疏水相互作用色谱法能够分离出具有不同脂质组特征的细胞外囊泡组分

《Scientific Reports》：Hydrophobic interaction chromatography resolves extracellular vesicle fractions with distinct lipidomic signatures

摘要

目前的细胞外囊泡（EV）分离方法主要基于尺寸和密度进行，但这些方法对囊泡颗粒表面化学性质的了解有限。在这里，我们报道了一种利用疏水相互作用色谱（HIC）技术根据膜界面疏水性的差异来分离EV的方法。通过使用市售的HIC柱，实现了EV样品的可重复分离，得到了在保留行为和脂质组成上有所不同的分离组分。透射电子显微镜（TEM）观察显示这些分离组分具有与EV一致的形态，表明在HIC过程中囊泡的完整性得到了保持。通过反相液相色谱与四极杆飞行时间质谱联用（RP-LC-Q-TOF-MS）进行的脂质组学分析揭示了各组分之间的脂质组成差异。重要的是，我们证明了可以直接将预处理过的生物流体注入HIC柱中，从而无需先进行超速离心即可分离含有EV的纳米颗粒群体。此外，从脂质组学数据中得出的界面疏水性指数与HIC分离结果之间存在明显的相关性，这一指数为分离机制提供了额外的组成描述参数。这种基于疏水性的分离策略为EV分析引入了一个全新的物理化学维度，揭示了传统分离方法无法发现的化学结构异质性。该分离流程为EV的分离提供了一种实用的方法，该方法直接适用于脂质组学分析和EV膜化学的研究。