综述：癌症信号通路中的酪氨酸硝化修饰

《Redox Biology》：Nitration in Cancer Signaling

　　

氧化应激源于活性氧(reactive oxygen species, ROS)与活性氮(reactive nitrogen species, RNS)的生成同细胞抗氧化防御系统对其清除能力之间的失衡。在癌症中，这种失衡驱动信号网络发生病理性重塑，促进肿瘤起始与进展。RNS中的一氧化氮(nitric oxide, ·NO)及其高活性衍生物过氧亚硝基阴离子(peroxynitrite, ONOO-)是肿瘤微环境内氧化还原失调的核心介质。这些物种可诱导位点特异性的翻译后修饰(post-translational modifications, PTMs)，其中最显著的是蛋白质酪氨酸硝化(protein tyrosine nitration)，该修饰可深刻改变蛋白质结构、功能、相互作用网络及周转速率，进而重塑核心细胞进程。本综述系统解析氧化应激的分子机制，重点阐述硝化驱动的蛋白质修饰及其对致癌信号的影响。研究人员汇总证据表明，关键信号蛋白的选择性硝化积极促进多种恶性肿瘤特征的形成：硝化事件通过破坏核心信号通路、细胞周期调控及细胞死亡程序，促进肿瘤起始与生长、异常增殖、迁移与转移、代谢重编程、血管生成、侵袭、凋亡抵抗及免疫逃逸。这些发现支持一个新兴范式，即硝化蛋白不仅是氧化应激的被动副产物，更是肿瘤发生的主动效应分子。研究人员进一步探讨这一概念的转化意义，将蛋白质酪氨酸硝化定位为具有明确机制的生物标志物来源及治疗弱点靶点。深入解析蛋白质酪氨酸硝化的选择性、结构后果及生物学影响，对于开发创新性精准策略以调控癌症氧化还原信号并最终改善临床结局至关重要。

引言

慢性炎症是肿瘤起始与进展的公认驱动因素，其特征为肿瘤微环境中持续产生RNS。RNS包含·NO及·NO生成下游的一系列活性物种，其中过氧亚硝基阴离子(ONOO^-)是强氧化剂。生理条件下，·NO调节血管舒张、局部血流、内皮屏障完整性及突触信号与可塑性；病理状态下，·NO生成增加或失调会促进RNS形成，介导靶向蛋白质、脂质及核酸的氧化、硝化与亚硝基化反应，改变大分子结构与功能。S-亚硝基化(S-nitrosylation)指半胱氨酸残基上由·NO驱动的巯基化学修饰，形成S-亚硝基硫醇(S-nitrosothiols, S-NO)。这些氧化还原依赖的修饰并非单纯的细胞毒性副产物，而是调节细胞内信号通路、转录程序及细胞命运决策的调控机制，最终影响基因表达、细胞生长分化及凋亡与坏死。现有证据明确RNS通过将氧化、硝化与亚硝基化引入参与细胞存活、增殖及基因组稳定性的信号蛋白、转录因子及酶，成为连接炎症与肿瘤发生的关键介质。本综述聚焦可重新布线细胞信号、使其从稳态控制转向促肿瘤状态的氧化还原驱动的关键蛋白质修饰，重点关注经酪氨酸硝化与半胱氨酸氧化选择性靶向且具有明确功能后果的蛋白质，从而为RNS信号与癌细胞迁移、侵袭、进展及血管重塑之间的联系提供生化框架。尽管RNS可导致生物分子（包括脂质与蛋白质）的多种氧化修饰，本综述聚焦于蛋白质酪氨酸硝化这一选择性且化学性质稳定的翻译后修饰，其可在癌症信号中转导持续的性功能改变。

一氧化氮与过氧亚硝基阴离子在肿瘤生物学中的作用

肿瘤中·NO的生物学效应呈浓度依赖性双重性：相对低浓度时，·NO促进肿瘤生长、增殖、血管生成与转移；高浓度时则诱导凋亡并抑制肿瘤进展。但在多数肿瘤背景下，·NO还可通过阻断caspase激活（包括细胞色素c释放下游的caspase 9）抑制凋亡，从而促进癌细胞存活与增殖。除直接影响肿瘤细胞外，·NO在内皮细胞生物学中发挥基础作用，调节迁移、增殖、分化及血管生成。肿瘤微环境中，·NO通过诱导血管生成与淋巴管生成因子表达、上调血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)及增强内皮对VEGF信号的应答，促进新生血管形成；同时·NO调节基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases, MMPs)表达以促进细胞外基质重塑，推动上皮-间质转化(epithelial-to-mesenchymal transition, EMT)并支持侵袭与转移行为。许多归因于高·NO水平的致病效应实际由过氧亚硝基阴离子形成介导。病理条件下，·NO与超氧化物(superoxide, O₂^·-)以扩散限制速率反应生成过氧亚硝基阴离子。尽管超氧化物歧化酶(superoxide dismutases, SODs)能以接近扩散限制的速率清除O₂^·-，但过氧亚硝基阴离子的形成在动力学上仍占优势，因为·NO与O₂^·-的反应速率比SOD催化的超氧化物歧化反应快一个数量级。过氧亚硝基阴离子形成后可修饰蛋白质上的多种氨基酸，包括半胱氨酸与甲硫氨酸的氧化，以及色氨酸与酪氨酸的硝化，根据残基在蛋白质中的位置不同，可改变蛋白质功能。过氧亚硝基阴离子的生物学作用同样呈浓度与背景依赖性：中等水平时，其可通过选择性信号机制促进细胞进程；高水平时则发挥细胞毒性作用，这一特性被先天免疫系统用于宿主防御。这种双重性反映了过氧亚硝基阴离子生成动力学与细胞缓冲能力的根本差异。由于过氧亚硝基阴离子由·NO与超氧阴离子的扩散控制反应生成，其生物学效应主要由局部生成速率与空间限制决定，而非绝对稳态浓度。鉴于其半衰期短且与二氧化碳、巯基及金属蛋白的快速反应，过氧亚硝基阴离子不会在生物系统中累积至高浓度，其作用最好通过局部暴露与背景依赖的下游生物学结局来理解。病理条件下，根据疾病背景与抗氧化能力，过氧亚硝基阴离子的生成及由此产生的氧化翻译后修饰可在不引起明显细胞毒性的情况下选择性调节信号通路。

过氧亚硝基阴离子介导的蛋白质功能与信号转导的化学转化

过氧亚硝基阴离子介导的修饰的功能后果需在竞争性及协同性翻译后修饰的整体背景下解读。过氧亚硝基阴离子以阴离子形式(ONOO^-)与其共轭酸过氧亚硝酸(peroxynitrous acid, ONOOH)平衡存在，生理pH下以ONOO^-为主，而ONOOH是导致直接双电子氧化反应的主要物种，靶向含硫氨基酸（半胱氨酸、甲硫氨酸）及色氨酸，其中半胱氨酸反应速率最快。ONOOH还可发生均裂生成羟基自由基(·OH)与二氧化氮(·NO₂)，但该反应速率较慢，在生物条件下主要与易得的二氧化碳(CO₂)快速反应生成瞬态中间体亚硝基过氧碳酸盐(ONOOCO₂^-)，随后分解为碳酸根自由基(carbonate radical, CO₃^·-)与·NO₂，这些次级自由基是细胞内ONOO^-反应性的主要介导者，优先靶向含巯基或芳香侧链的氨基酸（半胱氨酸、甲硫氨酸、酪氨酸、色氨酸）。生物巯基(RSH/RS^-)主要来自蛋白质的半胱氨酸残基，其反应性由质子化巯基(RSH)与其共轭碱巯基阴离子(RS^-)的酸碱平衡决定，巯基阴离子可作为强亲核试剂。半胱氨酸氧化还原敏感的巯基侧链氧化使其成为可逆的氧化开关，氧化后的半胱氨酸可形成次磺酸(RSOH)，并可进一步通过二硫键稳定，作为功能的开/关开关，调节蛋白质活性与下游信号，是硫氧还蛋白与谷胱甘肽依赖的抗氧化系统氧化还原循环的核心。半胱氨酸氧化可由ONOOH与ONOO^-衍生物介导，产生可逆与不可逆变化：ONOOH与巯基阴离子反应生成亚硝酸盐(NO₂^-)与次磺酸；无稳定伙伴或氧化剂过量时，次磺酸可被不可逆氧化为亚磺酸(RSO₂H)与磺酸(RSO₃H)，亚磺酸可被亚磺酰还原酶还原，但更高氧化态常标志氧化损伤与蛋白质功能障碍。此外，ONOO^-衍生的CO₃^·-与·NO₂也可通过单电子反应氧化巯基，生成巯基自由基(^·RS)，后者可与氧反应生成过氧巯基自由基(RSOO^·)，最终被还原为亚磺酸或进一步氧化为磺酸。过氧亚硝基阴离子还可氧化甲硫氨酸为甲硫氨酸亚砜(methionine sulfoxide, MetO)，这是氧化应激的另一标记物。细胞中的过氧亚硝基阴离子还可与芳香族氨基酸（色氨酸、酪氨酸）反应，其中酪氨酸残基的硝化与细胞信号密切相关。

生物系统中蛋白质酪氨酸硝化的机制途径

蛋白质酪氨酸硝化通过酶促与非酶促途径产生，这些途径在特定生化与细胞背景下生成RNS，选择性修饰蛋白质中的特定酪氨酸残基。硝化效率与选择性受局部生化条件（包括区室化与氧化还原环境）强烈影响。酪氨酸硝化指在酪氨酸芳香环羟基邻位添加硝基(-NO₂)，形成3-硝基酪氨酸。该修饰可由酶促与非酶促途径介导，但生物系统中主要的化学反应由ONOO^-衍生的CO₃^·-与·NO₂驱动：碳酸根自由基将酪氨酸氧化为酪氨酰自由基，随后与·NO₂反应生成硝基酪氨酸，该机制在·NO与O₂^·-共产生的细胞环境（如炎症与肿瘤微环境）中占主导。过氧亚硝基阴离子的反应性还受其与金属蛋白及低分子量复合物中过渡金属中心相互作用的调节，这些反应可通过单电子或双电子途径生成·NO₂或促进过氧亚硝基阴离子异构化为硝酸盐，从而影响硝化信号与解毒的平衡。除过氧亚硝基阴离子依赖的化学途径外，酶促途径也参与蛋白质硝化：髓过氧化物酶(myeloperoxidase, MPO)与嗜酸性粒细胞过氧化物酶(eosinophil peroxidase, EPO)等血红素过氧化物酶可在过氧化氢(H₂O₂)存在下催化亚硝酸盐(NO₂^-)氧化，生成二氧化氮等硝化物种，这在富含活化中性粒细胞与嗜酸性粒细胞的炎症环境中尤为重要。这些途径共同表明，蛋白质酪氨酸硝化来自空间与化学上不同的机制网络，各途径的相对贡献由局部氧化还原环境、活性中间体的可及性及细胞背景决定，凸显了生物系统中硝化信号的复杂性。酪氨酸硝化发生在复杂的氧化还原环境中，甲硫氨酸与半胱氨酸等其他氨基酸残基可作为氧化与自由基介导反应的替代靶点；模型系统中的实验与计算研究表明，酪氨酰自由基与邻近半胱氨酸残基之间的分子内电子转移可影响硝化化学的结果，在某些情况下抑制酪氨酸硝化同时促进巯基自由基形成。这些发现表明，蛋白质硝化的选择性不仅由RNS的存在决定，还受局部蛋白质结构、残基邻近性及竞争性氧化还原反应的影响。硝基酪氨酸是·NO介导的氧化性炎症反应标记物，也是过氧亚硝基阴离子介导的细胞毒性的核心组成部分。即使长期内过氧亚硝基阴离子水平仅中度升高，也可导致显著氧化；根据酪氨酸残基在蛋白质中的位置，硝化可改变蛋白质结构与功能，进而导致细胞骨架改变、抗原表位产生、酶催化活性改变、细胞信号转导通路破坏、关键细胞进程功能障碍，甚至通过凋亡或坏死诱导细胞死亡。尽管历史上硝化与细胞毒性损伤相关，但现在研究者认识到过氧亚硝基阴离子形成与酪氨酸硝化也是生成功能性活性硝化蛋白的机制，可在疾病发病机制核心重编程关键细胞通路。蛋白质组学分析显示，蛋白质酪氨酸硝化具有高度选择性，靶向参与关键细胞进程的有限蛋白质的特定酪氨酸残基；蛋白质硝化可抑制或激活蛋白质功能、促进降解或稳定改变的构象，从而驱动细胞通路失调，例如人锰超氧化物歧化酶(manganese-superoxide dismutase, MnSOD)酪氨酸34硝化导致其失活，而小GTP酶RhoA的硝化则激活该蛋白并促进细胞糖酵解。因此，硝化蛋白日益被认为是跨多种癌症状态的广泛相关调控轴，反映了肿瘤微环境的普遍氧化还原失衡。慢性炎症、癌基因驱动的代谢应激、缺氧及免疫细胞浸润共同作用，维持·NO与超氧化物生成升高，创造有利于过氧亚硝基阴离子形成的条件，这种局部硝化应激驱动有限的一组位于关键信号节点的蛋白质的酪氨酸残基发生选择性硝化。酪氨酸硝化并非随机发生，而是生成功能独特的蛋白质状态，在不同癌症类型中重编程致癌信号、代谢、细胞命运决策及免疫互作。现有数据库已收录近1000种经实验验证的硝化位点蛋白，其中许多参与癌症中失调的关键细胞进程，提示其硝化可能对致癌信号产生深远影响。需注意的是，并非所有病理条件下的蛋白质硝化都必然伴随功能调节，界定硝基蛋白质组中具有病理活性的蛋白质将为新的机制与治疗范式打开大门。

氧化对p53肿瘤抑制功能的失调调控

p53参与癌症发生的研究已有四十余年，部分研究显示·NO生成增加与突变p53细胞的选择相关，促进人类 carcinogenesis与肿瘤进展。研究人员证实，在人MCF-7乳腺癌细胞中，·NO可诱导p53构象改变，降低其与DNA的结合能力，从而削弱肿瘤抑制活性；后续研究确认，高浓度S-亚硝基谷胱甘肽暴露可导致p53酪氨酸硝化，引起聚集并丧失p53特异性DNA结合能力，可能通过损害该肿瘤抑制蛋白的功能参与致癌过程。有趣的是，硝基化p53在人类胶质母细胞瘤（最具侵袭性的脑肿瘤）中可被检测到，其效应与体外重组蛋白或细胞暴露于·NO的效应相似，提示该翻译后修饰可能导致多种氧化性疾病（包括癌症）中p53肿瘤抑制功能失活。近期研究则发现，在低·NO浓度下，MCF7与Saos-2细胞中p53仅在Y327位点发生硝化，该位点特异性硝化促进p53寡聚化与核积累，并增强DNA结合能力，但其下游转录响应与DNA损伤触发的响应显著不同。p53的DNA结合还受C275、C277、C141与C182氧化调节，半胱氨酸的可逆氧化（包括次磺酸化与二硫键形成）可降低序列特异性DNA结合并重塑蛋白质-蛋白质互作；关键半胱氨酸残基（C242、C277）的S-亚硝基化则可破坏p53结构并损害DNA结合，这可能是无TP53基因突变的肿瘤中p53失活的机制之一。p53活性受复杂PTM网络调节，包括磷酸化与乙酰化，在应激条件下调控其稳定性与转录活性；因此，酪氨酸硝化与S-亚硝基化的功能后果需在这一更广泛的调控框架下解读，不同修饰可能共存并相互作用以调节p53活性，其在体内的贡献可能反映氧化还原依赖性与经典信号通路的整合。

氧化依赖的HER信号重编程

人表皮生长因子受体(human epidermal growth factor receptor, HER)家族通过MAPK、JAK/STAT与PI3K等核心通路信号调节细胞增殖、分化、迁移与凋亡，这些受体在癌症中常过表达、扩增或突变，其中HER2扩增见于卵巢癌、膀胱癌、乳腺癌、非小细胞肺癌等多种肿瘤，是已确立的治疗靶点。神经调节蛋白-1(neuregulin-1, NRG1)通过激活HER2传递信号，参与神经发育的多个过程。研究发现，NRG1硝化可降低其与HER2的结合能力：肺癌A549细胞中，细胞因子刺激诱导iNOS表达，随后导致NRG1在Y208、Y224与Y230位点发生硝化，使其丧失磷酸化、结合及激活HER2的能力。值得注意的是，HER家族信号的氧化还原调节具有复杂性，可能涉及不同甚至相反的机制：NRG1配体硝化损害其激活HER2的能力，而HER2、EGFR及Src家族激酶等受体本身含有氧化还原敏感的半胱氨酸残基，对激活至关重要，这些巯基的氧化或S-亚硝基化已被证明可调节激酶活性与信号输出，例如EGFR半胱氨酸氧化可增强受体活性。这提示在硝化或亚硝基化应激下，配体与受体的差异化修饰可产生相反的功能结局，氧化还原依赖的修饰可能同时降低配体驱动的信号，同时增强受体固有活性，凸显HER家族通路调节的背景依赖性二分法。HER家族下游的核心通路（包括丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases, MAPK)通路）也可受酪氨酸硝化与半胱氨酸氧化调节：ERK1/2、JNK、p38与ERK5等MAPK的激活环、对接界面及调控区域含有功能重要的酪氨酸残基，这些关键酪氨酸残基的硝化可差异调节激酶活性与蛋白质稳定性，例如血清饥饿的HEK293细胞及过氧亚硝基阴离子处理的重组蛋白中，ERK1的Y210发生硝化，导致该蛋白被蛋白酶体降解，从而提供下调ERK信号的机制；ERK1/2的S-亚硝基化（可能位于C183）可抑制其磷酸化并诱导MCF-7细胞凋亡。鉴于ERK信号在多种癌症中异常激活，这些发现共同支持氧化还原依赖的修饰（包括酪氨酸硝化与S-亚硝基化）可能是终止肿瘤细胞ERK驱动存活与增殖信号的可靶向机制。除激酶活性外，酪氨酸硝化还可影响细胞磷酸酶活性：蛋白磷酸酶2A(protein phosphatase 2A, PP2A)是重要的广谱表达的磷酸酶，负责大多数丝氨酸/苏氨酸残基的去磷酸化，包括MAPK家族成员的去磷酸化。PP2A是由支架A亚基(PP2AA)、调节B亚基与催化C亚基(PP2AC)组成的异三聚体。PP2A的调控亚基B56δ在氧化应激下于Y289发生硝化，虽仍可高效结合Ser70磷酸化的B细胞淋巴瘤2(B-cell lymphoma 2, BCL2)，但抑制PP2A催化核心（A与C亚基）的招募，阻止BCL2去磷酸化，高磷酸化的BCL2发挥抗凋亡活性，导致化疗诱导的凋亡抵抗；另一调节亚基B56γ在骨肉瘤U2OS细胞中发生硝化，导致PP2A失活，触发持续NF-κB激活，增强细胞迁移与侵袭；催化亚基PP2Ac的Y127硝化则被证明可激活PP2A，诱导内皮细胞发生内皮-间质转化，这对肿瘤生长、血管重塑及癌症治疗抵抗具有重要意义。Janus激酶(janus kinase, JAK)与信号转导及转录激活因子(signal transducer and activator of transcription, STAT)通路也可受酪氨酸硝化与半胱氨酸氧化失调：生长激素处理可诱导体内牛肝脏及体外培养猪肝细胞JAK2的Y1007/1008位点硝化，脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导的炎症挑战也可导致 calf肝脏JAK2该位点硝化，该位点通常为激活JAK2的磷酸化位点，硝化可阻断Y1007的进一步磷酸化，提示炎症状态调节硝化从而调控JAK2激活，这在癌症中具有重要相关性；JAK2还在C866与C917含有半胱氨酸氧化还原开关，可逆氧化可灭活激酶活性，减弱细胞对JAK偶联细胞因子的应答；STAT3的C259发生S-亚硝基化可抑制Y705磷酸化，从而灭活STAT3并抑制下游增殖信号，提示JAK2-STAT轴的氧化还原依赖调控是RNS重编程细胞因子信号的关键机制，氧化STAT3可能代表癌症中可靶向的治疗弱点。

通过PDIA3酪氨酸硝化调控内质网蛋白稳态

蛋白质二硫键异构酶A3(protein disulfide-isomerase A3, PDIA3，又称Erp57)是主要定位于内质网(endoplasmic reticulum, ER)的蛋白二硫键异构酶，也存在于细胞核与细胞膜，通过二硫键形成调节内质网中新合成蛋白质的折叠，对ER蛋白稳态至关重要。研究发现，线粒体病患者肌肉组织及过氧亚硝基阴离子处理的Jurkat细胞裂解液中，PDIA3在Y67与Y100发生硝化，该氧化修饰可能改变PDIA3活性并影响应激反应。慢性ER应激是癌症的标志性特征，赋予肿瘤在不利条件下的适应性优势以支持存活与恶性进展；PDIA3在大多数癌症类型中过表达，尤其在恶性细胞中高表达，其表达升高与侵袭性乳腺癌的细胞外蛋白累积相关，单细胞测序分析显示PDIA3表达与细胞通讯、代谢及表观遗传改变密切相关；弥漫性脑胶质瘤中PDIA3表达升高与患者不良生存相关，敲低PDIA3可显著降低胶质瘤细胞的增殖与侵袭能力。鉴于ER应激是癌症的特征，PDIA3的酪氨酸硝化可能通过调节其分子伴侣活性，维持ER应激反应，从而在癌症中发挥重要作用，具体机制有待进一步阐明。

热休克蛋白Hsp90酪氨酸硝化驱动的代谢重编程

90 kDa热休克蛋白(heat-shock protein 90, Hsp90)是真核细胞高度保守且丰度极高的分子伴侣家族成员，在体内通过协助客户蛋白折叠、稳定、重塑与成熟，调节信号转导通路与细胞周期。Hsp90拥有超过300种已知客户蛋白，包括激酶与转录因子，对细胞稳态、应激应答、存活与死亡调节至关重要。哺乳动物细胞表达两种胞质亚型：诱导型Hsp90α与组成型表达的Hsp90β，酪氨酸硝化可显著改变Hsp90的结构与功能。Hsp90β在Y33、Y56、Y276、Y484与Y596等多个酪氨酸残基发生选择性硝化，其中Y33与Y56（对应Hsp90α的Y38与Y61）的硝化可诱导Hsp90的特定病理功能。神经纤维瘤病2型相关神经鞘瘤病(neurofibromatosis type 2-related schwannomatosis, NF2-SWN)是一种由NF2基因（编码肿瘤抑制蛋白merlin）突变驱动、以双侧前庭神经鞘瘤与额外神经系统肿瘤为特征的遗传病，患者肿瘤中可检测到内源性Hsp90硝化；merlin功能缺失通过增加·NO生成同时降低MnSOD介导的超氧化物清除，破坏氧化还原稳态，导致过氧亚硝基阴离子生成升高及下游蛋白质酪氨酸硝化。使用多种互补方法阻止酪氨酸硝化可显著降低NF2-SWN神经鞘瘤细胞活力，提示存在一种或多种支持肿瘤细胞存活与增殖的硝化蛋白。NF2-SWN神经鞘瘤细胞中，过氧亚硝基阴离子驱动的酪氨酸硝化还促进代谢重布线，表现为线粒体氧化磷酸化抑制及糖酵解与谷氨酰胺分解增强，即Warburg效应的标志；这种代谢转变至少部分由位点特异性硝化的Hsp90调节：Y33硝化抑制线粒体活性，Y56硝化则通过激活P2X7受体(P2X7 receptor, P2X7R)增强糖酵解通量，共同支持肿瘤细胞增殖。值得注意的是，硝化Hsp90的功能获得效应因细胞类型不同而驱动不同信号通路与细胞结局：在高能量需求的运动神经元中，Y33与Y56硝化驱动线粒体功能障碍与凋亡性细胞死亡，参与神经退行性疾病而非增殖；在PC12神经元样模型中，Hsp90_NY56通过激活P2X7R诱导细胞死亡，下游信号不同于运动神经元，同时激活p38与JNK通路并抑制PI3K/Akt通路，而Hsp90_NY33则不诱导细胞死亡，而是形成线粒体复合物降低线粒体活性。这些不同病理功能的产生很可能反映硝化诱导的Hsp90位点特异性结构改变，生化和结构研究证实Y33与Y56硝化产生离散的构象与功能变化，赋予未修饰形式不具备的生物学活性。有趣的是，Y33与Y56也被报道为磷酸化位点：酵母中Swe1在细胞核内磷酸化Y33（酵母中为Y24），随后蛋白易位至胞质并被泛素化，导致Hsp90被蛋白酶体降解，提示磷酸化可能是“关闭”开关；但在神经鞘瘤细胞中，带有Y33硝基酪氨酸的重组人Hsp90在胞内递送48小时后仍可检测到，提示Y33硝化不触发Hsp90降解。除酪氨酸硝化外，Hsp90还可发生其他氧化翻译后修饰，包括S-亚硝基化，其可抑制ATP酶活性并损害与内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase, eNOS)的调控互作，形成限制·NO生成的负反馈环路；内皮细胞中Hsp90 C521的S-亚硝基化作为构象开关，增加与共分子伴侣CDC37的结合，参与动脉粥样硬化的恶化。CDC37是Hsp90复合物的激酶靶向共分子伴侣，通过稳定大量突变或过表达的致癌激酶在癌症生物学中发挥核心作用，提示Hsp90的S-亚硝基化可能与癌症进展相关，其与酪氨酸硝化是否存在机制联系或协同促进癌细胞增殖仍是待解问题。

硝化应激促进肿瘤免疫逃逸

肿瘤微环境由癌症相关成纤维细胞、内皮细胞、周细胞、