基于血清尿激酶型纤溶酶原激活物区分HER2表达临界型与HER2阳性肿瘤及其他亚型的研究

《British Journal of Cancer》：Differentiating borderline HER2-expressing and HER2-positive cancers from other subtypes using serum urokinase plasminogen activator

　　

背景：HER2阳性（HER2+）肿瘤侵袭性强，靶向阻断HER2/neu信号通路可显著改善患者临床结局。目前HER2状态检测主要依赖实体肿瘤组织活检，难以满足治疗调整所需的连续实时监测需求，而靶向血液循环HER2/neu片段的血清检测常呈现肿瘤与血清结果不一致的问题。方法：研究人员采用纤维素酶联适配体夹心法检测癌症患者与健康人血清中尿激酶型纤溶酶原激活物（urokinase plasminogen activator, uPA）及其不同形式，将血清uPA水平与实体活检结果、电子病历临床数据及氟代脱氧葡萄糖正电子发射断层扫描/计算机断层扫描（FDG-PET/CT）结果进行关联分析。结果：研究显示血清uPA可精准分层HER2/neu过表达（HER2+）及表达临界型肿瘤患者，在100例患者的队列中，总uPA以0.973 ng·mL?1为HER2+/表达临界型截断值，对HER2/neu肿瘤状态的判断准确率达96.8%。结论：该血清uPA液体活检检测方法有望用于HER2+及表达临界型肿瘤的精准诊断与分期，但仍需进一步验证性研究确认其临床价值。

本研究针对HER2阳性肿瘤临床分型检测中组织活检无法连续监测、现有血清标志物准确性不足的痛点，首次证实血清尿激酶型纤溶酶原激活物（uPA）可作为区分HER2过表达及表达临界型肿瘤的高效液体活检标志物，成果发表于《British Journal of Cancer》。研究纳入30名健康志愿者与100例癌症患者（含乳腺癌、食管癌、胃癌及贲门癌）的血清样本，所有病例均经实体活检明确HER2免疫组化评分，部分辅以荧光原位杂交验证基因扩增状态，同时匹配FDG-PET/CT影像学结果。

关键技术方法包括：采用电化学纤维素酶联适配体夹心法（e-ELASA）分别检测血清总uPA、高分子量uPA（HMW uPA）及低分子量uPA（LMW uPA），该方法基于磁珠捕获适配体与纤维素酶标记报告适配体构建检测体系，通过计时库仑法读取信号，检测限达1 aM；所有血清样本经10倍稀释后检测，结果与组织病理HER2状态、临床分期及生存数据进行统计学关联。

研究结果分为三部分：第一部分分析血清HER2/neu与总uPA水平，发现仅少数HER2⁺患者血清HER2/neu显著升高，多数病例浓度低于传统截断值，与既往报道一致，显示血清HER2/neu与肿瘤状态相关性弱；而血清总uPA在HER2过表达及表达临界型患者中显著升高，平均浓度分别为4.468 ng·mL^?1（乳腺癌5.751 ng·mL^?1、食管癌3.366 ng·mL^?1），较HER2阴性患者高200倍以上，较健康人群高444倍，受试者工作特征曲线（ROC）分析显示曲线下面积（AUC）达0.997，截断值为0.973 ng·mL^?1，整体准确率为96.6%。第二部分分析uPA不同亚型，发现HMW uPA在各组间无显著差异，AUC仅为0.72，无法有效区分肿瘤类型；而LMW uPA占总uPA的主要比例，在HER2过表达及表达临界型患者中显著升高，AUC达0.997，截断值为0.943 ng·mL^?1，对乳腺癌与食管癌的分型准确率分别达99.8%与99.6%，证实LMW uPA是核心效应亚型。第三部分进一步验证，血清uPA水平不受患者性别、年龄、体重指数、雌激素受体状态、肿瘤负荷及转移状态影响，且在部分经治疗达到影像学缓解的患者中仍维持高水平，提示其可能独立于抗HER2治疗持续表达。

讨论部分指出，uPA与HER2的共表达可能与HER2激活诱导蛋白激酶Cα及核因子κB信号通路，进而调控uPA受体（uPAR）与uPA基因共扩增有关；LMW uPA的特异性升高则源于uPA/uPAR二聚体介导的自催化剪切，使其无法结合受体而释放入血。与既往研究相比，本研究首次明确血清LMW uPA而非总uPA或HMW uPA可作为HER2相关肿瘤的分型标志物，解决了传统血清HER2检测一致性差的问题。研究局限性在于未纳入炎症、凝血功能异常人群的对照，且缺乏治疗前后纵向随访数据，需在更大队列中验证其预后价值。最终结论为：血清总uPA以0.973 ng·mL^?1为截断值，对HER2过表达及表达临界型肿瘤的判断准确率达96.8%，该液体活检策略有望优化HER2阳性肿瘤的患者筛选与疗效监测，但仍需前瞻性研究确认其对靶向治疗响应的预测价值。