《Materials Today Bio》：Enhanced Ocular Delivery of Tacrolimus via Cationic Nanoliposomes: Mitigating Inflammation and Rebalancing Th17/Treg Responses in Dry Eye Disease
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干眼症（DED）是一类以持续性炎症与免疫失衡为核心特征的常见眼表疾病，可导致视力损害及生活质量显著下降。目前局部药物治疗虽为DED主要干预手段，但常受限于角膜穿透效率低、眼生物利用度不足及长期用药潜在安全性风险。针对上述瓶颈，研究人员构建了低剂量阳离子他克莫司
干眼症（DED）是一类以持续性炎症与免疫失衡为核心特征的常见眼表疾病，可导致视力损害及生活质量显著下降。目前局部药物治疗虽为DED主要干预手段，但常受限于角膜穿透效率低、眼生物利用度不足及长期用药潜在安全性风险。针对上述瓶颈，研究人员构建了低剂量阳离子他克莫司纳米脂质体递送系统（FK506 NLPs），旨在提升眼表药物滞留的同时靶向调控免疫炎症紊乱。带正电荷的NLPs通过黏附作用延长角膜滞留时间并增强药物透膜能力。在苯扎氯铵（BAK）诱导的小鼠DED模型中，FK506 NLPs加速眼表修复，改善泪膜稳定性，并保护结膜杯状细胞与泪腺结构完整性。机制层面，该制剂可抑制角膜与泪腺组织中关键促炎介质表达，并通过重建辅助性T细胞17（Th17）与调节性T细胞（Treg）的平衡恢复免疫稳态。值得注意的是，FK506 NLPs在体内表现出良好的生物相容性。综上，本研究证实FK506 NLPs兼具优化的眼表药物递送能力与协同抗炎及免疫调节作用，为DED治疗提供了具有转化潜力的新策略。
本研究由浙江大学医学院附属第二医院眼科中心团队完成，发表于《Materials Today Bio》，针对干眼症（DED）现有局部药物生物利用度低、长期高浓度免疫抑制剂易干扰调节性T细胞（Treg）功能的核心瓶颈，开发了一种低浓度阳离子他克莫司纳米脂质体（FK506 NLPs）递送系统，实现了眼表长效滞留与免疫稳态协同调控的治疗突破。
研究采用的关键技术方法包括：采用薄膜分散-水化法制备载药纳米脂质体，通过动态光散射与透射电镜表征理化性质；建立苯扎氯铵（BAK）诱导的小鼠DED模型，设置生理盐水、游离FK506溶液（0.2 mg/mL）、市售FK506滴眼液（1 mg/mL）及FK506 NLPs（0.2 mg/mL）四组干预，通过酚红棉线试验、泪膜破裂时间（TBUT）、角膜荧光素染色评估疗效；采用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）与免疫荧光检测炎症因子及上皮标志物表达；通过流式细胞术分析颈淋巴结中Th17与Treg亚群比例，结合转录水平验证免疫平衡调控效应。
研究结果如下：
FK506 NLPs的表征
透射电镜显示FK506 NLPs呈均一球形，平均粒径约197 nm，zeta电位为+28.30 mV，体外释放呈双相特征，12 h内释放26.16%，60 h累积释放68.64%；傅里叶变换红外光谱证实药物与脂质载体间形成氢键相互作用，实现稳定包封。
FK506 NLPs的眼表滞留
活体荧光成像显示，阳离子NLPs通过静电作用与眼表黏液层结合，给药25 min后荧光强度仍为游离染料的2倍，显著延长眼表滞留时间。
FK506 NLPs的生物相容性
细胞实验显示FK506 NLPs对人角膜上皮细胞无显著毒性；小鼠局部给药后未见角膜结构损伤、炎症浸润或全身器官病理改变，体重稳定，证实其良好安全性。
FK506 NLPs对DED眼表损伤的治疗效果
治疗3天后，FK506 NLPs组角膜荧光素染色评分降至4.4，泪液分泌量从2.06 mm提升至3.90 mm，TBUT从0.29 s延长至1.80 s，同时恢复角膜上皮厚度、结膜杯状细胞密度及泪腺结构，疗效优于游离药物与市售制剂。
FK506 NLPs对DED眼表炎症的抑制作用
FK506 NLPs显著降低角膜与泪腺中IL-1β与基质金属蛋白酶-9（MMP-9）的mRNA及蛋白表达，抑制率分别达82.3%与57.5%，并逆转角膜上皮角化标志物细胞角蛋白10（CK-10）的异常升高，恢复上皮稳态。
FK506 NLPs重建DED中Th17/Treg免疫稳态
流式细胞术显示，FK506 NLPs将颈淋巴结中Th17细胞比例从3.95%降至1.77%，同时将Treg细胞比例从3.55%提升至5.92%；转录与免疫荧光结果一致，该制剂在角膜与泪腺中同步下调Th17相关因子（IL-17A、RORγt），上调Treg相关因子（Foxp3、TGF-β、IL-10），实现多组织免疫平衡重塑。
讨论与结论部分指出，传统FK506因疏水性强、清除快，需高浓度给药，可能抑制Foxp3表达并损害Treg功能。本研究通过纳米载体将药物浓度降至0.2 mg/mL（仅为市售制剂1/5），利用阳离子脂质体的黏膜黏附特性延长滞留，在低剂量下既有效抑制Th17介导的炎症，又避免高浓度对Treg的不利影响，甚至通过低水平NFAT核转位协同Smad3信号促进Foxp3表达。该研究为DED的纳米免疫调节治疗提供了兼具高生物利用度与安全性的新策略，也为其他眼表免疫性疾病递送系统研发提供了参考范式。
