《Pathology》：Performance assessment of five Legionella urinary antigen tests for Legionella pneumophila and Legionella longbeachae
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摘要：军团菌病(Legionnaires' disease, LD)是由军团菌属(Legionella spp.)引起的一种重症肺炎，其中嗜肺军团菌(L.pneumophila)血清组1(serogroup 1, SG1)占欧美病例的70%~80%。在亚洲及西
摘要：军团菌病(Legionnaires' disease, LD)是由军团菌属(Legionella spp.)引起的一种重症肺炎，其中嗜肺军团菌(L.pneumophila)血清组1(serogroup 1, SG1)占欧美病例的70%~80%。在亚洲及西太平洋部分地区，长滩军团菌(L. longbeachae)亦是常见致病原。大多数尿抗原检测(Urinary Antigen Tests, UATs)仅靶向L. pneumophila SG1，限制了对其他菌种的诊断。研究人员评估了五种UATs——BinaxNOW ICT、Sofia FIA、Standard F FIA、ImmuView?及LIAISON?——以Binax EIA为参照，并以培养及PCR确认感染菌种。共检测81份尿液标本(Standard F除外，n=80)。BinaxNOW ICT对L. pneumophila SG1灵敏度最高且特异性达100%。ImmuView?对L. longbeachae灵敏度和特异性均为100%，对L. pneumophila SG1灵敏度为92.6%。在L. longbeachae感染比例较高的地区，ImmuView?可同时检测L. pneumophila SG1与L. longbeachae，是有效的初筛手段，能减少对培养或PCR等较慢方法的依赖。
论文解读：五种嗜肺军团菌及长滩军团菌尿抗原检测试剂盒的性能评估
本文发表于《Pathology》。
【研究背景与目的】
军团菌病(Legionnaires' disease, LD)是由军团菌属(Legionella spp.)引起的严重肺炎，嗜肺军团菌(L. pneumophila)血清组1(serogroup 1, SG1)为全球主要致病菌，但在亚太地区如澳大利亚、新西兰，长滩军团菌(L. longbeachae)亦占相当比例（可达30%以上）。现行尿抗原检测(Urinary Antigen Test, UAT)多仅识别L. pneumophila SG1，无法检出L. longbeachae及其他非SG1菌种，导致漏诊。培养及PCR（聚合酶链反应）虽可作确诊但耗时且依赖下呼吸道标本。因此，研究人员拟评估五种市售快速UATs（含两种可同时检测L. pneumophila SG1和L. longbeachae的试剂）对L. pneumophila SG1及L. longbeachae的临床诊断性能，以指导实验室试剂选择及流行病学调查。
【主要技术方法】
研究人员采用回顾性队列，收集81份经Binax EIA初筛阳性（76例）及阴性（5例）的冻存（-70℃）临床尿液标本，来自维多利亚传染病参比实验室(VIDRL)送检样本。除Standard F FIA因体积不足测80例外，其余四款UATs均测81例；LIAISON?因部分标本量不足补入8例新阴性标本。所有标本离心去杂质后按各试剂盒说明书操作，其中BinaxNOW ICT和Sofia FIA采用实验室验证的煮沸步骤以降低假阳性。参照标准采用Binax Legionella Urinary Antigen EIA(Abbott)，并以呼吸道标本的分离培养及实时荧光定量PCR（靶标16S rRNA或mip基因）确认具体军团菌种。统计分析计算灵敏度(Sensitivity)、特异度(Specificity)、阳性预测值(PPV)、阴性预测值(NPV)及95%置信区间(CI)。
【研究结果】
- 3.
Results
研究共纳入81份尿液标本，经Binax EIA确认54份为L. pneumophila SG1阳性，22份为未分型军团菌抗原阳性，5份阴性；其中13例经培养/PCR确认为L. longbeachae感染。
仅检测L. pneumophila SG1的三款试剂结果如下：BinaxNOW ICT灵敏度100%(95%CI 93.4–100%)、特异度100%(87.2–100%)；Standard F FIA灵敏度96.3%(87.3–100%)、特异度100%；Sofia FIA灵敏度90.7%(79.7–96.9%)、特异度92.6%(75.7–99.1)，且有2例出现交叉反应假阳性（分别为L. longbeachae及L. pneumophila SG7感染）。
ImmuView?（可检L. pneumophila SG1及L. longbeachae）对L. pneumophila SG1灵敏度92.6%(82.1–97.9%)、特异度100%；对L. longbeachae灵敏度100%(75.3–100%)、特异度100%。22例Binax EIA阳性但未分型的标本中，13例ImmuView?检出L. longbeachae，余9例含L. micdadei、L. pneumophila SG 2–14及L. bozemanae等非目标菌种未检出。
LIAISON? UAT（可检但不区分L. pneumophila及L. longbeachae）总体灵敏度86.3%(76.3–93.2%)、特异度100%(63.1–100%)，出现10例假阴性，可能受反复冻融影响抗原降解。
【讨论与结论】
讨论部分指出，本研究首次在较大样本量（含经确认13例L. longbeachae）中比较了ImmuView?及LIAISON?与其他UATs并结合培养/PCR验证。BinaxNOW ICT对L. pneumophila SG1表现最优。ImmuView?在L. longbeachae流行区具重要价值，可单管同时筛查L. pneumophila SG1与L. longbeachae，减少漏诊。LIAISON?自动化程度高但本研究中灵敏度偏低，或与标本冻融有关。研究局限性包括回顾性设计、参照标准为Binax EIA而非理想金标准（前瞻性病例定义结合培养/PCR）、阴性标本少限制特异度精确估算及L. longbeachae仍需新鲜标本进一步验证。
结论：对于L. pneumophila SG1的检测，BinaxNOW ICT具最高灵敏度与特异度；在L. longbeachae感染占比高的地区（如亚洲及西太平洋），ImmuView?因其可同时检测L. pneumophila SG1与L. longbeachae，适合作为一线初筛工具，降低对培养或PCR的依赖。各UATs性能差异可为实验室及公共卫生机构选择适宜军团菌诊断工具提供依据。
