Phyllanthus englerii Pax叶提取物生物活性草本制剂的植物化学成分及抗菌评价：针对特应性皮炎相关微生物的潜在外用制剂开发

《Clinical Phytoscience》：Phytochemical constituents and antimicrobial evaluation towards development of bioactive herbal formulation from Phyllanthus englerii Pax leaf extracts for potential topical application against selected microbes

　　

特应性皮炎（Atopic dermatitis, AD）是一种常与致病微生物相关的皮肤疾病，全球每年影响约150万人，其治疗因抗菌药物耐药性（Antimicrobial resistance, AMR）上升而愈发困难。本研究旨在通过对Phyllanthus englerii Pax乙酸乙酯叶提取物的植物化学成分分析及抗菌活性评价，开发可用于AD相关感染治疗的生物活性草本制剂。研究人员采用冷浸渍法获得提取物，结合化学筛选、气相色谱-质谱（Gas Chromatography-Mass Spectrometry, GC-MS）及液相色谱-质谱（Liquid Chromatography-Mass Spectrometry, LC-MS）鉴定关键化合物。提取物及制剂分别对金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）、大肠杆菌（Escherichia coli）和白色念珠菌（Candida albicans）进行抗菌测试，并以卤虫幼虫致死实验评估毒性，同时对制剂进行为期28天的理化性质及稳定性检测。结果显示，提取物含有生物碱、酚类、强心苷、甾体、单宁和萜类化合物，共鉴定出17种植物化学成分，以新植二烯（neophytadiene）、角鲨烯（squalene）、植醇（phytol）、紫云英苷（astragalin）、杨梅苷（myricitrin）和根皮素（phlorizin）为主。乙酸乙酯提取物对上述三种微生物的最低抑菌浓度（Minimum Inhibitory Concentration, MIC）分别为5.83、3.75和5.00 mg/mL，且毒性较低（半数致死浓度LC50=125.50 μg/mL）。凝胶型草本制剂在所有测试病原体中均表现出抑菌圈，范围为8.00±0.44至17.00±1.25 mm，其中含6.24%提取物的配方JPEA2活性最强，尤其对白色念珠菌抑制显著。制剂在28天内保持了良好的稳定性和理化性质。研究结果表明，该凝胶型草本制剂有望成为AD相关微生物感染的替代治疗剂。

本研究发表于《Clinical Phytoscience》，针对特应性皮炎（AD）及其相关微生物感染治疗中抗菌药物耐药性（AMR）日益严重的问题，探索药用植物Phyllanthus englerii Pax叶提取物的抗菌潜力，并开发适合外用的草本制剂。AD的全球控制难度不断增加，因其常伴发金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和白色念珠菌等感染，现有药物疗效受限。因此，研究人员从坦桑尼亚采集P. englerii叶片，通过冷浸渍法获得不同极性溶剂的提取物，采用植物化学筛选结合GC-MS与LC-MS技术解析其成分，以微量稀释法测定最低抑菌浓度（MIC），并以卤虫幼虫致死实验评估急性毒性，最终将活性提取物制备成软膏、乳膏及凝胶制剂，并通过琼脂孔扩散法评估其抗菌活性，同时检测制剂的理化性质与稳定性。

在研究方法上，关键步骤包括：在坦桑尼亚Urambo地区采集P. englerii叶片，经阴干粉碎后依次用正己烷、乙酸乙酯、乙醇及蒸馏水进行顺序提取；利用标准化学试剂法筛查生物碱、酚类、黄酮等成分；采用GC-MS分析挥发性成分，LC-MS分析极性成分；选取金黄色葡萄球菌（ATCC25923）、大肠杆菌（ATCC25922）及白色念珠菌（NR-29341）为受试菌株，测定MIC；以卤虫幼虫模型进行初步毒性评估；将活性提取物按不同比例制成三类外用制剂，并在28天内监测理化性质与抗菌活性变化。

研究结果如下：

提取物得率：不同极性溶剂的得率差异明显，乙酸乙酯提取物得率为3.33%，乙醇提取物最高（9.34%），正己烷最低（2.56%）。

植物化学成分特征：乙酸乙酯提取物富含生物碱、酚类、强心苷、甾体、单宁和萜类，其中甾体与萜类在所有提取物中均存在。GC-MS与LC-MS共鉴定出17种成分，主要为萜类、酚类、黄酮类、脂肪酸、酯类、脂质及甾体。

抗菌活性：正己烷提取物几乎无活性（MIC >10 mg/mL），乙酸乙酯、乙醇和水提物表现出中等至较弱的抑菌作用，乙酸乙酯提取物对大肠杆菌和白色念珠菌的MIC最低，分别为3.75 mg/mL和5.00 mg/mL。

毒性评估：乙酸乙酯提取物的LC₅₀为125.50 μg/mL，属低毒水平，适合外用制剂开发。

制剂抗菌性能：凝胶制剂的抑菌圈范围为8.00±0.25至17.00±1.25 mm，其中JPEA2与JPEA3活性最强，软膏和乳膏因基质扩散性差活性较弱。

理化性质与稳定性：最佳配方JPEA2呈深绿色，具芳香气味，质地均匀光滑，易溶于水，pH为5.9，在-22℃、25℃及37℃条件下保持稳定。

在讨论与结论部分，研究人员指出，虽然乙酸乙酯提取物的抗菌活性不及常规抗生素，但其低毒性和多类活性成分（如维生素E、黄酮及酚类）赋予其在护肤及抗炎方面的潜力。配方JPEA2兼具较好的抗菌效果、稳定性与安全性，可作为AD相关感染的外用候选制剂。然而，当前结果仅基于体外实验与初步毒理评估，尚缺乏体内药效及长期安全性数据。后续需对活性单体化合物进行分离鉴定，优化制剂配方，并开展系统的临床前及临床研究，以验证其治疗效果与应用安全性。