利用CRISPR-Cas9技术构建针对罗非鱼的无乳链球菌（Streptococcus agalactiae）疫苗，并评估其保护效果

《BMC Veterinary Research》：CRISPR-Cas9-mediated construction of a Streptococcus agalactiae vaccine for tilapia and evaluation of its protective efficacy

【字体：大中小】 时间：2026年06月02日 来源：BMC Veterinary Research 2.6

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　　摘要背景无乳链球菌（GBS）会导致罗非鱼严重的链球菌病，给水产养殖业带来巨大损失；现有的疫苗在接种方式或效力方面存在局限性。本研究利用CRISPR-Cas9技术构建了重组大肠杆菌 DH5α-ORF4-GFP（针对GBS的scpB基因ORF4片段），优化了罗非鱼的浸泡免疫剂量和频率

摘要

背景

无乳链球菌（GBS）会导致罗非鱼严重的链球菌病，给水产养殖业带来巨大损失；现有的疫苗在接种方式或效力方面存在局限性。本研究利用CRISPR-Cas9技术构建了重组大肠杆菌 DH5α-ORF4-GFP（针对GBS的scpB基因ORF4片段），优化了罗非鱼的浸泡免疫剂量和频率，并通过多维度检测评估了该疫苗的保护效果、生物安全性和监管影响。

结果

最佳免疫方案为单次浸泡，接种浓度为1.5×10⁴ CFU/mL，最大保护率为73.13%，在验证实验中保护率稳定在65.79%。接种疫苗的罗非鱼免疫指标显著提升（血小板数量增加161.40%），球蛋白水平升高，肝肾功能正常，抗氧化能力增强，且未出现组织损伤。该疫苗未改变肠道微生物的多样性，但调整了肠道微生物群落结构，丰富了有益菌类（如阿尔法变形菌门），这表明疫苗接种可能与肠道微生物群之间存在相互作用，可能有助于增强宿主的防御能力。

结论

总之，本研究成功开发了一种针对罗非鱼GBS的有效且安全的基因工程疫苗。精确的CRISPR-Cas9构建策略及其确认的免疫保护效果为控制该疾病提供了新的技术手段，并为相关基因工程疫苗的研发提供了重要参考。

背景

无乳链球菌（GBS）会导致罗非鱼严重的链球菌病，给水产养殖业带来巨大损失；现有的疫苗在接种方式或效力方面存在局限性。本研究利用CRISPR-Cas9技术构建了重组大肠杆菌 DH5α-ORF4-GFP（针对GBS的scpB基因ORF4片段），优化了罗非鱼的浸泡免疫剂量和频率，并通过多维度检测评估了该疫苗的保护效果、生物安全性和监管影响。

结果

最佳免疫方案为单次浸泡，接种浓度为1.5×10⁴ CFU/mL，最大保护率为73.13%，在验证实验中保护率稳定在65.79%。接种疫苗的罗非鱼免疫指标显著提升（血小板数量增加161.40%），球蛋白水平升高，肝肾功能正常，抗氧化能力增强，且未出现组织损伤。该疫苗未改变肠道微生物的多样性，但调整了肠道微生物群落结构，丰富了有益菌类（如阿尔法变形菌门），这表明疫苗接种可能与肠道微生物群之间存在相互作用，可能有助于增强宿主的防御能力。