摘要
这项回顾性研究质疑了这样一个假设：在多胎物种（如大鼠）中，新生儿之间的生理差异比同一窝内的差异更大。传统观点认为，由于共享的围产期环境和遗传因素，应该以窝为单位进行实验重复，而不是以个体幼崽为单位。我们提供了反驳这一观点的实证证据。我们测量了三个不同组别中Sprague–Dawley（SD）新生大鼠的体重在窝内与窝间的差异：（1）24只母鼠所生的幼崽在出生后第4天（P4）的体重；（2）10窝未受处理的大鼠和7窝暴露于尼古丁的大鼠所生的P4幼崽；（3）6窝中P3–P4年龄段的幼崽的呼吸频率。我们主要使用Welch方差分析（ANOVA）和类内相关系数（ICC）作为评估指标。重要的是，ICC能够量化原始方差分布，而ANOVA仅计算均值平方。尽管传统ANOVA检测到体重存在显著的“窝效应”，但ICC分析显示，第一组数据中约40–75%的总方差来自窝内差异。在第二组数据中，方差分布更为均匀，但窝间方差（43%）仍低于窝内方差（57%）。值得注意的是，在呼吸频率方面，几乎100%的总方差来自窝内差异。这些发现与Sprague–Dawley大鼠的遗传学和发育生物学特征相符：每个胎儿在遗传上都是独特的，并拥有自己的胎盘、独特的血流、激素水平和营养供应。因此，我们反对制定统一的规定来强制规定每窝应产多少只幼崽用于实验。相反，研究人员应根据具体的研究问题、结果变量、大鼠的遗传特性以及仔细考虑窝内和窝间的原始方差来做出决定。 
关键点
- 由于大鼠的同窝幼崽具有相同的遗传背景和围产期环境，传统观点认为窝间差异大于窝内差异，这导致统计学家和审稿人认为应以窝为单位进行实验重复，而不是以个体幼崽为单位。
- 我们对Sprague–Dawley大鼠幼崽的回顾性分析得出了相反的结果：体重（40–75%的方差来自窝内）和呼吸频率（几乎100%的方差来自窝内）的窝内差异显著大于窝间差异。
- 即使在包括暴露于尼古丁的大鼠所生幼崽的组别中，窝内方差（57%）也高于窝间方差（43%）。
- 每个Sprague–Dawley胎儿在遗传上都是独特的，拥有自己的胎盘、脐带和子宫位置——因此窝内存在显著差异是意料之中的，并不令人惊讶。
- 这些发现挑战了关于同窝幼崽同质性的传统观点，需要重新考虑使用这种大鼠品系进行发育研究的实验设计方法。
数据可用性声明
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