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与它的dSpCas9同源物相比,dSaCas9能够增强拟南芥(Nicotiana benthamiana)中的转录激活作用

《BMC Plant Biology》:dSaCas9 enables enhanced transcriptional activation in Nicotiana benthamiana compared to its dSpCas9 ortholog

【字体: 大 中 小 】 时间:2026年06月05日 来源:BMC Plant Biology 4.8

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  摘要来自金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的SaCas9已被证明在植物中诱导突变方面比常用的来自化脓性链球菌(Streptococcus pyogenes)的SpCas9更有效,并且推动了CRISPR/Cas系统的发展。相比之下,CRISPRa/Cas系

  

摘要

来自金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的SaCas9已被证明在植物中诱导突变方面比常用的来自化脓性链球菌(Streptococcus pyogenes)的SpCas9更有效,并且推动了CRISPR/Cas系统的发展。相比之下,CRISPRa/Cas系统主要使用的是SpCas9。基于前期研究,我们开发了一个模块化的CRISPRa/Cas同源系统,该系统通过单个质粒的导入来同时使用和比较SaCas9和SpCas9,以实现基因表达的增强。利用多界的Golden Gate克隆平台,我们整合了多种元件,创建了一个具有高度适应性的系统。

在本研究中,我们首次证明了dSaCas9效应子在植物中对目标启动子的报告基因激活作用比dSpCas9更强。由于这两种效应子针对相同的启动子位点,因此可以直接进行比较,结果显示dSaCas9效应子在报告基因的表达中具有更强的效果。这使得可以通过使用不同的效应子来精细调节基因的表达。此外,以< />

启动子和其截短版本为例,我们发现较低的基线表达水平可以导致相对诱导效果的增强。

来自金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的SaCas9已被证明在植物中诱导突变方面比常用的来自化脓性链球菌(Streptococcus pyogenes)的SpCas9更有效,并且推动了CRISPR/Cas系统的发展。相比之下,CRISPRa/Cas系统主要使用的是SpCas9。基于前期研究,我们开发了一个模块化的CRISPRa/Cas同源系统,该系统通过单个质粒的导入来同时使用和比较SaCas9和SpCas9,以实现基因表达的增强。利用多界的Golden Gate克隆平台,我们整合了多种元件,创建了一个具有高度适应性的系统。

在本研究中,我们首次证明了dSaCas9效应子在植物中对目标启动子的报告基因激活作用比dSpCas9更强。由于这两种效应子针对相同的启动子位点,因此可以直接进行比较,结果显示dSaCas9效应子在报告基因的表达中具有更强的效果。这使得可以通过使用不同的效应子来精细调节基因的表达。此外,以< />

启动子和其截短版本为例,我们发现较低的基线表达水平可以导致相对诱导效果的增强。
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