青少年肌阵挛性癫痫中环状RNA(circRNA)表达失调

《NeuroMolecular Medicine》：Dysregulated circRNA Expression in Juvenile Myoclonic Epilepsy

　　

摘要：青少年肌阵挛性癫痫(Juvenile myoclonic epilepsy, JME)是最常见的特发性全面性癫痫(idiopathic generalized epilepsy, IGE)综合征之一，但其分子发病机制尚不完全清楚。环状RNA(circular RNAs, circRNAs)是一类稳定的非编码RNA，具有重要调控作用，在神经系统疾病中的相关性日益受到关注。本研究首次探讨5种选定的circRNA——hsa_circ_0000218、hsa_circ_0000229、hsa_circ_0000249、hsa_circ_0002010及hsa_circ_0000143与JME的关联。研究人员从41例JME患者及41例健康对照者外周血中分离总RNA，经RNase R消化线性RNA后行实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测。结果显示，与对照组相比，JME患者中hsa_circ_0002010和hsa_circ_0000143表达显著上调(均p < 0.001)，而hsa_circ_0000249表达显著下调(p < 0.001)；hsa_circ_0000218与hsa_circ_0000229组间差异无统计学意义。性别分层分析显示差异表达存在性别特异性模式，且hsa_circ_0002010和hsa_circ_0000249与药物抵抗相关。研究结果表明，特定circRNA可能参与JME相关分子通路，可为后续探索其在JME中潜在临床意义的研究提供初步依据。

论文解读：《青少年肌阵挛性癫痫中环状RNA(circRNA)表达失调》

本文发表于NeuroMolecular Medicine。青少年肌阵挛性癫痫(Juvenile myoclonic epilepsy, JME)占所有癫痫病例的5%–10%，是特发性全面性癫痫(idiopathic generalized epilepsy, IGE)最常见的亚型，以觉醒后上肢肌阵挛发作为典型特征。尽管其临床表型相对明确，但JME的分子发病机制尚未阐明，延迟诊断和误治常见，约三分之一患者发展为药物抵抗(drug-resistant)癫痫，目前缺乏有效的诊断及预后生物标志物。环状RNA(circular RNA, circRNA)是一类共价闭合的单链非编码RNA，具有组织特异性、核酸酶抗性及miRNA海绵等调控功能，已在阿尔茨海默病及部分癫痫模型中报道异常表达，但circRNA在JME中的作用此前未见报道。为此，研究人员选取既往在其他疾病中报道有调控意义的5种circRNA(hsa_circ_0000218、hsa_circ_0000229、hsa_circ_0000249、hsa_circ_0002010、hsa_circ_0000143)，通过病例–对照设计检测JME患者外周血中其表达水平变化，并分析其与临床特征(性别、药物反应、EEG表现)的关联，以初步探讨circRNA介导的表观遗传调控网络在JME中的潜在作用及临床意义。

研究人员纳入土耳其梅尔辛大学(Mersin University)神经内科确诊的41例JME患者及41例年龄与性别匹配的健康对照者，采集EDTA抗凝外周静脉血，提取总RNA后经RNase R消化线性RNA以富集circRNA，反转录合成cDNA，以hsa_circ_000284为内参，采用SYBR Green法进行qRT-PCR检测目标circRNA表达量，用2^?ΔΔCt法计算相对表达倍数变化；统计学分析采用Student's t检验或单因素方差分析(ANOVA)，p < 0.05为差异有统计学意义，样本量估算基于G*Power软件(效能85%，倍数变化阈值1.2)。

Results（结果）

整体差异表达分析显示：与健康对照相比，JME患者外周血中hsa_circ_0002010表达上调3.37倍(p < 0.001)，hsa_circ_0000143上调2.12倍(p < 0.001)，hsa_circ_0000249下调3.87倍(p < 0.001)；hsa_circ_0000218与hsa_circ_0000229在两组间无显著差异。

性别特异性表达分析显示：男性JME患者中hsa_circ_0002010显著上调(p = 0.033)，hsa_circ_0000249显著下调(p < 0.001)；女性JME患者中hsa_circ_0002010(p < 0.001，倍数变化4.30)、hsa_circ_0000143(p = 0.033，倍数变化2.59)及hsa_circ_0000218(p = 0.033，倍数变化2.49)均显著上调，提示circRNA异常表达存在性别差异。

药物反应分层分析显示：耐药JME患者中hsa_circ_0002010表达较药物敏感者显著上调(p = 0.04)，hsa_circ_0000249显著下调(p = 0.02)，提示二者可能与治疗反应相关。

EEG表现分层分析显示：不同EEG异常(包括广泛棘慢波放电与正常EEG)的JME患者间，5种circRNA表达水平均无统计学差异(p > 0.05)。

Discussion（讨论）及结论翻译

本研究首次报道特定circRNA在JME患者外周血中差异表达。hsa_circ_0002010和hsa_circ_0000143上调、hsa_circ_0000249下调，提示circRNA介导的调控网络可能参与JME分子机制。文献提示hsa_circ_0000143与hsa_circ_0002010可结合miR-1179、miR-186、miR-1248等miRNA，这些miRNA涉及神经元存活、凋亡及突触调节；hsa_circ_0000249可结合miR-155与miR-21（在癫痫中介导神经元凋亡与炎症）。性别差异及与药物抵抗的关联进一步支持其临床相关性。受限于样本量较小，本研究为探索性描述性研究，不能推断因果关系，但可为后续大样本、多中心功能研究提供依据。

结论：本研究首次提示hsa_circ_0002010、hsa_circ_0000143及hsa_circ_0000249与青少年肌阵挛性癫痫相关，且hsa_circ_0002010和hsa_circ_0000249在耐药JME患者中表达异常，为癫痫表观遗传机制研究及未来JME诊断与管理中circRNA潜在临床价值的探索提供了初步证据。