整合单细胞分析表明，Bu-Shen-Huo-Xue方剂通过重新调节IFN-γ/JAK/STAT/CXCL10驱动的免疫-间质相互作用以及BNIP3介导的线粒体自噬，改善了子宫内膜异位症患者的铁过载卵巢功能

《Phytomedicine》：Integrative single-cell analysis reveals Bu-Shen-Huo-Xue Formula rescues iron-overloaded ovarian function via rewiring IFN-γ/JAK/STAT/CXCL10-driven immune-stromal interactions and BNIP3-mediated mitophagy in endometriosis

泽欣·倪 | 钱倩·赵 | 杨硕·李 | 山山·梅 | 金宇 | 杰丁 | 小兰·梁 | 涛孙 | 余青·王 | 文成 | 魏周 | 超琴·余

摘要

背景

卵巢子宫内膜异位症（OE）是女性不孕的主要原因之一。我们之前的研究发现，颗粒细胞的铁过载导致的氧化应激和线粒体功能障碍是关键的病理特征，但临床有效的Bu-Shen-Huo-Xue配方（BHF）的作用机制仍不清楚。

目的

探讨BHF如何减轻与OE相关的卵巢损伤和不孕，并确定其关键的生物活性成分和分子靶点。

方法

使用BHF治疗OE小鼠模型，以评估盆腔粘连、病变体积、纤维化重塑及生殖结局。通过整合单细胞RNA测序（scRNA-seq）和立体测序（Stereo-seq）技术来分析铁过载相关的卵巢微环境。研究了颗粒细胞的线粒体功能、活性氧（ROS）、衰老过程以及BNIP3-PINK1/Parkin依赖性的线粒体自噬。通过血清药理学分析鉴定BHF的成分并验证其对靶点的作用。

结果

BHF显著减少了OE小鼠的盆腔粘连、病变体积和纤维化重塑，并改善了生殖结局。铁过载会形成以干扰素通路和JAK-STAT激活为特征的黄体近端免疫纤维化微环境；BHF通过抑制CXCL10介导的免疫细胞募集和成纤维细胞活化来减弱这一微环境。在卵泡水平上，铁过载会诱导过度的BNIP3-PINK1/Parkin依赖性线粒体自噬，导致线粒体功能障碍、ROS积累、细胞衰老及应激相关的代谢重编程；BHF恢复了线粒体稳态并缓解了这些变化。研究发现，ononin是一种主要的循环成分，它能直接结合BNIP3并抑制铁诱导的线粒体自噬，从而保护颗粒细胞的功能。

结论

BHF作为一种多靶点干预措施，通过抑制铁过载相关的免疫纤维化重塑和BNIP3依赖性的线粒体自噬来保护卵巢免受损伤；ononin是一种针对BNIP3的生物活性成分，具有治疗潜力。