长链非编码RNA CKMT2-AS1可作为骨关节炎的生物标志物，并通过miR-6720-5p参与软骨细胞的损伤过程

《Journal of Orthopaedic Surgery and Research》：Long non-coding RNA CKMT2-AS1 serves as a biomarker for osteoarthritis and participates in chondrocyte injury via miR-6720-5p

摘要

背景

长链非编码RNA（lncRNA）在骨关节炎中的作用日益受到重视。已有研究表明CKMT2-AS1在骨关节炎中表达失调，但其生物学功能尚不清楚。

目的

本研究旨在探讨CKMT2-AS1在骨关节炎中的表达和功能，以期为骨关节炎提供新的生物标志物和潜在的治疗靶点。

方法

在人类骨关节炎软骨和IL-1β诱导的软骨细胞模型中检测了CKMT2-AS1的表达情况。通过在CHON-001细胞中过表达CKMT2-AS1进行了功能增强实验。通过ELISA和RT-qPCR分别检测炎症细胞因子（IL-6、TNF-α）和细胞外基质（ECM）相关标志物（ACAN、COL2A1、MMP3、MMP13）。利用EdU、CCK-8和流式细胞术评估细胞增殖和凋亡情况。通过荧光素酶报告基因实验和RIP实验验证了CKMT2-AS1与miR-6720-5p之间的相互作用。利用生物信息学工具预测miR-6720-5p的靶基因，并对其进行了GO和KEGG富集分析。

结果

在骨关节炎软骨和IL-1β诱导的软骨细胞中，CKMT2-AS1的表达水平下调。过表达CKMT2-AS1可缓解IL-1β引起的炎症、ECM降解、细胞增殖抑制和凋亡。机制上，CKMT2-AS1作为miR-6720-5p的分子海绵，而miR-6720-5p在骨关节炎中表达上调。通过拯救实验验证了CKMT2-AS1/miR-6720-5p轴的功能作用。miR-6720-5p的过表达有效逆转了CKMT2-AS1的保护效应。此外，miR-6720-5p的靶基因主要富集在“Hippo信号通路”和“精氨酸生物合成”等通路中。

结论

本研究揭示了CKMT2-AS1在骨关节炎中的下调作用及其通过miR-6720-5p对软骨细胞损伤的保护作用，强调了其作为骨关节炎潜在治疗靶点的新功能。