通过体内CRISPR激活技术筛选肿瘤微环境调节因子，合理设计免疫基因治疗组合 可供购买

《Cancer Discovery》：Rational Design of Immune Gene Therapy Combinations via In Vivo CRISPR Activation Screen of Tumor Microenvironment Modulators Available to Purchase

　　

摘要

肿瘤微环境（TME）仍然是癌症免疫治疗面临的主要挑战。在这项研究中，我们进行了针对TME的体内CRISPR激活（CRISPRa）筛选，以识别促进抗肿瘤免疫的因素，最终开发出合理设计的免疫基因治疗组合。同时激活编码抗原呈递、T细胞增殖、共刺激和迁移（APCM）的基因可以增强抗肿瘤反应。在转移性肿瘤中进行的APCM靶向CRISPRa筛选确定了、、、、和作为主要的免疫刺激因子。进一步优化后，发现（4-1BBL）+ + （4II）是一种有效的治疗组合。腺相关病毒（AAV）4II能够增强抗原呈递、T细胞激活、增殖和细胞毒性，并促进肿瘤浸润。用AAV-4II预处理TME与嵌合抗原受体（CAR）和T细胞受体（TCR）T细胞疗法联合使用，可在体内抑制原发性和转移性实体瘤。这些发现表明，针对TME的CRISPRa筛选是开发针对实体瘤的免疫基因治疗组合的快速途径。

意义：

通过利用针对TME的体内CRISPRa筛选，我们识别出了能够增强抗肿瘤免疫的免疫调节基因，并据此设计了基于AAV的合理组合。优化的三基因组合（4II）能够增强抗原呈递和T细胞功能，并与过继性T细胞疗法协同作用，提高实体瘤和转移灶的免疫治疗效果。

数据可用性

本研究生成或分析的所有数据均包含在本文及其补充信息文件中。非NGS实验的原始数据和统计信息见补充表S2的Excel文件。基因组测序原始数据已存入GEO数据库（GSE255517）。基因组测序和基因表达（NGS实验）的处理数据以补充表S1中的量化结果形式提供。支持本研究发现的数据、代码和材料可向学术界的相关作者（S. Chen）提出合理请求后获得。