靶向表观遗传突变急性髓系白血病的Inobrodib（CCS1477）联合吉瑞替尼与维奈克拉抑制白血病干细胞

《SCIENCE ADVANCES》：P300/CBP inhibition with inobrodib in combination with gilteritinib and venetoclax targets leukemia stem cells in epigenetic mutant AML

急性髓系白血病（AML）是一种致死性血液肿瘤，现有细胞毒性化疗的5年总生存率最高仅为25%。靶向BCL2抑制剂维奈克拉（venetoclax）与FLT3抑制剂吉瑞替尼（gilteritinib）已用于部分成人AML患者的一线治疗，可延长部分患者的生存期，但仍缺乏兼具高效与低毒的治愈性联合方案。研究人员发现，在DNMT3A/FLT3突变的侵袭性AML临床前模型中，双靶点组蛋白乙酰转移酶p300/CBP溴结构域抑制剂CCS1477（inobrodib）联合吉瑞替尼与维奈克拉，可通过下调促癌生存与增殖因子，几乎完全清除白血病干细胞，有效阻断白血病发生。该研究明确了这一靶向三联疗法在AML治疗中的潜在临床应用价值。

本研究发表于《SCIENCE ADVANCES》，针对AML表观遗传调控异常与现有靶向治疗难以清除白血病干细胞（LSC）、易复发耐药的核心问题，聚焦p300/CBP在表观遗传突变AML中的作用，探索新型联合治疗策略。研究人员构建了携带Dnmt3a/Flt3^ITD（D/F）与Tet2/Flt3^ITD（T/F）的AML小鼠模型，结合体外细胞实验、患者样本验证及多组学分析，评估p300/CBP抑制剂CCS1477单药及联合吉瑞替尼、维奈克拉的疗效与机制。

关键技术方法包括：使用D/F与T/F两种AML小鼠模型及继发性移植模型评估体内疗效；采用染色质免疫共沉淀测序（ChIP-seq）与RNA测序（RNA-seq）解析表观遗传与转录调控变化；通过流式细胞术分选与定量白血病干细胞及成熟造血群体；利用原代FLT3^ITD阳性AML患者样本验证联合治疗的体外杀伤效应。

研究结果如下：

Tet2/Flt3突变小鼠较Dnmt3a/Flt3突变小鼠白血病进展更快。在无外源诱导剂条件下，T/F小鼠总生存期显著短于D/F小鼠（中位生存期24天对比43天），继发性移植后仍维持高侵袭性，骨髓与脾脏原始细胞占比超过20%，符合AML病理特征。

p300/CBP抑制可延长Dnmt3a/Flt3与Tet2/Flt3突变AML小鼠生存期。CCS1477单药治疗显著降低外周血白血病原始细胞比例，降低脾脏重量与骨髓白血病负荷，延长小鼠生存期，但未减少骨髓中LSK（谱系阴性c-Kit阳性Sca1阳性）细胞数量，无法清除LSC，停药后疾病仍进展。

CCS1477在Dnmt3a与Tet2突变白血病中调控相似的转录程序。CCS1477可快速降低全局组蛋白H3第27位赖氨酸乙酰化（H3K27ac）水平，显著减少增强子区域H3K27ac富集，虽不同基因型间H3K27ac变化位点重叠度低，但共享一致的基因表达特征：一致抑制MYC靶基因、FLT3信号通路及免疫细胞功能相关通路，特异性降低MYC表达，抑制白血病细胞增殖，但未显著诱导凋亡。

p300/CBP、BCL2与FLT3三联抑制靶向AML干/祖细胞。CCS1477联合吉瑞替尼与维奈克拉在体外诱导最强的凋亡效应与集落形成抑制，在原代FLT3^ITDAML患者中诱导超过50%的细胞凋亡。体内治疗中，三联疗法耐受性良好，几乎完全清除骨髓LSC，白血病祖细胞数量较单药降低10倍以上，同时促进AML细胞髓系分化，协同抑制促癌生存与增殖通路。

讨论与结论部分指出，p300/CBP是AML的潜在治疗靶点，CCS1477单药可通过抑制增殖延缓疾病进展，但无法根除LSC。现有标准方案如维奈克拉联合阿扎胞苷仍存在获得性耐药与LSC残留问题。本研究提出的三联疗法CCS1477+维奈克拉+吉瑞替尼，通过同时靶向增殖（MYC、FLT3）、生存（BCL2、MCL-1）等多条核心致癌通路，实现对LSC的高效清除。该组合在表观遗传突变AML中具有独特优势，其抗白血病机制至少部分源于对多通路转录水平的协同抑制。研究结果为该三联疗法的临床转化提供了充分临床前证据，有望为FLT3突变伴表观遗传异常的AML患者提供更有效的治疗选择。