临床健康赫尔曼陆龟（Testudo hermanni）静脉血气分析探索性参考值

《Frontiers in Veterinary Science》：Exploratory values for venous blood gas analysis of clinically healthy Hermann’s tortoises (Testudo hermanni)

　　

背景：赫曼陆龟（Testudo hermanni）被国际自然保护联盟（International Union of Conservation of Nature, IUCN）列入濒危物种红色名录，并被分类为近危（Near Threatened, NT）；该物种的医学信息和知识对于保护其种群至关重要。血气分析在兽医医学中研究日益增多，但其在龟鳖类医学中的主要应用是评估海龟的健康状况；在陆龟的野外保护研究或客户拥有的宠物护理中并不常用。目的：本研究的目的是使用Radiometer? ABL735GLAXP?血气分析仪，获得临床健康赫曼陆龟（Testudo hermanni）静脉血的pH、pCO₂、pO₂、ctHb、sO₂、Hct、cK⁺、cNa⁺、cCa⁺⁺、cCl^?、cGlu、cLac、cBase、mOsm、cHCO₃^?、ctCO₂和阴离子间隙（anion gap）的探索性参考值，以作为进一步研究的起点。方法：在7月末和9月末从38只健康个体中采集样本；样本采集后立即进行血气检测。对数据进行分析以验证分布并获得探索性参考值。结果：获得的pH、cK⁺、cNa⁺、cCl^?和mOsm等分析物的值与文献报道相似；cGlu值与文献报道不同。对于其余分析物，赫曼陆龟的参考区间未知，并与其它龟鳖类物种的值进行了比较。结论：获得了静脉血气分析的探索性参考值；这些值可用于进一步研究此类诊断测试，并扩展陆龟临床医生可用的知识和方法。

赫曼陆龟（Testudo hermanni）被国际自然保护联盟（IUCN）列为近危（NT）物种，其野生种群在地中海地区持续下降，因此该物种的医学知识对种群保护至关重要。静脉血气分析是一种快速、微创的检测方法，已在兽医临床中广泛应用，尤其在急救评估和野外健康监测中。然而，在龟鳖类医学中，血气分析主要应用于海龟（如绿海龟Chelonia mydas）的健康评估和预后判断，而针对陆龟的物种特异性数据极为匮乏。现有文献中，赫曼陆龟的血气参数仅有极少数研究涉及，且大多采用生化分析而非专用血气分析仪，导致不同方法间的可比性存疑。因此，研究人员开展本研究，旨在获得临床健康赫曼陆龟的静脉血气分析探索性参考值，为后续的物种特异性研究和临床诊断提供基础。该论文发表在《Frontiers in Veterinary Science》。

研究人员从意大利托斯卡纳地区（Borgo San Lorenzo和Poggio a Caiano）客户拥有的38只健康赫曼陆龟（雌性32只，雄性6只）中采集静脉血样本。样本于7月末和9月末分两次采集，每次采集后立即使用Radiometer? ABL735GLAXP?台式血气分析仪检测17个参数（pH、pCO₂、pO₂、ctHb、sO₂、Hct、cK⁺、cNa⁺、cCa⁺⁺、cCl^?、cGlu、cLac、cBase、mOsm、cHCO₃^?、ctCO₂和阴离子间隙）。温度测量采用红外测温仪检测股前窝温度作为体温近似值。由于雌雄数量严重不均（32雌 vs 6雄），仅对32只雌性样本进行统计分析和探索性范围计算：采用Shapiro-Wilk W检验判断分布形态（正态分布p>0.05且偏度和峰度在?2至+2之间），按照美国兽医临床病理学学会（ASVCP）指南，正态分布数据用均值±2倍标准差确定探索性范围，非正态分布数据用第5和第95百分位数；雄性数据（n=6）与雌性数据通过Mann-Whitney U检验进行探索性比较。

**血液气体分析结果**
通过检测分析，17个参数中12个呈正态分布：pH、pCO₂、pO₂、ctHb、sO₂、Hct、cK⁺、cNa⁺、cCl^?、mOsm、cHCO₃^?、ctCO₂；5个呈非正态分布：cCa⁺⁺、cGlu、cLac、cBase、阴离子间隙。具体探索性范围以雌性数据为例：pH 7.36–7.68，pCO₂ 17.6–38.4 mmHg，pO₂ 22–46 mmHg，ctHb 3.6–9.2 g/dL，sO₂ 40%–80%，Hct 11.6%–28.4%，cK⁺ 3.2–5.2 meq/L，cNa⁺ 127–155 meq/L，cCl^? 96–124 meq/L，mOsm 262–318 mmol/kg，cHCO₃^? 17.4–34.6 mmol/L，ctCO₂ 38–74 Vol%，cCa⁺⁺ 2.2–3.0 meq/L，cGlu 62–200 mg/dL，cLac 0.9–3.1 mmol/L，cBase ?6.4至5.8 mmol/L，阴离子间隙 ?0.6至12.4 meq/L。与文献中赫曼陆龟的已有数据比较：pH、cK⁺、cNa⁺、cCl^?、mOsm相似，pCO₂和cGlu存在差异（cGlu值高于文献报道）；与其它龟鳖类（如绿海龟、内盖夫陆龟Testudo werneri、红脚陆龟Chelonoidis carbonarius、普通箱龟Terrapene carolina等）比较：pH、cBase、cCl^?相似，pCO₂与陆龟（红脚陆龟、箱龟）更接近而非海龟，cK⁺相似，cNa⁺、cHCO₃^?、cLac仅与部分研究一致。性别比较显示，雌雄之间仅ctHb和Hct有显著差异（p<0.05），但由于雄性样本量过小，该结果仅具探索性意义。

讨论部分总结：研究人员指出，pO₂、sO₂、Hct、ctHb、ctBil五个参数因方法学问题被认为不可靠。具体而言：pO₂在龟鳖类血液中呈非线性温度回归关系，分析仪的自动温度校正不适用；sO₂在静脉样本中临床价值有限；Hct由分析仪通过电导法计算，但龟类有核红细胞体积较大，导致低估；ctHb因龟类血红蛋白光吸收特性与哺乳动物不同，光谱测量可能不准；ctBil因分析仪检测下限较高，仅病理范围才可测出。其余参数与文献比较中，差异可能源于分析仪类型、采样部位淋巴稀释、温度校正方法及物种生理差异（如海龟对潜水缺氧的适应）。研究局限性包括：分析仪未针对爬行动物验证；采血部位（背颈静脉窦）有淋巴稀释风险；温度测量采用股前窝而非直肠温度；手动肝素化可能影响电解质；样本量不足且仅雌性数据，无法评估性别和季节变化。未来方向：需验证血气分析仪在龟类中的准确性，研究淋巴稀释对血气参数的影响，使用平衡肝素注射器，采用直肠温度校正，并在不同季节和性别间扩大样本。

结论：本研究为赫曼陆龟（Testudo hermanni）提供了静脉血气分析的描述性数据，并计算了17个参数（pH、pCO₂、pO₂、ctHb、sO₂、Hct、cK⁺、cNa⁺、cCa⁺⁺、cCl^?、cGlu、cLac、cBase、mOsm、cHCO₃^?、ctCO₂和阴离子间隙）的探索性参考范围。这些结果有助于拓展龟类血气分析和临床病理学的知识，并为陆龟临床医生提供基础性参考数据。