara-(1→3,5)-Ara-(1→3,4)-GalA-(6-OMe)-(1→连接键连接在一起。在体内肝脏保护作用的研究中，将GDP口服给予小鼠7天。如图1A所示，第8天通过口服CCl4诱导了肝脏损伤。图1B显示了CCl4给药后24小时的小鼠照片。在图像中，对照组小鼠体型均匀，毛发有光泽。CCl4模型组的小鼠毛发粗糙，活动能力下降，表现出嗜睡状态。处理组（使用bifendate作为阳性对照）的毛发状况较好，其中GDP-H组的效果比PC组和GDP-L组更明显。在切除前，各处理组之间的体重没有显著差异（图1C）。

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图1. GDP对体重和肝脏指数的影响。(A) 实验方案；(B) CCl?给药后24小时的小鼠代表图像；(C) 体重变化，注意：初始变化反映了随机性，终点时没有显著差异（p > 0.05）；(D) 肝脏指数。数据：平均值 ± 标准差（n = 6）。*p < 0.01 对比 MC 组。
模型组小鼠的肝脏指数显著高于对照组小鼠。GDP-L组和GDP-H组的肝脏指数显著低于模型组（图1D）。图2A表明，NC组的肝脏整体形态健康，呈暗红色，表面光滑有弹性。给予CCl4（MC）后，肝脏肿胀且脆弱，颜色变暗并出现斑点。GDP处理组（GDP-L和GDP-H）使肝脏看起来更正常。

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图2. GDP对肝脏形态和组织病理学的影响。(A) 肝脏大体图像；(B) H&E染色：NC，MC（CCl?模型），PC（bifendate），GDP-L（50 mg/kg），GDP-H（100 mg/kg）。放大倍数：×200（刻度尺 = 100μm）。颜色键：CV（中央静脉，蓝色），SS（窦状空间，紫色），PT（门脉三联体，黑色），N（坏死，灰色），BD（气球样变性，黄色），EN（核延长，橙色）；(C) 肝脏硬度评分；(D) Suzuki评分。注意：*p < 0.01 对比 MC 组。
组织病理学分析的染色切片显示在图2B中。CCl4诱导的毒性导致严重的肝细胞坏死、核浓缩以及大量的炎症细胞浸润。相比之下，NC组、PC组、GDP-L组和GDP-H组的小鼠肝脏没有明显的异常。GDP预处理减轻了CCl4引起的肝脏损伤，显著减少了坏死区域和炎症细胞浸润的程度。MC组的肝脏硬度（图2C）和Suzuki评分（图2D）均高于NC组。两种剂量的GDP都显著降低了这些评分，这与组织病理学和形态学变化一致，表现为坏死、充血和空泡化的减少。

这些结果表明，在CCl4给药后可以成功复制模型组，导致小鼠出现急性肝脏肿大，而GDP可以缓解这种不良现象。

3.2 通过生化指标评估体内肝脏保护作用
肝脏损伤的特点是脂质过氧化增加和抗氧化能力同时下降。CCl4的代谢激活会产生活性氧和自由基。这种氧化负担耗尽了肝脏抗氧化酶的活性，最终导致脂质过氧化和随后的肝细胞损伤。主要的內源性抗氧化剂包括酶类，如SOD和过氧化氢酶（CAT），以及非酶类抗氧化剂，如谷胱甘肽（GSH）。作为脂质过氧化的最终产物，丙二醛（MDA）是评估氧化损伤的可靠生物标志物。
我们的数据（图3）显示，MC组小鼠的肝脏抗氧化标志物（SOD、CAT和GSH）显著下降，而MDA水平显著升高（p < 0.01）。GDP预处理有效逆转了这些趋势，提高了抗氧化酶的活性并降低了MDA含量。这些发现表明，GDP的肝脏保护机制部分是通过增强內源性抗氧化系统来实现的。

此外，肝脏损伤后的功能损害通常通过测量血清中的天冬氨酸氨基转移酶（AST）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）和总胆红素（TBil）浓度来分析。这些生化标志物的水平升高反映了肝细胞变性和组织损伤。在本研究中，MC组的血清ALT、AST和TBil水平显著高于NC组（P < 0.01；图4A–4C），证实CCl?给药引起了严重的肝脏损伤。GDP处理（50和100 mg/kg）显著降低了血清ALT和AST水平（p < 0.01）。这种降低的程度与阳性对照药物bifendate的效果相当。

已知CCl?及其代谢产物会诱导促炎细胞因子的释放，如TNF-α、IL-6和IL-1β。这些细胞因子的激活会刺激下游的炎症信号级联反应，从而加剧肝细胞损伤。这些发现表明GDP具有缓解氧化应激和炎症的潜力，这是肝脏损伤的关键因素。多项研究报道了从天然来源分离出的多糖具有肝脏保护作用。然而，很少有论文使用纯化的多糖进行体内研究。由于已经确定了结构明确的GDP的肝脏保护效果，因此需要研究其作用机制，特别是保护作用是否通过与肝组织的直接相互作用来实现。这项研究需要确定多糖在体内的命运，包括其吸收、分布和组织定位。

3.3 GDP的荧光标记和FGDP的表征
由于缺乏发色团，体内追踪未标记的多糖是一个主要的分析挑战。为了克服这一限制并便于在生物系统内进行可视化和定量分析，选择了荧光标记方法，因为它具有灵敏度高、非侵入性、实时成像能力和与生物系统的兼容性。使用氰硼氢化钠作为催化剂，将GDP的醛基团与酪胺反应，生成Y-GDP，随后用于GDP的荧光标记。Y-GDP中的酪胺仲氨基与FITC中的氰基之间的亲核反应生成FGDP。图5A展示了衍生过程中的步骤。

FGDP通过紫外（UV）光谱、傅里叶变换红外（FT-IR）光谱、质子核磁共振（1H-NMR）和荧光光谱进行了全面分析，以验证荧光标记的完整性。在UV光谱图（图5B）中，Y-GDP样品在275 nm处观察到与酪胺相对应的吸收峰。FGDP在462 nm处显示出FITC的特征吸收峰，此外还保留了Y-GDP的特征吸收峰。FGDP的FT-IR光谱显示了与GDP相似的多糖特征信号（图5C）。-OH伸缩振动、C-H伸缩振动以及C = O和C-H弯曲伸缩分别在2,928 cm-1、1,741 cm-1和1,598 cm-1处观察到。酰胺I带（C-N的弯曲振动）的特征峰位于1,675 cm-1，芳香环的特征峰位于1,541 cm-1、1,508 cm-1和1,487 cm-1。FGDP的荧光光谱与FITC一致，激发波长为495 nm，发射波长为520 nm（图5D）。1H NMR光谱结果显示在图5E中。总体而言，从δ3.0 ppm到δ5.5 ppm的化学位移是多糖的特征信号。此外，在δ4.5-5.5 ppm的异头氢区域观察到多糖的多个异头氢（H-1）。FITC信号通常在δ6.5-7.5 ppm范围内。

因此，光谱表征证实了GDP的FITC标记成功。标记效率为1.74%（w/w），计算方法为：（结合的FITC质量 / GDP质量）× 100%，通过使用FITC校准曲线在495 nm处的UV光谱光度法确定。这一效率与多糖FITC标记的常规范围（1.2%至3.5%）一致。选择低至中等的标记效率（< 5%）是为了在保持足够荧光信号的同时，尽量减少对多糖骨架的结构破坏。此外，尺寸排阻色谱（SEC）用于表征FGDP在模拟肠液和胃液中的分子量差异。FGDP在两种液体中的保留时间约为13分钟（图S1）。不同消化时间对FGDP的峰形和保留时间没有明显影响。FGDP的体外降解表明其在胃肠道中的潜在稳定性。FGDP对胃肠道降解的抵抗力归因于其阿拉伯半乳糖醛酸结构：(1) (1→3,4)-连接的半乳糖醛酸骨架比(1→4)-连接的葡聚糖更不易被哺乳动物糖苷酶降解；(2) 高含量的羧基（48.48% GalA）与胃蛋白酶/胰蛋白酶活性位点产生静电排斥；(3) 82 kDa的分子量超过了肠道黏液的孔径（约50 kDa），限制了酶的接触。

3.4 建立FGDP的定量分析方法和方法验证
通过将测得的荧光强度与组织样本中的FGDP浓度进行回归，生成了校准曲线（图S2）。用于计算实际组织FGDP浓度的回归曲线方程和R2值列在表1中。FGDP的回收率（表2）在5、25和50 μg/mL的 spiked浓度下分别为93.84–117.47%，相对标准偏差（RSD）范围为0.99–7.74%。FGDP的日内和日间精度分析得出的相对标准偏差（RSD）范围为1.33–8.44%。为了评估稳定性，样品在三种不同条件下储存：24小时在室温下，14天在4°C下，15天在-20°C下。在这三种条件下的样品回收率范围为91.3–108.9%，重复测量的RSD范围为1.33–5.60%。

表1. 血浆和组织匀浆中FGDP定量的校准曲线参数。
组织 | 线性方程 | R2 | 线性范围（μg/mL）
--- | --- | --- | ---
Hearty = 74.019x + 87.47 | 0.997 | 0.5–80
Livery = 119.7x + 46.24 | 0.999 | 0.5–80
Spleeny = 92.688x + 55.74 | 0.999 | 0.5–80
Lungy = 88.916x + 124.38 | 0.999 | 0.5–80
Kidneyy = 94.637x + 149.53 | 0.998 | 0.5–80
Stomachy = 106.41x + 25.06 | 0.999 | 0.5–80
Large intestiney = 112.99x + 92.01 | 0.999 | 0.5–80
Small intestiney = 108.88x - 6.86 | 30.999 | 0.5–80
Cecumy = 115.22x + 62.67 | 0.999 | 0.5–80
Plasmay = 200.51x + 68.25 | 30.997 | 0.5–80

表2.**FGDP在血浆和各种组织中的回收率和精确数据**
| 组织 | 浓度（μg/mL） | 实测浓度 | 回收率（%） | RSD（%） | 日间变化 | 内部变化（μg/mL） | RSD（%） | RSD（%） |
|------|-----------|---------|---------|-----------|-------------|-----------|-----------|
| 心脏 | 55.46 ± 0.13 | 99.12 | 3.20 | 2.36 | 4.22 | 25.12 ± 0.96 | 10.12 | 3.81 | 3.28 |
| 肝脏 | 55.19 ± 0.22 | 100.04 | 1.07 | 4.31 | 3.34 | 26.18 ± 1.55 | 98.10 | 0.99 | 5.91 |
| 脾脏 | 55.54 ± 0.11 | 104.80 | 2.02 | 1.99 | 4.29 | 27.38 ± 1.25 | 97.29 | 3.42 | 4.57 |
| 肺 | 55.02 ± 0.39 | 95.66 | 4.55 | 7.76 | 25.50 ± 0.55 | 93.91 | 2.00 | 2.17 |
| 肾脏 | 55.10 ± 0.11 | 97.34 | 6.74 | 2.19 | 25.49 ± 0.58 | 110.08 | 3.35 | 2.27 |
| 胃 | 55.38 ± 0.10 | 94.19 | 2.36 | 1.83 | 25.26 ± 0.39 | 105.85 | 2.13 | 1.54 |
| 大肠 | 54.98 ± 0.42 | 117.47 | 1.95 | 8.36 | 25.23 ± 1.33 | 102.66 | 2.19 | 5.60 |
| 小肠 | 55.26 ± 0.46 | 105.00 | 7.74 | 8.84 | 25.87 ± 0.62 | 104.10 | 2.20 | 2.39 |
| 盲肠 | 55.25 ± 0.44 | 114.54 | 7.18 | 8.39 | 25.26 ± 1.17 | 110.49 | 9.25 | 4.66 |
| 血浆 | 55.26 ± 0.31 | 98.86 | 1.35 | 5.96 | 25.73 ± 0.77 | 108.64 | 4.45 | 2.99 | 3.07 |

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**3.5. 口服FGDP的药代动力学**
小鼠被给予单剂量100 mg/kg的FGDP以研究其药代动力学。FGDP的血浆浓度随时间的变化情况如图6所示。通过非房室模型分析，得出了关键的药代动力学参数，并总结在表3中。最大血浆浓度（Cmax）为62.19 μg/mL，出现在1小时（Tmax）。FGDP的消除半衰期（T1/2）为16.37小时，系统清除率（CL）为0.07 L/h/kg。0至24小时内的血浆浓度曲线下面积（AUC0–24 h）为1,516.15 μg·h/mL，根据非房室模型分析，平均驻留时间（MRT）为24.71小时。

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**6. 口服FGDP后小鼠血浆中的浓度变化**
图6显示了小鼠口服100 mg/kg FGDP后的血浆浓度随时间的变化。Y轴表示血浆浓度（μg/mL），X轴表示时间（h）。数据代表平均值±标准差（n = 6）。

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**表3. FGDP的体内药代动力学参数**
| 参数 | 值 | |
|-----------------|-----------|------------|
| tmax（h） | 1.00 | |
| Cmax（μg/mL） | 62.19 | |
| AUC0–24 h（μg·h/mL） | 1,516.15 | |
| CL（L/h/kg） | 0.07 | |
| Vd（L/kg） | 4.67 | |
| MRT（h） | 24.71 | |
| T1/2（h） | 16.37 | |

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**FGDP的组织分布**
通过体内成像技术分析了口服FGDP的组织分布（图7）。图像的颜色反映了FGDP的浓度。口服后1小时和3小时，FGDP主要分布在胃肠道中。少量FGDP分布在肾脏和肝脏中，3小时时相比1小时有显著增加。

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**7. 静脉注射FGDP后的分布**
静脉注射50 mg/kg FGDP后24小时内的IVIS成像结果显示，FGDP在肝脏、肾脏中有明显的荧光信号。此外，FITC作为参考物质在肾脏和肝脏中也显示出分布。

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**8. FGDP的排泄和运输过程**
研究表明，口服FGDP主要通过胃肠道、大肠和盲肠排泄。肝脏中的FGDP浓度最高，其次是肾脏。口服后30分钟内，FGDP迅速进入血液循环，并在肝脏和肾脏中积累。

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**结论**
本研究证明，口服来自Gentiana dahurica的阿拉伯半乳糖醛酸（FGDP）对CCl?引起的急性肝损伤具有显著的肝保护作用。FGDP降低了血清ALT/AST、TNF-α、IL-1β和IL-6的水平，增强了肝脏抗氧化酶（SOD、CAT和GSH）的活性，改善了组织病理学结果。FGDP在肝脏中的积累与其肝保护作用具有时间上的相关性，支持了其直接的分子作用机制。此外，FGDP在肾脏中的积累与其抗氧化和抗炎效果相关。