山柰酚通过功能重编程CD47信号通路，促进细胞保护并减轻严重急性胰腺炎中的细胞凋亡（oxeiptosis）

《Phytomedicine》：Kaempferol functionally reprograms CD47 signaling to promote cytoprotection and attenuate oxeiptosis in severe acute pancreatitis

　　

余天|张妍|高强|张鹏|悠悠兰兰|黄荣忠|张安|文娥

摘要

背景

:重症急性胰腺炎（SAP）缺乏针对性的治疗方法，功能性胰腺腺泡细胞（PAC）的大量丧失是导致死亡的主要原因。山柰酚（KA）具有明确的抗炎和细胞保护作用，来源于草药植物，但其在中枢性胰腺炎（SAP）中的直接分子靶点及作用机制尚未明确。

目的

:评估山柰酚（KA）对SAP的保护作用，并阐明其具体的分子作用机制，重点确定KA发挥细胞保护作用的直接靶点。

研究设计

:在体外模型中观察功能的变化以及PAC特异性CD47的表达情况，并结合多组学筛查和生物物理实验进行分析。

方法

:在原代PAC细胞和细胞系中通过siRNA干扰或过表达技术调控CD47的表达，并使用WT/CD47^-/-/Mist1–CD47–iOE（PAC特异性）小鼠模型进行研究。结合网络药理学、转录组学和蛋白质组学方法来筛选和验证KA的保护作用。利用计算实验技术（分子对接/动力学、CETSA、SPR、共免疫沉淀、药理上位性分析）研究KA对CD47信号通路的别构调控作用。

结果

:在SAP患者中CD47表达上调；敲除CD47可减少由KEAP1/PGAM5/AIFM1介导的细胞凋亡（oxeiptosis）。KA在所有基因型中均能降低PAC的死亡率，在CD47敲除小鼠中未显示出额外效果，且其保护作用不会被CD47过表达所抵消。机制上，KA通过别构方式结合CD47的外域结构，稳定CD47–UBQLN1复合物，将信号通路从Gαi介导的死亡途径转向Gβγ/ERK/NRF2介导的存活途径。抑制ERK信号通路会减弱KA的保护作用。KA的作用依赖于CD47的存在。

结论

:本研究发现山柰酚（KA）在SAP中的新药理作用为抗oxeiptosis。其机制是通过别构调控CD47信号通路，将促进细胞死亡的信号途径转变为保护性途径，激活Gβγ/ERK/NRF2通路以抑制oxeiptosis。这些发现表明CD47–oxeiptosis通路是一个潜在的治疗靶点，使山柰酚成为SAP治疗的有希望的候选药物，为其已知的药理特性增添了新的机制维度。