摘要
背景与目的
狼疮性肾炎（LN）是系统性红斑狼疮（SLE）的常见并发症，是导致患者发病率和死亡率的主要因素之一。双氢青蒿素（DHA；青蒿琥酯）对狼疮性肾炎具有良好的治疗效果，但其具体作用机制尚不明确。本研究采用蛋白酶解靶向嵌合体（PROTAC）技术来识别DHA在狼疮性肾炎治疗中的作用靶点。
实验方法
一种名为A1的新化合物的活性通过体外细胞毒性和抗炎实验进行了评估。通过A1与蛋白质组学的结合来筛选DHA的靶点，并通过Western blotting、共免疫沉淀（Co-IP）、免疫荧光、分子对接、细胞热位移实验（CETSA）以及药物亲和力响应靶点稳定性实验（DARTS）进行了验证。实验还检测了24小时蛋白尿、炎症细胞因子、血清生化指标、免疫复合物沉积情况以及肾脏病理损伤。此外，在体内通过腺相关病毒介导的RNA干扰技术沉默了CARD6基因，以全面评估DHA对MRL/lpr小鼠的影响及其作用靶点。
主要结果
研究发现，CARD6是受A1影响最显著的蛋白质，被确定为DHA的靶点。具体而言，DHA与CARD6的481–949aa区域发生相互作用。DHA通过阻断CARD6抑制RIP2/NF-κB通路，在体内和体外均表现出抗炎作用。沉默CARD6可减轻MRL/lpr小鼠的炎症反应。值得注意的是，当CARD6基因被敲除后，DHA的抑制效果消失。
结论与意义
CARD6是DHA治疗狼疮性肾炎的有效靶点。这一发现凸显了利用PROTAC技术有效识别天然产物作用靶点的巨大潜力。
图形摘要
研究发现，新型化合物PROTAC A1显著降解了CARD6蛋白，该蛋白被确定为双氢青蒿素（DHA）治疗狼疮性肾炎（LN）的靶点。DHA通过靶向CARD6/RIP2/NF-κB信号通路，在体外表现出抗炎作用，并在体内具有肾脏保护效果。
利益冲突声明
作者声明不存在利益冲突。
数据可用性声明
本研究的数据可向通讯作者索取，但部分数据可能因隐私或伦理限制而无法提供。
