《PLOS Pathogens》：Expanded molecular evidence of soil-transmitted helminth and Schistosoma spp. infections in Myanmar schoolchildren: A qPCR update
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研究人员在既往关于缅甸学龄儿童土源性线虫（soil?transmitted helminth, STH）高流行率报道的基础上，对同一队列2016年采集并于2017年提取、?20°C保存至2025年的粪便存档样本开展补充性分子筛查，同时补报前期未发表的镜检结果。
研究人员在既往关于缅甸学龄儿童土源性线虫（soil?transmitted helminth, STH）高流行率报道的基础上，对同一队列2016年采集并于2017年提取、?20°C保存至2025年的粪便存档样本开展补充性分子筛查，同时补报前期未发表的镜检结果。利用定量PCR（quantitative PCR, qPCR）检测，在264份样本中检出2份血吸虫属（Schistosomaspp.）DNA阳性、12份粪类圆线虫（Strongyloides stercoralis）DNA阳性及11份锡兰钩口线虫（Ancylostoma ceylanicum）DNA阳性。血吸虫阳性样本测序未成功，但分子检测结果与近期其他研究一致，提示缅甸可能存在新兴或隐匿的血吸虫病传播。该地区血吸虫病流行病学特征尚不明确，亟需针对性开展中间宿主螺类调查、环境DNA（environmental DNA, eDNA）监测及宿主采样，以确认传播灶。本研究证明分子诊断可弥补传统寄生虫学方法的不足，为新兴流行区的监测与控制策略制定提供依据。
研究背景与意义
血吸虫病是由血吸虫属（Schistosoma）血液吸虫引起的寄生虫病，在亚洲已确认三种主要致病的物种：日本血吸虫（S. japonicum）、马来血吸虫（S. malayensis）和湄公血吸虫（S. mekongi），均为人畜共患病原体。传统诊断依赖显微镜下的Kato?Katz（KK）法，低感染强度下灵敏度有限，且难以区分形态相似的虫种。缅甸长期被视为非血吸虫病流行区，但近十余年来多地血清学和分子生物学证据提示该国可能存在新兴或再兴起的传播，具体虫种与传播链尚未明确。土源性线虫（STH）在缅甸学龄儿童中流行率高，且部分STH和人畜共患钩虫、类圆线虫在公共卫生规划中常被忽视。在此背景下，研究人员基于同一人群的前期调查，对存档样本开展扩展的分子检测，旨在揭示被传统方法遗漏的感染情况，为制定精准防控策略提供依据。该研究成果发表于《PLOS Pathogens》。
主要技术方法
研究采用2016年采集自缅甸勃固区Phyu镇274名五年级学生的粪便样本，其中264份用于qPCR检测。DNA提取于2017年完成并冻存。研究人员使用多重qPCR体系分别针对血吸虫属（28S核糖体基因及串联重复序列靶标）、粪类圆线虫、锡兰钩口线虫等设计特异性引物和探针，同时复测前期已检出的STH靶标。检测过程中评估了不同引物对灵敏度的差异，并对部分阳性样本尝试Sanger测序。样本队列来源为同一学校横断面调查，覆盖勃固区典型农村学龄儿童群体。
研究结果
血吸虫感染检测
在两套qPCR体系中，仅基于日本血吸虫串联重复序列（SjTR1）的短片段（80 bp）检测法发现2份阳性，Ct值分别为36.02和30.56，另一套长片段（264 bp）体系未检出。阳性样本测序失败，推测与DNA降解有关。两例阳性此前均检出毛首鞭形线虫（Trichuris trichiura）和蛔虫（Ascaris lumbricoides）感染，2025年复测时仅一例仍检出蛔虫，且Ct值升高，证实模板质量下降。
粪类圆线虫感染检测
基于重复序列的高灵敏度qPCR检出12份阳性，而针对SSU rRNA的长片段（471 bp）体系仅检出1份。KK法曾判定1份阳性，但未在任何qPCR体系中得到验证，提示镜检可能存在误诊。
锡兰钩口线虫感染检测
共检出11份阳性，未检测到十二指肠钩口线虫（A. duodenale）。检出率低于前期qPCR结果，可能与DNA降解有关。锡兰钩口线虫为人畜共患寄生虫，犬类是主要保虫宿主，提示动物宿主在传播链中的作用。
其他镜检结果补报
KK法还检出阔节裂头绦虫（Diphyllobothrium latum，3例）、华支睾吸虫（Clonorchis sinensis，1例）和微小膜壳绦虫（Hymenolepis nana，3例），这些结果未在前期发表。
讨论与结论
研究人员指出，尽管阳性数有限，但分子检测首次在Phyu镇提供了血吸虫属感染的实验室证据，结合邻近Shwegyin镇的历史数据，提示勃固区可能存在本地传播。由于未能完成虫种鉴定，无法区分是日本血吸虫、湄公血吸虫或其他潜在物种，这直接制约防控措施的针对性。DNA长期冻存、反复冻融及部分样本量不足可能导致检测灵敏度降低。不同qPCR靶标的长度和拷贝数差异显著影响检测效能，短片段高拷贝靶标更适合降解样本。
研究强调，血吸虫中间宿主螺类的分布与生态位差异巨大，确定缅甸的螺类宿主是阻断传播的关键。建议未来结合螺类调查、水体eDNA检测和人与动物宿主抽样，全面阐明传播链。人畜共患的锡兰钩口线虫和潜在的类圆线虫感染进一步支持将兽医公共卫生纳入传统STH控制项目，采用One Health策略应对多重寄生虫威胁。
综上，本研究通过回顾性分子筛查，揭示了缅甸学龄儿童中未被传统方法发现的多种人畜共患寄生虫感染，凸显了分子工具在新兴流行区监测中的补充价值，并为后续传播链解析与防控提供了明确的研究方向。
