人肺结核(TB)患者中的耐药发生、相关危险因素及细胞因子IL-33的表达

《Anesthesiology》：Occurrence of drug resistance, associated risk factors, and expression of cytokine IL-33 in human TB patients

　　

背景：结核病(TB)是由结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)引起的传染性疾病，其中胸膜结核对患者照护与预后尤为关键。本研究旨在明确人胸膜结核患者中的耐药情况、相关危险因素及细胞因子IL-33的表达水平。 方法：研究人员共收集152例临床疑似患者的血清及胸膜液样本，经Gene Xpert确认54例男性与28例女性为TB阳性。确认的TB样本用于酶联免疫吸附试验(ELISA)，并与健康对照进行全血细胞分析比较。 结果：在82例Gene Xpert检测为结核分枝杆菌阳性的样本中，16例对利福平(RIF)耐药。与健康对照相比，不同年龄段及性别的胸膜TB患者IL-33均显著升高（患者<30岁组均值25.17 pg/ml，30–50岁组23.10 pg/ml，>50岁组23.05 pg/ml，对照组12.74 pg/ml）。合并HIV、乙/丙型肝炎、肺癌、糖尿病及吸烟的胸膜TB患者，IL-33表达较健康对照上调。IL-33水平与各年龄组其他血学参数呈弱相关：<30岁组与蛋白、乳酸脱氢酶(LDH)及中性粒细胞微分计数弱相关；30–50岁组与淋巴细胞、蛋白、LDH弱相关；>50岁组与总白细胞计数、中性粒细胞及淋巴细胞弱相关。 结论：胸膜TB患者对一线药物利福平存在耐药，且各年龄组胸膜TB患者细胞因子IL-33均升高。

论文解读：人胸膜结核中的耐药、危险因素与IL-33表达

研究背景与意义

结核病(TB)是由结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)引起的全球性传染病，肺外结核(EPTB)约占五分之一，其中胸膜结核是最常见的肺外类型之一，也是淋巴样胸腔积液的重要来源。目前，耐药结核(DR-TB)尤其是利福平耐药及多重耐药(MDR-TB)在全球低中收入国家持续上升，给公共卫生带来挑战。同时，胸膜结核早期诊断困难，传统涂片及培养耗时长、敏感性低；分子检测如Gene Xpert可快速检测病原及rpoB基因突变导致的利福平耐药。另一方面，细胞因子IL-33作为预警性警报素，在组织损伤及感染中释放，可通过ST₂受体调控Th₁/Th₂反应，被认为参与胸膜炎症与积液形成。然而，在巴基斯坦人群及不同风险分层中，IL-33与胸膜结核、耐药及合并症的关系尚待系统阐明。该研究发表于《Annals of Medicine and Surgery》，旨在结合Gene Xpert快速诊断、血生化参数及IL-33检测，揭示胸膜结核的耐药发生、危险因素关联及IL-33的病理生理意义。

主要关键技术方法概览

研究人员于2022年2月至2024年1月开展横断面研究，便利抽样收集 tertiary care hospital 呼吸科疑似胸膜结核患者样本。共采集152例疑似患者的胸膜液与血液，排除既往抗结核治疗者。采用Gene Xpert检测结核分枝杆菌DNA及rpoB区突变以判定利福平耐药；以腺苷脱氨酶(ADA)40–80 IU/L辅助临床诊断。患者按年龄(<30岁、30–50岁、>50岁)及性别分层，并按合并症(HIV、乙/丙型肝炎、肺癌、糖尿病、吸烟)分类。分离血清后，使用人IL-33 Platinum ELISA定量可溶性IL-33；同期在自动生化分析仪上完成全血细胞计数(TLC、DLC)、LDH、蛋白及葡萄糖检测。统计学采用均值±标准误，多组间方差分析与Tukey事后检验及Spearman相关分析。

研究结果

发生情况：Gene Xpert确诊82例胸膜结核阳性(男54，女28)。其中16例检出利福平耐药，分布于不同菌量层级(极低、低、中、高)。30–50岁年龄组阳性数最多(n=38)，其次为<30岁(n=25)及>50岁(n=19)。性别分布上，男性占比65.85%，女性34.14%；年龄分布上，30–50岁组占46.34%，<30岁组30.48%，>50岁组23.17%。

IL-33在各年龄与性别中的过表达：研究人员发现，各年龄组及两性胸膜结核患者血清IL-33均显著高于健康对照(对照12.74 pg/ml)。<30岁组均值25.17 pg/ml(女27.80 pg/ml，男23.69 pg/ml)；30–50岁组23.10 pg/ml(女25.33 pg/ml，男21.64 pg/ml)；>50岁组23.05 pg/ml(女24.82 pg/ml，男22.58 pg/ml)。女性略高于男性，但总体均呈上调。

合并症与吸烟下的IL-33升高：合并HIV的胸膜结核患者IL-33升高(男29.51 pg/ml，女24.19 pg/ml)；乙/丙型肝炎合并者升高更明显(男46.39 pg/ml，女37.09 pg/ml)；肺癌合并者亦升高(男19.60 pg/ml，女17.35 pg/ml)；糖尿病合并者(男19.06 pg/ml，女17.36 pg/ml)及吸烟者(26.18 pg/ml)均高于对照。这表明IL-33在免疫抑制及慢性炎症状态下协同上调。

血学标志物与危险因素关联：各年龄组胸膜结核患者TLC(均值约11868.9 cells/cmm)、淋巴细胞比例(均值80.94%)、蛋白(均值5.06 g/dl)、LDH(均值260.2 U/L)高于对照；中性粒细胞比例(均值18.7%)及葡萄糖(均值68.13 mg/dl)低于对照。符合典型淋巴为主渗出液特征。

IL-33与血学参数的相关：Spearman分析显示，<30岁组IL-33与中性粒细胞DLC、蛋白、LDH弱相关；30–50岁组与淋巴细胞DLC、蛋白、LDH弱相关；>50岁组与TLC、中性粒细胞及淋巴细胞DLC弱相关，且均未达到显著水平。

讨论与结论总结

讨论部分指出，性别与年龄分布(男性及30–50岁高发)与区域既往报道一致，Gene Xpert提升了EPTB及MDR-TB的早期识别。IL-33在胸膜结核中升高，与韩国、中国人群研究相仿，可能通过促进Th₁反应及IFN-γ参与胸膜炎症与积液形成。合并HIV、肝炎、肺癌、糖尿病及吸烟状态下IL-33进一步升高，呼应了其在免疫妥协与慢性感染中的多效性。血生化模式(TLC、淋巴为主、高LDH、高蛋白、低糖)符合结核性胸腔积液特点，而IL-33与这些参数在不同年龄层呈弱相关，提示其可作为非侵入性补充标志物，联合ADA及Gene Xpert优化早期诊断。

结论部分翻译：

研究人员通过Gene Xpert在54例男性与28例女性中检出胸膜结核，82例确诊样本中有16例对利福平耐药。各年龄组及合并危险因素的胸膜结核患者，血清IL-33水平及血学参数(TLC、DLC、LDH、蛋白、葡萄糖)均较健康对照升高。