《Diagnostic Microbiology and Infectious Disease》：Ethanol improves RNase P stability in nasopharyngeal samples stored at room temperature for SARS-CoV-2 RT-qPCR diagnosis
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梅泽亚由美（Lia Ayumi Umezawa）|法比安娜·巴塞洛斯·富尔塔多（Fabiana Barcelos Furtado）|加布里埃拉·博尼·波利（Gabriela Boni Poli）|莱昂纳多·纳扎里奥·德莫拉埃斯（Leonardo Nazario de Moraes
梅泽亚由美（Lia Ayumi Umezawa）|法比安娜·巴塞洛斯·富尔塔多（Fabiana Barcelos Furtado）|加布里埃拉·博尼·波利（Gabriela Boni Poli）|莱昂纳多·纳扎里奥·德莫拉埃斯（Leonardo Nazario de Moraes）|马塞西奥·若泽·德奥利维拉·阿尔霍（Maércio José De Oliveira Alho）|弗拉维亚·赫贝勒-巴尔博萨（Flavia Hebeler-Barbosa）|吉列尔梅·塔尔吉诺·瓦伦特（Guilherme Targino Valente）|雷贾内·玛丽亚·托马西尼·格罗托（Rejane Maria Tommasini Grotto）
摘要
尽管全球公共卫生紧急状态已经结束，但由于新冠病毒（SARS-CoV-2）的持续传播、新变种的出现以及疫情爆发的持续风险，COVID-19及其病原体仍然具有重要的科学和公共卫生意义。RT-qPCR是检测SARS-CoV-2的金标准方法，但其可靠性取决于在样本储存和运输过程中病毒RNA及人类核糖核酸酶P（RNase P，即内部对照）的完整性。本研究旨在评估不同保存条件对SARS-CoV-2核酸检测中核酸稳定性的影响：样本分别保存在0.9%盐水中，或加入绝对乙醇使其最终浓度达到70%（体积比），并在不同的储存温度条件下进行实验。最初使用0.9%盐水采集并运输的鼻咽拭子样本被分为不同的病毒载量类别，然后重新分配到不同的储存条件中：冷藏条件（4°C）下使用乙醇或盐水保存，或在室温下保存。通过自动化磁珠法提取RNA，并使用针对SARS-CoV-2 E基因和人类RNase P内部对照的RT-qPCR技术进行分析，监测12天内的核酸稳定性。结果显示，在两种储存介质中病毒RNA的稳定性均保持良好；然而，在室温储存条件下，盐水中RNase P的检测效果逐渐下降，而乙醇则能维持稳定的扩增效果。这些发现表明，在室温下储存鼻咽样本时，70%乙醇比盐水更能有效维持人类内部对照（RNase P）的稳定性，持续时间长达12天。
