基于甲基化的生物标志物在薄层制备细胞学检测样本中的应用，用于宫颈癌的早期筛查：应用前景与临床潜力

《Clinical Epigenetics》：Methylation-based biomarkers from thin-prep cytology test samples for early detection of cervical cancer: application and clinical potential

　　

摘要

背景

尽管人乳头瘤病毒（HPV）检测和Thin-Prep细胞学检测（TCT）目前被作为宫颈癌的一线筛查方法，但两者都存在局限性。本研究旨在从福尔马林固定石蜡包埋（FFPE）组织和TCT样本中开发并验证新的基于甲基化的生物标志物，以改善宫颈癌（CC）的早期检测。

方法

我们通过对宫颈FFPE组织和TCT样本进行靶向甲基化测序，进行了差异甲基化分析。在宫颈组织、TCT样本和细胞系上进行了定量甲基化特异性PCR（qMSP）分析，构建了一个包含三个高度甲基化位点的诊断模型，即JAM3、VSTM2B和EPHA7。该模型的临床有效性在总共279个TCT多组样本上进行了评估，这些样本包括33例鳞状细胞癌（SCC）、14例腺癌（ADC）、43例高级别鳞状上皮内病变（HSIL）、49例低级别鳞状上皮内病变（LSIL）、78例高风险HPV（HR-HPV）阳性/细胞学正常（NILM）病例、32例健康对照组（NC）和30例良性妇科样本。模型性能通过敏感性、特异性和接收者操作特征曲线下面积（AUC）来评估。

结果

在一个独立的验证队列（n = 108）中，这三种基于甲基化的生物标志物组合显示出出色的诊断准确性。其对SCC的敏感性为100.0%（n = 10），对ADC的敏感性为80.0%（n = 5），对HSIL的敏感性为86.7%（n = 15）。在HR-HPV阳性女性（n = 32）中的特异性为90.6%，在健康对照组（n = 12）中的特异性为100.0%，在其他良性病变中的特异性为93.3%，在LSIL中的特异性为89.5%（n = 19）。总体敏感性和特异性分别为90.0%和92.3%。HPV亚型分层分析显示，对HPV16/18阳性样本的敏感性为90.9%，特异性为85.7%，对非HPV16/18亚型的敏感性也为85.7%，特异性为89.5%。

结论

JAM3/VSTM2B/EPHA7甲基化模型（JAM3^m/VSTM2B^m/EPHA7^m）在检测宫颈癌和癌前病变方面表现出优异的性能。它为克服传统HPV和TCT联合筛查方法的局限性提供了新的方向。