脂质纳米颗粒递送的Circ_0017866通过miR-124-3p/CLDND1轴抑制内皮-间充质转化，从而缓解脑缺血-再灌注损伤

《Neurochemical Research》：Lipid Nanoparticle-Delivered Circ_0017866 Alleviates Cerebral Ischemia-Reperfusion Injury by Suppressing Endothelial-Mesenchymal Transition via the miR-124-3p/CLDND1 Axis

摘要

缺血性中风对人类健康构成严重威胁，而再通后的脑缺血-再灌注损伤（CIRI）仍然是影响患者预后的关键因素。本研究探讨了circ_0017866/miR-124-3p/claudin domain containing 1（CLDND1）轴在CIRI诱导的内皮-间充质转化（EndMT）中的作用和机制，并评估了脂质纳米颗粒（LNP）包裹的circ_0017866的治疗潜力。实验建立了氧-葡萄糖剥夺/再灌注细胞模型和中脑动脉阻塞/再灌注小鼠模型。通过双荧光素酶报告基因检测、定量实时PCR、Western blot和免疫荧光技术验证了分子相互作用及基因/蛋白质表达。体外实验中，通过CCK-8、Transwell迁移实验和管状形成实验评估了内皮细胞的存活率和功能。体内实验中，利用LNP介导circ_0017866的递送，并通过改良的神经功能评分和2,3,5-三苯基四氮唑氯化物染色方法评估了神经缺陷和脑梗死体积。体内和体外研究均表明，在缺血-再灌注后，circ_0017866和CLDND1的表达下调，而miR-124-3p的表达上调。双荧光素酶检测证实miR-124-3p直接作用于circ_0017866和CLDND1。在OGD/R模型中，circ_0017866过表达或miR-124-3p抑制均能上调CLDND1和occludin的表达，下调α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）和Snail的表达，并改善内皮功能。在MCAO/R模型中，LNP-circ_0017866治疗显著改善了神经缺陷，减少了脑梗死体积，并降低了与EndMT相关的异常标志物的表达。circ_0017866通过作为miR-124-3p的“分子海绵”间接调节CLDND1的表达，从而缓解CIRI诱导的EndMT。LNP递送的circ_0017866有效减轻了神经缺陷并减少了脑梗死体积，为缺血性中风的治疗提供了有前景的策略。