从Tetrastigma hemsleyanum Diels & Gilg中筛选和富集槲皮素，以用于靶向胶束递送治疗肺癌

《Phytomedicine》：Screening and enrichment of quercetin from Tetrastigma hemsleyanum Diels & Gilg toward targeted micellar delivery for lung cancer therapy

王大洋|叶嘉硕|王子言|邹嘉欣|于冰|丛海琳

摘要

背景

:肺癌是全球死亡率最高的恶性肿瘤之一。槲皮素（Qu）是一种从Tetrastigma hemsleyanum Diels & Gilg（SYQ）中提取的黄酮类化合物，具有多靶点的抗肿瘤活性。然而，它存在提取纯度低、水溶性差以及难以实现靶向递送等问题，其抗肺癌机制仍有待阐明。

目的

:研究利用分子印迹聚合物（MIPs）富集槲皮素，并构建靶向胶束以提高其溶解度、肿瘤靶向性和生物利用度，同时通过体外细胞实验和体内动物模型探索其抗肺癌机制。

方法

:通过MIPs评估了槲皮素在SYQ提取物中的静态吸附性能。通过网络药理学和分子对接预测了关键靶点和作用途径。构建了靶向胶束，并对其粒径、形态、载药量和释放行为进行了表征。通过MTT实验、结晶紫染色、活/死细胞染色和划痕愈合实验评估了游离槲皮素和载药胶束对H1299和A549细胞的细胞毒性和迁移抑制作用。利用共聚焦显微镜观察了槲皮素的摄取效率及细胞内活性氧水平的变化。通过Western blot检测了PI3K/AKT通路蛋白的表达，并建立了H1299肿瘤小鼠模型以评估其体内分布和抗肿瘤效果。

结果

:利用1H-NMR、MALDI-TOF、Q-TOF LC/MS和FTIR从SYQ提取物中分离并鉴定了槲皮素。当槲皮素与丙烯酰胺的比例为1:7时，其平衡吸附容量达到393.26 μg/g。通过网络药理学分析，槲皮素与非小细胞肺癌（NSCLC）共有111个共同靶蛋白，其中槲皮素与BCL-2的结合能为-8.71 kcal/mol。HPP@Qu胶束的粒径为107.75 nm，载药量为6.57%，72小时后的累积释放率为55.15%。HPP@Qu显著抑制了H1299细胞的存活率和迁移能力，增加了细胞内活性氧（ROS）水平，下调了p-PI3K、p-AKT和BCL-2蛋白的表达，上调了caspase-3的活性。此外，HPP@Qu在肿瘤组织中有效积累，抑制了肿瘤小鼠的肿瘤生长，且对主要器官无明显毒性。

结论

:分子印迹聚合物（MIPs）能够选择性富集高纯度的槲皮素。靶向胶束提高了槲皮素的溶解度和肿瘤靶向性，有效抑制了肿瘤生长。槲皮素通过升高ROS水平、抑制PI3K/AKT通路、下调BCL-2蛋白以及激活Caspase-3诱导H1299细胞凋亡。这些发现表明槲皮素作为潜在的天然抗癌候选药物的科研价值。