针对丙型肝炎病毒核心蛋白的单克隆抗体的开发实现了快速的抗原检测

《Scientific Reports》：Monoclonal antibody development against the Hepatitis C virus core protein enables rapid antigen detection

　　

摘要

丙型肝炎病毒（HCV）仍然是全球主要的健康问题，由于可负担的诊断手段有限，阻碍了实现世界卫生组织2030年消除该病毒的目标的进程。虽然HCV核糖核酸（RNA）检测是金标准，但它需要昂贵的基础设施和技术支持。HCV核心抗原（HCVcAg）是一种可靠的替代病毒分析物，但现有的免疫测定方法仍依赖于实验室条件且成本较高。本文报道了针对HCVcAg开发的单克隆抗体（mAbs），这些抗体经过优化，可实现快速、无需仪器的抗原检测。BALB/c小鼠被用HCVcAg免疫，随后通过Beacon光流平台进行单细胞分选，分离出特异性血浆细胞。通过RT-nested PCR技术回收重链和轻链可变区，将其克隆到人IgG1/kappa表达载体中，并在HEK293细胞中短暂表达，最终纯化得到这些单克隆抗体。全面的分子分析表明，这些抗体具有高亲和力、多样的基因组利用方式以及独特的表位识别能力。经过策略性组合（M0004–M0007），这些抗体能够检测低至0.3125 ng/ml的人工合成抗原。在侧向流动检测格式下，该抗体组合表现出优异的诊断性能：灵敏度为92.0%，特异性为100%，准确率为95.6%，阳性预测值为100%，阴性预测值为91.3%，Cohen’s κ值为0.91，曲线下面积（AUC）为0.859，McNemar χ2检验结果无显著性。在低病毒载量样本中，其性能依然稳定，灵敏度为85.7%，特异性为100%，准确率为94.3%，阳性预测值为100%，阴性预测值为91.3%，κ值为0.88，AUC为0.759，McNemar χ2检验结果无显著性。这些发现为开发临床可用的HCVcAg快速检测方法奠定了基础，该方法在床旁筛查、诊断 decentralization（此处可能为“去中心化”之意，根据上下文可调整）以及治疗反应监测方面具有巨大潜力，尤其是在资源有限的环境中。