多聚嘌呤反向Hoogsteen发夹结构对剪接因子SF3B1和SRSF1的调控作用会影响乳腺癌细胞中雌激素受体α的剪接模式

《Cancer Cell International》：Modulation of splicing factors SF3B1 and SRSF1 by polypurine reverse Hoogsteen hairpins affects the splicing pattern of estrogen receptor α in breast cancer cells

　　

摘要

已经发现了多种人类雌激素受体α（ERα）的mRNA剪接变体，其中一些变体由于一个或多个外显子的缺失而具有与野生型66 kDa蛋白不同的功能。我们的目标是评估针对剪接因子SF3B1和SRSF1的多聚嘌呤反向Hoogsteen发夹结构（PPRHs）在乳腺癌细胞中的效果，以分析ERα剪接模式的潜在变化。我们设计了两种针对SF3B1的PPRHs和三种针对SRSF1的PPRHs，并在体外评估了它们的细胞毒性。HpSF3B1作用于SF3B1启动子，而HpSRSF1作用于SRSF1的外显子3，均降低了MCF-7乳腺癌细胞中相应靶蛋白的水平。在这些细胞中抑制SF3B1或SRSF1会改变多个ERα外显子的包含情况（即是否被包含在最终mRNA中），并降低ERα异构体的蛋白水平。在ZR-75-1细胞系中也观察到了ERα剪接变体的变化。此外，在患者来源的异种移植细胞中，也检测到了这两种PPRHs转染后mRNA和蛋白水平的变化。最后，我们发现将针对SF3B1或SRSF1的PPRHs与他莫昔芬或4-羟基他莫昔芬联合使用，可以分别以相加或协同的方式降低MCF-7细胞的存活率。我们的结果表明，SF3B1和SRSF1参与了不同ERα剪接变体的生成，而通过PPRHs抑制这些因子可能具有治疗雌激素受体阳性乳腺肿瘤的潜力。