综述：整合CRISPR基因组编辑技术与肝脏类器官及人诱导多能干细胞来源微流控平台构建代谢功能障碍相关脂肪性肝病模型

《Biochemistry and Biophysics Reports》：Integrating CRISPR genome editing with liver organoid and hiPSC-derived microfluidic platforms to model metabolic dysfunction–associated steatotic liver disease

　　

代谢功能障碍相关脂肪性肝病（MASLD）及其进展形式代谢功能障碍相关脂肪性肝炎（MASH）由遗传易感性、代谢应激与肝细胞多细胞功能异常共同驱动。然而，已识别的风险与保护性等位变异的因果机制阐释仍受限于缺乏人源相关模型系统。本综述探讨解析MASLD相关变异的病理生理作用如何完善疾病机制认知并指导体外建模策略，重点阐述人诱导多能干细胞（hiPSC）来源的人肝系统结合CRISPR基因组编辑技术进展，如何实现精准遗传操作并生成用于肝脏研究的同基因、人类白细胞抗原（HLA）匹配模型。通过将上述方法与肝脏分化方案、类器官系统及肝芯片平台相结合，可形成稳健框架用于模拟患者特异性遗传变异，该整合策略将支持机制研究、治疗靶点验证及MASLD基因组编辑干预的安全性与有效性评估。

1. 1.
   Introduction
   代谢功能障碍相关脂肪性肝病（MASLD）前称非酒精性脂肪性肝病（NAFLD），定义为存在至少一项心脏代谢危险因素且无过量饮酒情况下的肝脏脂肪变性，疾病谱涵盖单纯肝脂肪变性、代谢功能障碍相关脂肪性肝炎（MASH）、进行性纤维化、肝硬化及MASH相关肝细胞癌（HCC）。其发生发展由遗传易感性、宿主代谢状态与环境影响的复杂互作驱动。在机制层面，MASH进展以肝细胞损伤与炎症的自我强化循环为特征：激活的巨噬细胞释放促炎细胞因子，刺激先天免疫通路并促进肝星状细胞（HSC）转分化为增殖性肌成纤维细胞，最终驱动纤维化与组织重塑。这些过程进一步受全身代谢功能异常调控，包括胰岛素抵抗、激素失衡与肠道菌群改变，其对不同肝细胞的效应随疾病分期与损伤背景存在差异。全球MASLD负担在过去二十年中显著上升，主要受饮食结构改变、体力活动减少与快速城市化推动，全球患病率估计达38%，且存在区域异质性。MASLD目前已成为欧美终末期肝病与肝移植的首要病因，并与心血管疾病、2型糖尿病、慢性肾病及部分恶性肿瘤等肝外并发症密切相关。
   为明确MASLD的遗传决定因素，多组学整合分析已识别出多个易感基因与单核苷酸多态性（SNP），人工智能分析框架的应用进一步加速了复杂代谢表型候选变异的发现。但现有研究的核心局限在于难以阐明这些易感位点对疾病发病机制的机制性贡献，主要归因于缺乏能在重现人肝疾病细胞与遗传复杂性的实验系统中进行功能验证。传统体内模型与常规3D培养系统虽提供了重要机制线索，但存在显著缺陷：啮齿类模型常无法复现患者特异性表型且不能充分反映人类遗传多样性，多数体外系统缺乏模拟细胞间串扰所需的多细胞结构，且肝脏病理的物种特异性限制了动物模型的转化相关性。MASLD显著的遗传与临床异质性进一步增加了患者分层、生物标志物开发与治疗方案设计的难度，遗传变异、代谢功能异常与环境因素的互作导致肝细胞、免疫细胞与基质细胞群产生细胞类型特异性效应，亟需能以高分辨率解析这些互作的实验系统。人源相关策略尤其是CRISPR基因组编辑与人诱导多能干细胞（hiPSC）技术的结合，为解决上述局限提供了有力平台：基因组编辑可在同基因背景下精准操作疾病相关变异，直接评估因果关系；hiPSC来源的肝谱系则允许从确定遗传背景生成多种肝细胞类型，解析细胞类型对疾病的特异性贡献。这类系统有望桥接遗传关联与功能验证的鸿沟，通过生成携带风险等位基因引入或校正后的同基因hiPSC来源肝样细胞，可直接探究其对肝细胞脂质代谢及下游病理过程的影响。将上述模型与类器官及微生理系统集成，可进一步增强其重现多细胞互作与组织水平复杂性的能力。随着领域向整合基因组编辑、患者特异性干细胞与工程化微环境的先进体外平台发展，系统评估各模型的优势与局限至关重要，不同系统在代谢功能异常、炎症与遗传变异性研究中具备独特能力，互补使用对推进MASLD的机制认知与治疗开发不可或缺。本综述基于此需求，聚焦CRISPR基因组编辑与hiPSC来源肝脏类器官、肝芯片平台的整合应用，目标包括：鉴定与特定变异相关的未知基因靶点；利用先进编辑工具与多细胞灌流肝系统将遗传风险变异与功能表型关联；优先筛选可作为治疗干预核心的方法；阐明关键局限、转化挑战及在机制研究、药物发现与精准医学中的未来应用。
2. 2.
   Methods
   本研究为文献综述，旨在综合基因组编辑与人诱导多能干细胞（hiPSC）基础肝模型在MASLD研究中的最新进展。通过系统检索PubMed、Nature Reviews、Journal of Hepatology、Web of Science与Scopus数据库，组合使用“MASLD/MAFLD”“hiPSC”“肝脏类器官”“肝芯片”“CRISPR基因组编辑”等关键词筛选相关文献，优先纳入近期研究与提供机制或转化见解的同行评议原创研究与综述，按模型系统、遗传策略与疾病表型进行主题分类，以提供领域的整合概览。为保证一致性，本综述采用反映生物复杂性递增的分层命名：hiPSC为多能起始点，可分化为包括肝样细胞与非实质细胞在内的肝谱系；3D肝脏类器官由肝成体干细胞（ASC）或hiPSC在限定微环境中经定向分化或自组织形成；更高级的微生理系统如肝芯片平台则整合灌流与生化信号以模拟肝功能，各术语独立使用且不可互换。

2.1. Stem cells

干细胞具有可再生性，能在适当生长因子与生化信号诱导下分化为组织特异性肝类型。与成熟原代人肝细胞损伤后增殖与再生能力受限不同，干细胞可作为肝脏生物工程的无限细胞来源，为再生医学与肝脏疾病提供潜在解决方案。

2.2. Hepatic stem cells

肝来源干细胞包括胎儿、重编程与成体肝干细胞，可用于产生功能性肝细胞。胎儿肝干细胞或肝母细胞源自发育中胎儿肝脏，具有显著增殖潜能与双向分化为成熟肝细胞与胆管细胞的潜力，具体分化方向取决于信号调控。

2.3. Human induced pluripotent stem cells (hiPSCs)

hiPSC构成多数肝病模型的基础细胞平台，由体细胞重编程为多能状态，可生成所有肝系与非肝系细胞。hiPSC本身不具备肝特异性属性，仅通过定向分化或正向重编程为肝谱系细胞后才获得肝功能。通过分阶段发育方案，hiPSC可分化为表达脂质代谢、药物解毒与胆汁酸处理相关酶与转运体的肝样细胞（hiPSC-iHeps）；谱系特异性分化流程还可生成胆管细胞、肝星状细胞、内皮细胞与Kupffer样巨噬细胞等非实质肝细胞类型，从而重现对肝脏生理与疾病进展至关重要的多细胞微环境。

2.4. Liver organoid systems

肝脏类器官研究近年取得显著进展，相较于2D分化培养，其能更好重现三维肝结构与多细胞组织的特征，可由hiPSC或ASC衍生，模拟肝脏的结构、遗传与功能特性。Clevers团队首次实现人成体干细胞（ASC）来源的双潜能胆管细胞类器官（CO）的成功扩增，该类器官可在体外分化为肝类器官，目前已被用于研究MASH的晚期发育轨迹。相比之下，hiPSC来源肝类器官通过多种分化谱系的自组织形成，可生成包含肝细胞、胆管细胞、基质样细胞的结构，部分方案还可整合免疫或内皮区室。这类3D系统支持胆小管形成、细胞极性、带状代谢模式与纤维化反应等高级功能，特别适用于模拟MASLD/MASH相关机制。但为提升生理相关性与解决静态3D培养的局限，类器官研究自然向包含灌流、机械刺激与微环境动态控制的微生理系统延伸。

2.5. Microphysiological systems (MPS)

微生理系统（MPS）是互补的工程化技术，通过精确控制的生物物理与生化微环境重现器官水平功能。MPS平台整合微流控灌流、剪切应力、氧梯度与动态营养交换，比静态培养系统更能生理性地重现肝脏特征。肝芯片（LoC）是MPS的肝脏特异性子类，将hiPSC来源肝细胞、类器官或原代肝细胞共培养整合于灌流微流控通道中，可模拟代谢带状分布、实时脂质通量、增强的线粒体功能与持续胆汁酸转运等基础肝生理特征，支持长期培养与持续功能读数。当与基因编辑肝谱系或类器官结合时，LoC系统可提供多尺度平台，用于评估变异特异性的代谢与炎症通路改变。上述体外平台涵盖递增的复杂度层级：hiPSC作为多能起源、分化肝谱系作为功能单元、类器官作为结构化3D组织、微生理系统（LoC）提供生理相关信号。尽管功能强大，其充分效用取决于是否与疾病的潜在分子机制对齐，因此下一节将阐述MASLD/MASH的病理生理与关键遗传驱动因素，以明确这些模型需捕获的细胞与变异特异性过程。

1. 3.
   Pathophysiology and key genetic drivers of metabolic dysfunction–associated steatotic liver disease
   遗传易感性是决定MASLD严重程度与进展的主要决定因素，常见与罕见变异调控脂质代谢、炎症与纤维化。MASH的发病机制是环境、遗传与代谢因素的复杂互作：肝脂肪变性以肝细胞脂质过度蓄积为核心，通常由新生脂质生成增加、β氧化减少与游离脂肪酸（FFA）内流增加共同驱动。胰岛素抵抗进一步加剧脂毒性与肝细胞FFA摄取，氧化应激、内质网（ER）应激与线粒体功能异常共同导致肝细胞气球样变与炎症，进而释放损伤相关分子模式（DAMP），激活Kupffer细胞、单核细胞来源巨噬细胞与肝星状细胞向间充质细胞转化，最终导致细胞外基质沉积与纤维化。无菌性炎症处于代谢损伤与免疫激活的交叉点，进一步推动疾病从脂质蓄积向不可逆肝损伤进展。脂毒性是MASLD/MASH的核心机制特征，以饱和脂肪酸、神经酰胺与二酰甘油等毒性脂质种类蓄积为特征，进一步诱导ER应激、线粒体损伤、氧化还原平衡改变，并激活c-Jun N末端激酶（JNK）、核因子κB（NF-κB）、NOD-、LRR-与pyrin结构域包含蛋白3（NLRP3）炎性小体信号通路。这些肝细胞应激反应触发肿瘤坏死因子（TNF-α、IL-6）、趋化因子（CCL2）与胞外RNA（eRNA）等细胞因子的释放，作为强效危险相关分子模式（DAMP）。肝细胞与非实质细胞的串扰最终促进肝窦内皮细胞功能异常、星状细胞激活、胶原沉积与纤维化。
   全基因组关联研究（GWAS）与外显子测序已识别出多个MAFLD与MASH的风险等位基因，遗传力估计为35%-61%，但这些研究仅能建立关联而非因果关系，功能解读常需表达数量性状位点（eQTL）、表观基因组学与CRISPR验证等额外层面的支持。因此，体外平台进展结合二代测序（NGS）方法学、计算分析与人工智能，有望填补这一空白，推动MASLD领域从识别疾病易感常见遗传变异的GWAS阶段向功能机制研究转型。近期研究已详细解析MAFLD遗传易感性的风险与相关机制，涵盖脂滴代谢、新生脂质生成、葡萄糖代谢、极低密度脂蛋白（VLDL）组装、线粒体功能异常与炎症等过程，后续章节将针对适合体外研究应用的MASLD/MASH核心遗传风险位点展开阐述。
   3.1. Patatin-like phospholipase domain-containing protein 3 (PNPLA3 (I148M))
   PNPLA3是重要的脂肪酶调节因子，介导脂滴中三酰甘油水解为游离脂肪酸。其变异（148位异亮氨酸替换为甲硫氨酸，I148M；47位丝氨酸替换为丙氨酸，S47A）是与MASLD/MASH人群关联最显著的等位基因，构成疾病最重要的遗传驱动因素之一，催化活性受损，促进PNPLA3与甘油三酯在肝脂滴中蓄积。变异rs738409 C>G编码148位异亮氨酸到甲硫氨酸的替换，通过作用于脂滴并与其他脂质修饰酶互作，影响甘油三酯（TG）与视黄基酯水解酶的调控。I148M变异通过受损的二酰甘油向磷脂酰胆碱的转酰基作用，促进多不饱和脂肪酸（PUFA）在肝内滞留。该变异作用于脂滴时可隔离α/β-水解酶结构域包含蛋白5（ABHD5），限制其激活脂肪组织甘油三酯脂肪酶（ATGL）与抑制甘油三酯水解的能力，这种缺失并非脂肪变性表型的唯一原因，变异细胞中脂滴的蓄积反而功能性干扰ATGL介导的脂解，产生显性功能获得效应，驱动甘油三酯蓄积。这些发现为设计精细化的脂肪变性与MASH实验模型提供了依据。
   3.2. Transmembrane 6 superfamily member 2 TM6SF2 (E167K)
   跨膜6超家族成员2（TM6SF2）于2014年首次被发现，表达于肝细胞与肠上皮细胞，调控肝内脂质处理与肠道极低密度脂蛋白（VLDL）代谢。TM6SF2的功能缺失变异，尤其是E167K，与代谢功能障碍相关脂肪性肝炎（MASH）强烈相关，通过与PNPLA3互作介导的脂质重塑受损促进肝脂肪变性。其他功能缺失变异（包括L156P与P216L）的深度表型分析显示其对进展性脂肪变性与肝损伤具有可比性风险，表明TM6SF2完全缺失会加剧疾病易感性。实验研究还提示肠道TM6SF2缺乏参与肠-肝轴功能异常，以脂质代谢改变、菌群失调与内毒素转位增加为特征，但相关发现目前仅限于小鼠模型。TM6SF2与PNPLA3变异共同揭示了连接脂滴重塑异常与脂蛋白分泌缺陷至肝细胞脂肪变性与损伤的汇聚遗传机制。
   3.3. (Glucokinase regulatory protein) GCKR (P446L)
   葡萄糖激酶调节蛋白（GCKR）编码葡萄糖代谢酶葡萄糖激酶的调节蛋白，通过保护肝细胞与胰岛β细胞中的葡萄糖代谢酶葡萄糖激酶，作为葡萄糖代谢与储存的主调节器。野生型GCKR通过调控葡萄糖内流调节肝细胞的从头脂质生成（DNL）。GCKR基因的两个相对常见变异（rs1260326与rs780094）已被证实与MASLD风险升高相关。一项针对455名儿童与青少年的研究评估了GCKR基因变异与MAFLD的关联，结果显示GCKR rs1260326变异与MASH及纤维化强烈相关。另一项研究则显示，高肝硬度与GCKR变异rs1260326与肝硬化逆转概率升高相关，可通过循环脂质代谢物特征区分逆转者与未逆转者，提示在代偿期肝硬化患者中，脂质信号可作为识别纤维化逆转的无创生物标志物。
   3.4. Membrane-bound O-acyltransferase domain–containing 7, MBOAT7 (rs641738 C>T)
   膜结合O-酰基转移酶结构域包含蛋白7（MBOAT7）是肝细胞与Kupffer细胞中磷脂重塑Lands途径的关键酶，通过类花生酸生成调控炎症与纤维化信号。近期meta分析将rs641738 C>T变异与MASLD全谱、纤维化、肝酶升高及甘油三酯升高相关联，但一致关联主要局限于欧洲裔人群。机制研究显示MBOAT7功能缺失通过转录共激活因子TAZ（WWTR1）上调促进MASH与纤维化；相反，肝细胞特异性恢复MBOAT7可减弱小鼠模型的纤维化信号，提示针对降低MBOAT7表达的遗传变异携带者的潜在治疗策略。这些变异（GCKR、MBOAT7）导致MASLD进展中的代谢通量、磷脂重塑与炎症通路改变，而还原论系统难以捕捉这一过程，凸显了需要同基因体外模型解析变异特异性效应的必要性。
   3.5. (17-beta-Hydroxysteroid dehydrogenase type 13) HSD17B13 loss-of-function variants
   17-β-羟基类固醇脱氢酶13（HSD17B13）功能缺失变异与慢性MASH风险降低相关，对多个群体具有保护作用，但存在祖先依赖性差异。该效应与视黄醇脱氢酶活性降低、视黄醇代谢改变及纤维化进展减弱相关，并可部分抵消PNPLA3 I148M等位基因的有害效应。HSD17B13的表达似乎主要局限于肝细胞，其保护效应是源于直接调控视黄酸信号还是间接旁分泌机制目前尚不明确，为结合肝基质细胞的深入研究提供了机会。RNA干扰分子rapirosiran的早期临床评估显示出安全性，可降低肝HSD17B13表达，改善脂肪变性与小叶炎症，支持了其体外模型进一步治疗开发的潜力。
   3.6. (Mitochondrial amidoxime reducing component 1) MTARC 1
   线粒体脒肟还原组分1（MTARC1）是哺乳动物钼辅因子依赖的线粒体N-还原系统关键组分。全基因组关联筛选显示MTARC1风险等位基因与MASH相关，使其成为MASH治疗的潜在靶点，但mARC1的MASH相关分子功能仍不明确。MTARC1的错义与无义变异（p.A165T，rs2642438 G>A）提示这些变异对携带者具有MASH表型保护作用，与MASH、肝脂肪变性、肝酶升高、肝硬化及肝脏相关死亡率风险降低相关。一项研究采用靶向肝细胞的siRNA评估Mtarc1在MASH进展中的作用，结果显示Mtarc1敲低通过降低肝质量、血清酶、血清脂质与肝甘油三酯（TG），保护饮食诱导的肥胖MASH动物模型的肝细胞免于MASLD进展，但该结果同样仅限于小鼠模型，限制了其在人类中的转化研究。与风险等位基因不同，HSD17B13与MTARC1等保护性变异强调了在相关人源系统中研究功能缺失机制及其治疗潜力的必要性。
   3.7. APOLIPOPROTEIN B (APOB) Truncating mutation
   载脂蛋白B（APOB）是脂蛋白的核心结构组分，调控肝与肠道脂质转运：肝细胞中产生APOB100（>500 kDa）用于极低密度脂蛋白分泌，肠上皮细胞中产生APOB48（>240 kDa）用于乳糜微粒组装。因此，APOB是全身脂质转运的“骨架”，其功能与维持肝-肠脂质稳态密切相关。APOB基因功能缺失会破坏这一平衡，导致含APOB的循环脂蛋白减少、脂质吸收不良，以及肝脂肪变性与肝硬化风险升高，正如家族性低β脂蛋白血症中所观察到的。尽管如此，APOB变异在进展期MASLD患者中富集，与较低的血浆脂质水平但更高的肝病进展风险相关，支持其在遗传风险分层中的潜在应用。
   3.8. MICROSOMAL TRIGLYCERIDE TRANSFER PROTEIN (MTTP mutations)
   微粒体甘油三酯转移蛋白（MTTP）对肝细胞产生含APOB的脂蛋白与肠吸收上皮细胞的乳糜微粒组装至关重要。MTTP变异已被证实与MASH易感性相关。一项基于英国生物样本库（UK Biobank）的机器学习分析显示，MTTP基因失活变异对脂质调控至关重要，与肝甘油三酯水平显著升高相关：比较19名变异携带者与17,994名非携带者，携带者中位肝甘油三酯含量为6.9%，肝脂肪变性易感性（11.0%）高于非携带者，但该分析仅限于自我报告欧洲裔人群。APOB与MTTP突变解释了即使循环脂质水平降低，缺陷性肝脂质输出仍可促进脂肪变性的机制，凸显了仅依赖血清生物标志物的局限及新型类器官系统的必要性。
   上述遗传变异共同定义了MASLD/MASH谱中的关键代谢、炎症与纤维化过程，但仅靠遗传关联无法确立因果关系，强调需结合CRISPR技术在人肝模型中机制性解析变异特异性效应的必要性。这些技术提供了理解变异如何与代谢应激互作驱动疾病进展所需的结构、功能与信号基础。下一节将阐述基因编辑的基本原理。
2. 4.
   Techniques and basic principles of gene editing
   基因编辑指能够对细胞基因组进行精准修饰的一系列技术，本节中基因编辑特指基于核酸内切酶（CRISPR-Cas9介导的双链断裂）与无核酸内切酶（碱基编辑与引导编辑）的策略。这些技术可进一步分为两大类：特异性核酸内切酶为基础的平台与无核酸内切酶平台。前者通过在靶位点引入DNA双链断裂（DSB），借助同源重组或非同源末端连接（NHEJ）修复缺陷基因，适用于肝脏类器官与hiPSC。基因编辑可根据疾病相关位点的基因组结构设计，精准定位导致表型的变异，评估变异在编码或调控区的位置、功能影响及其与启动子、增强子或剪接位点的关联。建模目标应聚焦于重现MASLD谱系的表型，提供更优的量化和人生理学相关的疾病进展洞察。编辑策略则需根据潜在变异的规模与调控性质组织，从单核苷酸替换到大型结构改变与转录调控异常。
   4.1. Mega nucleases
   巨核酸酶又称归巢内切酶，包括锌指核酸酶（ZFN）、转录激活样效应物核酸酶（TALEN）与CRISPR-Cas9系统。ZFN与TALEN利用DNA识别结构域原理，设计用于将治疗性cDNA整合至“安全港位点”（如白蛋白（Alb）基因）的读码框内，利用其在肝细胞中的强启动子活性确保治疗基因的充分表达。除CRISPR/Cas与多重基因组工程外，上述系统均为位点特异性，CRISPR/Cas的特异性由包含通用反式激活crRNA与特异性CRISPR RNA的小向导RNA决定。尽管疾病变异的识别与工程已取得全面进展，全基因组分析显示Cas9与其他可编程核酸酶类似，可识别并切割与靶位点序列相似的非靶位点，存在脱靶效应。这凸显了通过下一代方法持续优化CRISPR-Cas系统的必要性，以提升靶特异性并最小化脱靶效应，尤其在精度对治疗开发至关重要的肝模型中。同时，提升与广泛使用向导RNA变异的兼容性，也为进一步提高DNA靶向保真度提供了机会。这些进展标志着从传统的双链断裂（DSB）依赖型编辑向更精准、可编程的基因组工程策略的转型，同时伴随递送技术的进步，尤其是病毒递送系统的发展。
   4.2. Viral delivery systems
   核酸内切酶平台可与无核酸内切酶平台（如腺相关病毒（AAV）及其他病毒或非病毒载体，如脂质纳米颗粒（LNP））结合。AAV因免疫原性低且能在不分裂细胞（如肝细胞）中维持持久基因表达，成为有前景的基因递送平台，适用于MBOAT7或HSD17B13等严重功能缺失或删除变异，这类情况需要治疗性转基因或保护性亚型的长效表达，对MASLD研究具有重要价值。
   4.3. Base editors
   碱基编辑器通过将DNA脱氨酶与催化缺陷型Cas核酸酶偶联，实现对特定区域单个碱基的精准修饰。碱基编辑结合了Cas蛋白的基因组靶向能力与脱氨酶的DNA碱基编辑功能，偶尔需要更多调控元件以实现更高效的功能。一项研究报道了针对遗传性代谢病（IMD）婴儿的体内碱基编辑治疗，这项“n-of-1”试验构建了完善的诊疗管线，在诊断后7个月内为一名新生儿发病的氨甲酰磷酸合成酶I（CPS1）缺乏婴儿递送了定制化基因编辑治疗，证明了碱基编辑在人类个性化治疗中的可行性与早期成功，该方法有望用于治疗肝细胞的代谢功能异常相关变异。引导编辑（prime editing）则与碱基编辑器不同，无需DSB即可修复SNP。引导编辑器（PE）不受转换变化的限制，可引入靶向替换，适用于需要精确碱基改变、微小插入与缺失的变异（如PNPLA3 I148M或TM6SF2 E167K），且无需供体模板。引导编辑结合了Cas9切口酶与逆转录酶，精度更高，未来有望安全修复人类MASLD疾病，因其几乎无脱靶效应。
   4.4. RNA editing
   RNA编辑特指反义RNA引导的腺苷脱氨酶作用于RNA介导的可编程A-to-I编辑，已成为修饰RNA以纠正致病突变、调控基因表达与蛋白质功能的有力工具。当前RNA编辑技术包括小干扰RNA（siRNA）、反义寡核苷酸（ASO）与新兴的CRISPR-Cas13等。RNA编辑适用于可通过转录水平调控正常化的变异（如TM6SF2或GCKR）。根据图2的框架，RNA编辑策略转化为MASLD治疗的关键在于维持RNA稳定性