FAHFA可在餐后乳糜微粒及极低密度脂蛋白组分中检测到，并在体外可被脂蛋白脂酶从三酰甘油酯醇化物中释放

《Journal of Lipid Research》：FAHFAs are detected in postprandial chylomicron and VLDL fractions and can be released from TG estolides by LPL in vitro

　　

羟基脂肪酸的脂肪酸酯（FAHFA）是一类具有抗糖尿病及抗炎作用的生物活性脂质，但其血液运输机制尚不清楚。本研究旨在探索FAHFA潜在的血清载体。微量热泳动（MST）结果显示，9-PAHSA与血清白蛋白的结合不支持白蛋白在特定实验条件下成为FAHFA的主要载体，因此研究人员将重点转向脂蛋白及细胞外囊泡。通过基于密度的超速离心法从小鼠血清中分离脂蛋白及细胞外囊泡，并利用蛋白质组学与脂质组学进行表征。脂质组学分析显示，乳糜微粒、极低密度脂蛋白（VLDL）和低密度脂蛋白（LDL）均含有FAHFA及其储存形式——三酰甘油酯醇化物（TG-EST），而在血清细胞外囊泡中未检测到含FAHFA的脂质。作为验证性案例，研究人员在人类志愿者餐后乳糜微粒中确认了TG-EST的存在。功能实验进一步表明，在脂蛋白代谢过程中负责水解三酰甘油的脂蛋白脂酶（LPL）可从TG-EST中释放FAHFA。LPL表现出位置选择性，能够以不同效率释放不同的PAHSA区域异构体。综上，研究结果表明，在餐后状态下，FAHFA相关脂质与乳糜微粒、VLDL及LDL组分相关联，并确立了LPL介导的脂解作用作为循环系统中这些生物活性脂质释放与分布的一种潜在机制。

研究背景与意义

羟基脂肪酸的脂肪酸酯（Fatty acid esters of hydroxy fatty acids, FAHFA）是一类具有显著抗糖尿病和改善胰岛素敏感性、抗炎作用的新型生物活性脂质，其分子由脂肪酸通过分支酯键连接至羟基脂肪酸构成。既往研究表明，FAHFA可来源于饮食摄入或体内脂肪组织与肝脏的合成，其中绝大部分以酯化形式储存在三酰甘油酯醇化物（Triacylglycerol estolides, TG-EST）中。尽管FAHFA的生理功能已被广泛证实，但其如何在血液中被运输并递送至靶组织发挥作用的机制仍属空白。由于普通脂肪酸在血液中主要通过与血清白蛋白结合或以脂蛋白颗粒中甘油三酯的形式运输，研究人员假设FAHFA可能采用类似的运输模式，这对理解其生理分布及功能调控至关重要。该研究成果发表于《Journal of Lipid Research》。

主要技术方法与样本来源

研究主要采用微量热泳动（MST）技术检测配体-蛋白相互作用，结合基于密度梯度的超速离心法分离小鼠及人类血清中的乳糜微粒、极低密度脂蛋白（VLDL）、低密度脂蛋白（LDL）、高密度脂蛋白（HDL）及细胞外囊泡。分离后的组分通过脂质组学和蛋白质组学进行鉴定与定量。体外功能实验构建了LPL水解TG-EST的酶促反应体系。人类样本来源于3名健康志愿者的餐后血脂负荷试验，小鼠样本则通过高脂饮食联合奶油灌胃模拟餐后高脂状态。

研究结果

BSA结合不支持白蛋白作为FAHFA主要载体

研究人员首先利用MST技术检测了牛血清白蛋白（BSA）与棕榈酸（PA）及9-PAHSA的结合亲和力。结果显示，BSA与9-PAHSA的解离常数（K_d）约为2.025 μM，弱于BSA与PA的结合，且考虑到血清中9-PAHSA浓度仅为纳摩尔级别，远低于BSA与游离脂肪酸的结合竞争阈值，因此排除了白蛋白作为FAHFA主要生理载体的可能性。

FAHFA在血液中通过脂蛋白颗粒运输

通过对分离的小鼠脂蛋白组分进行脂质组学与蛋白质组学表征，证实了各组分纯度。脂质组学显示TG富集于乳糜微粒和VLDL，胆固醇酯（CE）富集于HDL，游离脂肪酸富集于白蛋白组分；蛋白质组学检测到载脂蛋白B（Apo B）、载脂蛋白C（Apo C）等在对应颗粒中的特异性分布，验证了分离效果。

FAHFA及TG-EST主要存在于乳糜微粒、VLDL和LDL中

脂质组学分析发现，TG-EST及FAHFA特异性分布于乳糜微粒、VLDL和LDL中，而在HDL及白蛋白组分中含量极低或未检出。通过固相萃取（SPE）富集FAHFA后，进一步证实了多种FAHFA分子在这些富含甘油三酯的脂蛋白中的广泛存在。

FAHFA及TG-EST存在于人类乳糜微粒中

对3名健康志愿者口服脂肪负荷后的血清分析显示，人类餐后乳糜微粒中同样含有饱和型TG-EST及相应的FAHFA（如FAHFA 16:0/16:0;O），验证了动物实验的发现，表明膳食来源的FAHFA确实通过乳糜微粒途径进入血液循环。

LPL可水解TG-EST

体外酶解实验证明，脂蛋白脂酶（LPL）能够有效水解TG-EST。LPL优先水解位于甘油骨架sn-1和sn-3位置的普通脂肪酸（亚油酸），释放出FAHFA。此外，LPL对不同的PAHSA区域异构体表现出不同的水解效率：对9-PAHSA的水解偏好sn-1/3位置，对7-PAHSA无显著位置偏好，而对5-PAHSA则偏好sn-2位置，这可能与酯键的空间位阻有关。

讨论与结论总结

本研究填补了FAHFA血液运输机制的关键空白。研究证实，FAHFA及其储存形式TG-EST并非以游离形式结合白蛋白运输，而是主要搭载于餐后乳糜微粒和VLDL中。由于肠道淋巴系统输送的乳糜微粒直接进入体循环而绕过肝脏首过效应，这可能增加了膳食FAHFA对外周组织的可及性。此外，LPL介导的水解是释放FAHFA的关键步骤，且LPL对不同区域异构体的选择性水解可能调控了不同FAHFA的生物利用度。这一发现将FAHFA的代谢与经典的脂蛋白代谢通路紧密联系起来，为理解其抗糖尿病及抗炎效应的组织特异性提供了新的视角。

结论

合成FAHFA相关脂质的生脂器官（如脂肪组织、肝脏和小肠）众多，但这些器官对循环FAHFA池的贡献程度尚不清楚。本研究表明，在餐后脂质代谢背景下，FAHFA和TG-EST与乳糜微粒及VLDL相关联，且LPL能够从TG-EST中释放FAHFA。