《Critical Reviews in Oncology/Hematology》：Single-Cell RNA Sequencing Unveils CD8+ T Cell Heterogeneity in the Diffuse Large B-cell Lymphoma Microenvironment: A Systematic Review
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作者：Alimire MAIMAITI、QI Xiaolong、Zhenghao ZHANG、LI Yan
单位：新疆医科大学，中国新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市830001
摘要
背景
弥漫大B细胞淋巴瘤（DLBCL）对免疫疗法的异质性反应主要归因于肿瘤微环境中CD8? T细胞
作者：Alimire MAIMAITI、QI Xiaolong、Zhenghao ZHANG、LI Yan
单位：新疆医科大学，中国新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市830001
摘要
背景
弥漫大B细胞淋巴瘤（DLBCL）对免疫疗法的异质性反应主要归因于肿瘤微环境中CD8? T细胞的多种功能状态。尽管单细胞RNA测序（scRNA-seq）极大地提高了细胞分辨率，但目前仍缺乏系统性的证据整合，以明确CD8? T细胞的异质性及其在DLBCL中的临床意义。
方法
根据PRISMA指南和PROSPERO注册的协议（CRD420261282336），我们对截至2025年9月发表的18项符合要求的scRNA-seq研究进行了定性系统评价（未进行元分析）。两位独立审稿人使用自设计的scRNA-seq检查表和AMSTAR-2工具共同完成了研究选择、数据提取和质量评估。
结果
我们构建了DLBCL中CD8? T细胞的动态耗竭轨迹图谱，揭示了包含多个功能不同亚群的层次结构。主要发现包括：① 前体耗竭型T细胞（Tpex）亚群与良好的预后相关，并具有治疗潜在性；而终末耗竭型（Tex-term）亚群与不良预后相关；② CXCR5?TCF7? S1亚群预示对RB-CHOP化疗的敏感性，而CD58通路的损伤与CAR-T耐药性有关；③ 最近发现的CD8?fit细胞有望成为协同免疫治疗的靶点。
结论
本综述提供了DLBCL中CD8? T细胞的全面单细胞图谱，倡导转向基于细胞状态的精准免疫治疗的趋势。所识别的生物标志物有助于治疗前患者的分层，并揭示了新的组合治疗靶点。未来的多中心研究应重点验证这些靶点（如CD58、CD8?fit），并标准化scRNA-seq分析框架，以便将这些发现转化为临床实践。
引言
弥漫大B细胞淋巴瘤（DLBCL）是成人非霍奇金淋巴瘤最常见的亚型，是一种具有显著生物学和临床异质性的侵袭性恶性肿瘤，这导致患者的预后差异巨大（A.M.A. American Journal of Diseases of Children, Liang等人，2022；Chapuy等人，2018）。尽管R-CHOP方案（利妥昔单抗、环磷酰胺、多柔比星和泼尼松）仍是一线治疗标准，但约40%的患者仍会发展为难治性或复发性疾病，凸显了这一紧迫的临床需求（Matthews等人，2016）。
近年来，基于CD8? T细胞杀伤功能的过继细胞疗法（如TCR-T和CAR-T细胞疗法）以及阻断PD-1抑制信号的免疫检查点抑制剂在临床癌症治疗中取得了前所未有的疗效（Autio等人，2021；Chen等人，2019；Chen等人，2021）。对于至少接受过两种一线治疗的复发性或难治性DLBCL患者，嵌合抗原受体T细胞（CAR-T）疗法已成为标准治疗选择（Dwivedi等人，2019；Ernst等人，2021；Yamauchi和Maruyama，2024）。然而，这些免疫疗法的治疗效果仍然有限，主要原因是免疫耐药性（Tumuluru等人，2025）。其中的关键机制在于肿瘤免疫微环境（TIME）的复杂调节作用，尤其是CD8? T细胞的功能障碍，它们是TIME中的核心抗肿瘤力量（Li等人，2018）。CD8? T细胞是抗原特异性免疫反应的主要参与者，其功能状态受分子机制精确调控，在肿瘤免疫中起着关键作用（Chen等人，2018）。因此，克服免疫疗法耐药性需要准确解析CD8? T细胞的异质性、其功能失调的机制以及功能恢复的策略。
传统的批量RNA测序方法会将基因表达汇总到混合细胞群体中，其固有的平均效应掩盖了单细胞水平的基因表达差异（Park等人，2021），从而大大限制了我们对CD8? T细胞异质性及其与肿瘤免疫微环境相互作用机制的理解。相比之下，单细胞RNA测序（scRNA-seq）能够解析异质性的CD8? T细胞亚群，定义其独特的分子特征，并重建状态转换轨迹及其背后的调控网络（Lavin等人，2017；Papalexi和Satija，2018；Xu等人，2022；Zhang等人，2025）。尽管scRNA-seq在DLBCL患者研究中的应用受到了广泛关注，但关于相关细胞亚群的定义、功能状态和调控机制仍存在很大分歧。该领域现有的研究结果仍需要系统整合。为解决这一研究空白，本研究严格遵循PRISMA指南进行了系统评价，旨在整合现有的scRNA-seq证据，系统地描绘DLBCL中CD8? T细胞的异质性分子特征、动态分化轨迹和多维调控网络，并阐明这些特征与治疗反应之间的关联。最终，这项工作为DLBCL精准免疫治疗策略的开发提供了理论基础和转化方向。
部分摘要
纳入标准
①研究类型：原创研究文章，包括观察性或干预性研究；
②参与者：确诊为DLBCL的患者；
③研究方法：必须使用单细胞RNA测序（scRNA-seq）来分析DLBCL患者的肿瘤组织样本；
④研究结果：包括对CD8+ T细胞的分析，并报告至少以下一项：a. 异质性分析：通过聚类识别不同的CD8+ T细胞亚群
文献检索和筛选流程
根据PRISMA 2020指南，我们在PubMed、Web of Science和CNKI中检索了从研究开始到2025年9月的与“弥漫大B细胞淋巴瘤”和“单细胞RNA测序”相关的文献。去除重复项后（n = 71），通过标题和摘要筛选出113篇记录，其中36篇进行了全文审查。其中18篇因缺乏CD8? T细胞亚群数据（n = 11）、未进行直接scRNA-seq分析（n = 3）或非DLBCL相关（n = 4）而被排除。最终留下18篇。
讨论
本研究严格遵循PRISMA指南，并基于前瞻性注册的PROSPERO协议（CRD420261282336）进行。通过系统整合和评估18项关于DLBCL肿瘤微环境（TME）的scRNA-seq研究，我们旨在系统阐明CD8? T细胞的功能异质性及其临床意义。
结论
总之，通过标准的方法学流程，本系统评价整合了现有scRNA-seq研究的证据，描绘了DLBCL中CD8? T细胞的动态分化轨迹——从早期耗竭的前体到终末状态——并揭示了参与这一过程的多维调控网络，包括转录、代谢和微环境相互作用。这些发现挑战了传统的“整体耗竭”观点，进一步加深了
批判性观点
传统的批量RNA测序方法会将基因表达平均值用于混合细胞群体，从而掩盖单细胞水平的转录差异，限制了我们对DLBCL中CD8? T细胞异质性及其与肿瘤微环境（TME）相互作用的理解。相比之下，单细胞RNA测序（scRNA-seq）能够高分辨率地识别异质性的CD8? T细胞亚群，表征其独特的分子特征，并重建细胞状态
手稿准备过程中生成式AI和AI辅助技术的声明
在撰写本文过程中，作者使用了DeepSeek和Doubao工具将中文手稿内容翻译成学术英语。使用这些工具后，作者对翻译内容进行了审核、编辑和验证，确保其准确性、清晰度以及与原始研究的一致性。
资助
本研究得到了新疆维吾尔自治区自然科学基金的支持[项目编号2024D01D13]。
Alimire Maimaiti，医学硕士候选人。她的主要研究方向是弥漫大B细胞淋巴瘤的肿瘤微环境和免疫疗法，采用单细胞测序技术。
