《Tropical Animal Health and Production》：High dietary protein and energy content does not alter hepatic and renal health blood markers in growing lambs
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本研究旨在评估日粮中不同精料水平以及粗蛋白（CP）含量增加对生长羔羊肝脏和肾脏健康血液标志物的影响。研究人员开展了2项试验，共纳入64只未去势雄性Santa Inês羔羊，月龄为4月龄，初始平均体重为20?±?1?kg。羔羊单栏饲养，在57 d试验期内自由采食
本研究旨在评估日粮中不同精料水平以及粗蛋白（CP）含量增加对生长羔羊肝脏和肾脏健康血液标志物的影响。研究人员开展了2项试验，共纳入64只未去势雄性Santa Inês羔羊，月龄为4月龄，初始平均体重为20?±?1?kg。羔羊单栏饲养，在57 d试验期内自由采食，并设14 d适应期。试验1（Exp1）设置4种不同精料水平日粮，分别为400、500、600和700?g/kg DM；试验2（Exp2）设置4种不同粗蛋白水平日粮，分别为120、140、160和180?g CP/kg DM。两项试验均于第54天采集血样，用于测定血清白蛋白、尿素、胆固醇、肌酐、碱性磷酸酶（AP）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）和γ-谷氨酰转移酶（GGT）。结果表明，可消化有机物摄入量（dOM）增加并不影响所分析的血液参数（p?>?0.05）。然而，在Exp1中，血清尿素高于参考范围（17–43?mg/dL），而肌酐低于参考范围（1.2–1.9?mg/dL）。在Exp2中，粗蛋白摄入量增加导致血清尿素线性升高（p?=?0.0002），但AP、白蛋白、AST、ALT、GGT、肌酐和胆固醇均未发生变化（p?>?0.05）。本研究表明，在生长羔羊中，超过需要量的dOM和CP摄入会升高血清尿素，但不会影响肝脏或肾脏健康。
该论文发表于《Tropical Animal Health and Production》，聚焦于集约化育肥条件下生长羔羊高能量与高蛋白日粮的代谢安全性评估。研究背景在于，血液生化指标是反映反刍动物营养代谢状态、肝肾器官功能以及潜在营养失衡的重要工具。随着育肥生产向高精料、高营养密度方向发展，日粮中非纤维性碳水化合物和粗蛋白水平持续提高，虽然有助于促进增重并缩短生产周期，但也可能增加肝脏氨解毒、尿素合成及肾脏代谢排泄负担，进而引起肝肾健康相关血液标志物异常。现有研究提示，高蛋白或高精料日粮可能提高血尿素等代谢物水平，但其是否足以导致羔羊肝脏损伤或肾功能受损，尤其是在热带条件下饲养的生长羔羊中，仍缺乏系统证据。基于此，研究人员提出假设：高精料比例和超过营养需要量的粗蛋白水平可能使生长羔羊肝脏和肾脏健康相关血液指标偏离参考范围。
围绕这一问题，研究人员设计了两项同步开展的饲养试验。试验1考察不同精料比例对血液生化指标的影响，试验2评估粗蛋白水平递增的效应。研究结果表明，提高精料比例、增加可消化有机物摄入量（dOM）并未改变白蛋白、胆固醇、肌酐及多项肝酶指标，也未影响肾小球滤过率（GFR）；而提高粗蛋白摄入量则使血清尿素随之线性上升，但同样未引起AP、AST、ALT、GGT等肝酶异常，也未造成肌酐和GFR显著变化。由此可见，在本研究条件下，高于需要量的能量和蛋白摄入虽会增强含氮代谢终产物在血液中的积累，主要表现为血清尿素升高，但尚不足以造成可检测的肝脏或肾脏功能损伤。这一结论对于热带地区舍饲羔羊日粮配方安全边界的判定具有现实意义，也提示在解释羔羊生化指标时需兼顾年龄、生长阶段和营养摄入水平。
本研究主要采用以下关键技术方法：以巴西Bahia州联邦大学试验场的64只4月龄未去势雄性Santa Inês羔羊为样本来源，采用随机区组设计分别开展精料水平试验与粗蛋白水平试验；在单栏自由采食条件下记录采食量并结合粪样消化试验估算营养物质摄入与消化率，使用不可消化中性洗涤纤维（iNDF）作为内源指示剂估测粪排泄；于试验第54天采集血液和尿液，检测血清代谢物及肝酶指标，并依据肌酐清除原理估算肾小球滤过率（GFR）；最终采用SAS混合模型和随机回归分析营养摄入与血液标志物之间的关系。
Results
In Exp1, with the increase in concentrate in the diets, the average DM intake was 1029.2?g/day, with a standard deviation of ±152.3?g, while the average DM digestibility was 73.1%
试验1中，随着日粮精料水平提高，羔羊平均干物质（DM）摄入量为1029.2?g/d，标准差为±152.3?g，平均DM消化率为73.1%。与试验2相比，试验1中有机物和粗蛋白摄入及消化总体水平较低。该结果说明，在提高精料比例的处理中，动物具有较稳定的采食和消化表现，为后续分析血液生化反应提供了摄入基础。
In Exp2, with the increase in CP in the diets, the average DM intake was 1335.9?±?204.7?g/day, with an average digestibility of 69.8%
试验2中，随着日粮粗蛋白（CP）水平提高，平均DM摄入量为1335.9?±?204.7?g/d，平均消化率为69.8%。这一结果表明，在粗蛋白梯度处理中，羔羊总体采食量较高，能够形成从低于需要量到高于需要量的蛋白摄入范围，从而适于分析含氮代谢物和器官功能指标的变化。
There was no effect of the treatments both in Exp1 and Exp2 on any variables, with exception for urea in Exp2
统计分析显示，除试验2中的尿素外，两项试验各处理对其余血液变量均无显著影响（p?>?0.05）。这说明无论是精料水平提高，还是粗蛋白水平变化，在本研究设定范围内均未引起大多数肝肾健康血液标志物的系统性改变。唯一明确响应的是试验2中的血清尿素，其随CP摄入增加而发生线性升高（p?=?0.0002），提示蛋白摄入过量首先表现为含氮代谢负荷增加，而非器官损伤标志物异常。
No significant changes were observed in the blood parameters evaluated
在总体血液指标方面，研究人员未观察到显著变化。AP、AST、ALT、GGT、白蛋白和胆固醇均维持在羊推荐参考范围内，说明在提高可消化有机物或粗蛋白摄入的背景下，肝细胞膜通透性、胆道相关酶活性、蛋白合成功能及能量代谢状态并未出现明显不良改变。该结果为“高营养密度日粮不必然导致肝损伤”提供了直接证据。
Urea levels remained above the ideal range in Exp1
试验1中，尽管不同精料处理间无显著差异，但所有动物血清尿素整体高于理想参考范围17–43?mg/dL。研究人员结合摄入数据指出，这些羔羊平均CP摄入量为172.9?g/d，高于同类生长阶段动物推荐需要量，提示即便日粮等氮，仅因总蛋白摄入偏高，亦可能导致血尿素偏高。与此同时，肌酐低于成年羊参考范围，而胆固醇处于正常范围。作者据此认为，尿素升高更可能反映蛋白利用效率下降及氮排泄增强，而非肝肾实质性损伤。
The increase in CP intake in Exp2 promoted a significant linear increase in serum urea levels
试验2中，CP摄入增加显著促进血清尿素线性升高，这是全文最核心的结果之一。与之相对，AP、白蛋白、AST、ALT、GGT、肌酐及胆固醇均未见统计学差异。该结果说明，当日粮CP从120递增至180?g/kg DM时，羔羊机体对过量氮的代谢响应主要表现为尿素生成增加；但这一变化尚未传导为肝酶升高或肾功能下降，因此属于代谢适应而非明显器官损害。
In Exp2, the results were similar to Exp1, with the levels of AP, AST, ALT, GGT, albumin, and cholesterol within the ideal range
试验2的整体血液生化特征与试验1相似。AP、AST、ALT、GGT、白蛋白和胆固醇仍维持在理想范围内，进一步支持高CP摄入并未诱发可检测的肝脏损伤或能量代谢紊乱。值得注意的是，当CP摄入量超过200?g/d时，尿素超过参考值，而肌酐仍低于成年羊参考范围。这一现象结合文中讨论表明，生长羔羊较低肌酐可能与年龄较小、肌肉量较低及代谢尚未完全成熟有关，因此成年羊参考区间未必适用于本研究对象。
For the glomerular filtration rate, no changes were observed in both experiments
肾小球滤过率（GFR）在两项试验中均未发生变化。研究人员通过尿液和血清肌酐估算GFR，结果显示，不论可消化有机物摄入增加还是CP摄入增加，均未降低肾小球滤过能力。该证据与肌酐和其他生化指标共同表明，在本研究日粮条件下，肾脏排泄功能保持稳定，未出现由高营养负荷引发的肾功能损害。
Discussion
讨论部分强调，血液代谢物和肝酶指标是评估营养利用、器官功能及潜在损伤的有效工具。本研究中，试验1未见处理间尿素差异，作者将其归因于各处理日粮为等氮配方，即精料比例变化并未实质改变蛋白供给水平；但整体尿素高于参考值，提示所有动物均存在一定程度的过量氮摄入。尽管如此，AP、AST、ALT和GGT均处于正常范围，说明升高的尿素并未造成肝细胞损伤。对于肌酐偏低，作者援引幼龄羔羊生化研究指出，年轻动物因肌肉量较少，血清肌酐自然低于成年羊，因此应谨慎使用成年羊参考值解释羔羊肾功能。试验2进一步表明，当CP摄入低于需要量或接近需要量时，尿素保持在理想范围，而当CP摄入超过需要量后，血尿素明显升高。作者认为，这反映出过量蛋白并未被有效利用，而是经肝脏转化为尿素进入循环。尽管这一过程意味着代谢负担增加，但在本研究中并未伴随肝酶升高或GFR下降，因此尚不能视为肝肾损伤。胆固醇始终维持正常，也提示不存在明显能量代谢障碍或脂肪动员异常。总体而言，讨论部分的核心观点是：高于需要量的蛋白和能量摄入会改变氮代谢结局，但不会在短期育肥阶段引起可检测的肝肾功能异常。
结论部分翻译：对于羔羊而言，精料水平提高至700?g/kg DM所带来的dOM摄入增加，不会影响肝脏和肾脏健康相关血液标志物。超过需要量的高CP摄入，来自最高达180?g CP/kg DM的日粮，会使舍饲生长羔羊血尿素升高并降低肌酐。然而，在相同日粮条件下，肝酶仍维持在推荐理想范围内，表明不存在肝脏损伤。
