培育携带多价报告基因的恒河猴，以评估基因编辑的效果

《Scientific Reports》：Generation of a rhesus macaque harboring a multivalent reporter for assessing gene editing outcomes

摘要

体细胞基因编辑疗法为多种遗传性疾病提供了潜在的持久治疗方法，目前已有许多疗法处于不同的临床试验阶段。开发安全有效的疗法需要相关的临床前动物模型，这些模型能够检测基因编辑是否准确到达目标位置以及是否存在脱靶效应。本文介绍了一种转基因恒河猴的创建过程，该猴子携带了一种名为“双价增强型交通灯编辑系统”（BETLE）的基因编辑工具，这是一种多色荧光报告基因，可以用于监测多种基因编辑模式，包括脱靶效应。我们通过受精卵显微注射和piggyBac转座酶技术生成了植入前胚胎，最终培育出了一只健康的转基因恒河猴。广泛的分子分析表明，该转基因猴子的体内仅有一份完整的报告基因拷贝；然而，其体内细胞呈嵌合状态，仅有5–8%的细胞含有该报告基因，不过所有生殖细胞层中都存在阳性细胞。这种转基因猴子的创建为未来的基因编辑研究提供了重要数据，其后代可作为评估基因疗法效果和准确性的有力工具。