杨超团队研发的配方通过PI3K/AKT/p53信号通路抑制颗粒细胞的凋亡，从而改善了早发性卵巢功能不全的症状

《Phytomedicine》：Yulin Yangchao Formula Improves Premature Ovarian Insufficiency by Inhibiting Granulosa Cell Apoptosis through the PI3K/AKT/p53 Signaling Axis

黄艳辉|刘佳|吴慧春|李阳|戴毅

摘要

背景

卵巢颗粒细胞（GCs）的异常凋亡是早发性卵巢功能不全（POI）的重要病理基础。玉林杨超方（YLYCF）在治疗POI方面显示出良好的临床疗效，但其作用机制仍不明确。

目的

本研究旨在探讨YLYCF在治疗POI中的相关靶点及其潜在分子机制。

方法

使用环磷酰胺（CTX）刺激成年雌性小鼠和卵巢颗粒细胞（KGN），建立POI的体内和体外模型。YLYCF处理后，通过评估发情周期、激素水平、卵泡发育、妊娠率、细胞凋亡和胚胎产量来体内评估小鼠的卵巢功能。在体外条件下检测KGN细胞的增殖和凋亡情况。此外，通过网络药理学方法鉴定YLYCF中的活性成分，并确定其可能用于治疗POI的靶点，这些靶点与PI3K/AKT/p53轴相关。同时，分析了参与该轴的蛋白质在CTX处理的POI小鼠的KGN细胞和卵巢组织中的表达情况。还进行了 rescue 实验，使用PI3K/AKT通路抑制剂MK-2206和p53激活剂Nutlin-3a来验证YLYCF增强卵巢功能的特定机制。

结果

CTX处理后，POI小鼠的发情周期和雌激素分泌出现紊乱，妊娠率和产仔数下降，卵巢组织中的凋亡率增加。暴露于CTX的KGN细胞表现出增殖减少和凋亡增加。YLYCF显著改善了上述POI相关症状。根据成分鉴定和网络药理学分析的结果，YLYCF中的活性成分—— glyuranolide、3′-Methoxyglabridin、glyasperin B和naringenin对AKT1和TP53具有很强的结合亲和力。此外，YLYCF处理在体内和体外POI模型中均显著激活了PI3K/AKT信号通路并抑制了p53的表达。然而，MK-2206或Nutlin-3a会抵消YLYCF对GC凋亡和卵巢功能的改善作用。

结论

YLYCF通过激活PI3K/AKT通路抑制GC凋亡，进而下调p53的表达，从而改善POI患者的卵巢功能。