山柰酚B通过靶向5-甲基胞嘧啶RNA甲基化介导的CX26/IκBα/NF-κB信号通路，可减缓类风湿性关节炎的进展

《Phytomedicine》：Targeting 5-methylcytosine RNA methylation–mediated CX26/IκBα/NF-κB signaling by salvianolic acid B attenuates rheumatoid arthritis progression

Xu Gao|Xiaofeng Zhu|Yibin Lin|Chengkuan Liu|Qingwen Wang|Xian Lin

摘要

背景

开发针对类风湿性关节炎（RA）的新治疗靶点和创新药物仍然具有很大挑战性。尽管5-甲基胞嘧啶（m5C）RNA甲基化参与多种生物过程，但其在RA中的具体作用及其在药物开发中的潜在应用仍不明确。此外，CX26在RA进展中的作用及其对成纤维细胞样滑膜细胞（FLSs）的炎症效应尚未阐明。丹参酚酸B（SAB）是从Salvia miltiorrhiza中提取的一种生物活性成分，具有抗炎特性，但其在治疗RA中的潜力尚未得到充分探索。

目的

本研究旨在阐明m5C甲基化基因CX26在RA-FLSs中的作用，并评估SAB治疗RA的潜力。

方法

采用多组学分析来确定m5C RNA甲基化对RA发病机制的贡献，并在RA进展过程中表征m5C甲基化基因。通过甲基化RNA免疫沉淀测序和RNA测序来分析SAB对RA-FLSs中CX26 m5C甲基化的影响。利用免疫组化、定量实时PCR、Western blot、Cell Counting Kit-8、5-乙炔基-2′-脱氧尿苷（5-Ethynyl-2′-deoxyuridine）和Transwell实验来评估CX26和SAB对RA-FLSs的影响。在胶原诱导的关节炎（CIA）小鼠模型中验证了SAB的抗关节炎活性。

结果

本研究表明m5C RNA甲基化在RA进展中起着关键作用。CX26被鉴定为一种在RA-FLSs中选择性过表达的m5C甲基化基因。RA患者的滑膜中CX26水平与激活的免疫炎症表型、临床特征和治疗结果显著相关。此外，TNF会升高CX26的mRNA m5C甲基化、稳定性和表达。CX26通过激活IκBα/NF-κB信号通路促进RA-FLSs的炎症诱导的增殖、迁移和侵袭。SAB降低了CX26 mRNA的m5C甲基化并抑制了CX26的表达，从而消除了由CX26/IκBα/NF-κB信号通路引起的RA-FLSs的病理表型。此外，计算建模和CIA模型证实SAB能够缓解RA的进展。

结论

这项基于多组学分析的交叉验证研究表明，CX26是一个高度选择性的靶点，而SAB是一种有潜力用于RA治疗的新候选药物。